Penggunaan teknologi selular untuk meningkatkan penampilan parut

Sains moden dicirikan oleh perkembangan pesat beberapa disiplin berkaitan, bersatu di bawah nama umum "bioteknologi." Ini cabang sains, berdasarkan pencapaian terkini dalam bidang biologi, sitologi, genetik molekul, kejuruteraan genetik, transplantantologii, bertujuan untuk memanfaatkan potensi besar sel-sel tumbuhan dan haiwan - unit struktur asas segala yang hidup. "Sel Hidup bersedia reaktor bioteknologi dalam yang dilaksanakan bukan sahaja proses yang membawa kepada pembentukan produk akhir, tetapi juga beberapa sistem lain memudahkan penyelenggaraan aktiviti pemangkin pada tahap yang tinggi" - John Woodward, 1992. Sains Bermula sel telah dimasukkan ke dalam 1665, apabila ahli fizik Inggeris R. Hooke mencipta mikroskop pertama dan dalam plak yang dijumpai sel - sel ("sel"). Pada tahun 1829, M. Schleiden dan T. Schwann membuktikan "teori selular", yang membuktikan bahawa semua makhluk hidup terdiri daripada sel-sel. R.Virkhov pada tahun 1858 telah membuktikan, bahawa berdasarkan semua pelanggaran penyakit organisasi struktur dan metabolisme sel meletakkan. Dia menjadi pengasas "patologi selular." Sumbangan asas kepada sains sel telah dibuat pada tahun 1907-1911. R. Garrison dan AA Maksimov, membuktikan kemungkinan membiak sel-sel di luar tubuh. Kerja mereka menunjukkan bahawa untuk penanaman sel-sel, tisu-tisu haiwan dan bahagian tumbuhan harus dipisahkan secara mekanik kepada kepingan-kepingan kecil. Untuk mengasingkan sel-sel, tisu dipotong dengan pisau tajam atau mikrotom di bahagian nipis, kira-kira 0.5-1.0 mm. Bahagian fizikal sel dipanggil immobilization. Sel terisolasi diperolehi oleh penyebaran enzimatik keping tumbuhan atau tisu. Selepas menghancurkan dengan gunting yang tajam, kepingan-keping dirawat dengan trypsin atau collagenase untuk mendapatkan penggantungan - penggantungan sel individu atau mikroorganit mereka dalam medium khusus. Gel alginate (kalsium alginat) digunakan secara meluas untuk melancarkan sel tumbuhan. Dibuktikan bahawa sel tumbuhan dan haiwan yang tidak bergerak mengekalkan keupayaan untuk biosintesis. Produk biosintesis selular terkumpul di dalam sel, ekspresi mereka berlaku secara spontan, atau dengan bantuan bahan khas yang menggalakkan peningkatan ketelapan membran sel.

Penanaman sel haiwan adalah proses yang lebih rumit daripada penanaman sel tumbuhan, yang memerlukan peralatan moden yang istimewa, teknologi tinggi, kehadiran pelbagai media, faktor pertumbuhan yang dirancang untuk mengekalkan daya maju sel-sel dan mengekalkannya dalam keadaan yang berfungsi tinggi. Telah didapati bahawa kebanyakan sel-sel tisu keras, seperti buah pinggang, hati, dan tisu kulit bergantung pada permukaan, jadi in vitro mereka hanya boleh dibudidayakan dalam bentuk lapisan nipis atau monolayers yang secara langsung melekat pada permukaan substrat. Umur panjang, percambahan dan kestabilan fungsi sel yang diperolehi oleh penyebaran tisu enzimatik bergantung kepada sebahagian besarnya pada substrat di mana ia ditanam. Adalah diketahui bahawa semua sel yang diperolehi dari tisu vertebrata mempunyai muatan permukaan yang negatif, sehingga substrat yang dikenakan positif sesuai untuk imobilisasi mereka. Sel-sel terisolasi yang diperoleh secara langsung dari seluruh tisu boleh dikekalkan dalam budaya utama dalam keadaan tidak bergerak di samping mengekalkan kekhususan dan kepekaan yang tinggi untuk 10-14 hari. Sel-sel yang bergantung kepada sel-sel, memainkan peranan penting dalam biologi pada hari ini, terutamanya peranan mereka adalah penting untuk kajian klinikal. Mereka digunakan untuk mengkaji kitaran perkembangan sel, peraturan pertumbuhan dan pembezaan, perbezaan fungsi dan morfologi antara sel normal dan tumor. Monolayers sel imobilisasi digunakan dalam biotest, untuk penentuan kuantitatif bahan biologi aktif, serta untuk mengkaji kesan pelbagai ubat dan toksin pada mereka. Minat yang besar dalam sel, sebagai alat perubatan, telah ditunjukkan oleh doktor semua kepakaran selama beberapa dekad. Ke arah ini, teknologi sel berkembang pesat.

Dengan permulaan terapi tisu dan sel, nama ahli sains Rusia terkenal V.P. Filatov, yang pada tahun 1913 meletakkan asas bagi ajaran terapi tisu mengkaji pemindahan kornea penderma sihat untuk pesakit katarak .. Dalam operasi, pemindahan kornea, dia mendapati bahawa kornea dipelihara dalam sejuk selama 1-3 hari pada suhu -2 -4 darjah C mendapat lebih baik daripada segar. Oleh itu, didapati bahawa harta sel merembes dalam keadaan yang tidak menyenangkan, beberapa bahan yang merangsang proses hidup dalam tisu yang dipindahkan dan menjana semula dalam tisu penerima. Tisu dan sel-sel yang dipisahkan dari tubuh adalah dalam keadaan pengalaman, iaitu kehidupan yang melambatkan. Di dalamnya, peredaran darah berhenti, dan seterusnya pemakanan. Pernafasan tisu adalah sangat sukar, pemuliharaan dan trofi adalah kecewa. Menjadi dalam keadaan kualitatif yang baru, menyesuaikan diri dengan keadaan baru kewujudan sel, mereka menghasilkan bahan khas yang mempunyai sifat perubatan. Bahan-bahan bukan protein ini dinamakan oleh V.P. Filatov sebagai perangsang biogenik. Ia V.V.Skorodinskoy ditetapkan bersama-sama dengan bahan dari haiwan dan tumbuhan boleh bebas T autoklaf pada 120 darjah C selama satu jam selepas penyimpanan dalam keadaan yang buruk, sedang mereka tidak hanya tidak kehilangan aktiviti, tetapi sebaliknya ia diperkukuhkan, oleh kerana hasil perangsang biologi daripada tisu tin. Di samping itu, mereka kehilangan sifat-sifat antigen, yang dapat mengurangkan kemungkinan penolakan. Bahan steril yang di dalamnya disuntik ke dalam badan dengan implantasi (penanaman semula) di bawah kulit atau dalam bentuk suntikan ekstrak, dengan hasil yang mencukupi. Ia juga mendapati bahawa tisu janin mengandungi lebih banyak bahan aktif secara biologi daripada tisu dewasa, dan beberapa faktor hanya terdapat dalam embrio. Disuntik tisu janin penerima organisma tidak dilihat sebagai asing tidak hadir dalam komposisi protein membran sitoplasma bertanggungjawab spesies, tisu, dan kekhususan individu (protein, kompleks histocompatibility utama). Hasil daripada inokulasi dalam tisu manusia janin haiwan tidak mencetuskan mekanisme imunologi pertahanan dan tindak balas, dan penolakan ketidakserasian. VP Filatov dalam amalan perubatan secara meluas menggunakan plasenta dan kulit manusia. Kursus rawatan terdiri daripada 30-45 suntikan ekstrak tisu dan 1-2 implan tisu autoklaf.

Setelah memulakan penyelidikan dengan tisu dan sel manusia dan haiwan, dia memindahkan generalisasinya ke dunia tumbuhan. Menghasilkan uji kaji ke atas bahagian-bahagian yang hidup, tumbuh-tumbuhan (aloe, pisang, agave, puncak bit, dan Wort St John, dan lain-lain), beliau mencipta mereka kepada keadaan yang buruk dengan meletakkan potongan daun di tempat yang gelap, kerana untuk kehidupan tumbuhan memerlukan cahaya. Dari tanah gambut berlumpur dan gambut mereka juga diberikan stimulator biogenik, disebabkan oleh fakta bahawa lumpur dan gambut dibentuk dengan penyertaan mikroflora dan mikrofauna.

Satu pusingan baru terapi tisu pembangunan yang diterima dalam tahun 70-an-an, apabila pengetahuan dan dekad pengalaman yang terkumpul telah membolehkan tahap yang baru keseluruhannya untuk menggunakan haiwan dan sayur-tisu dan sel-sel untuk rawatan manusia dan memanjangkan umur panjang yang aktif. Jadi di beberapa klinik tempatan dan beberapa wanita warga asing dalam menopaus fisiologi, menopaus atau oophorectomy latar belakang untuk memperlahankan proses penuaan, perkembangan aterosklerosis, osteoporosis, disfungsi sistem imun, endokrin dan saraf mula mengadakan terapi tisu tisu janin plasenta, hipotalamus, hati, ovari, timus dan tiroid kelenjar. Dalam salah satu yang paling berprestij di klinik Gerontius-kosmetik di Eropah Barat untuk tujuan yang sama selama beberapa dekad menggunakan ekstrak suntikan, berasal daripada tisu janin kelenjar seks biri-biri.

Di negara kita, rawatan biostimulasi juga telah digunakan secara meluas. Pesakit dengan pelbagai penyakit sehingga suntikan baru-baru ini aktif ditadbir ekstrak plasenta, lidah, kolanhoe, stonecrops besar (biosed) fibs, peloidodistillyat, peloidin, torfot, gumizol disediakan oleh prosedur Filatov. Pada masa ini di farmasi adalah hampir mustahil untuk membeli berprestasi tinggi dan tisu domestik kos rendah ini persediaan haiwan, sayur-sayuran dan asal mineral.

Mendasari mendapatkan pelbagai persiapan nutrien daripada tisu dan organ-organ manusia yang diimport, seperti rumalon (dari tisu rawan dan sum-sum tulang) aktovegin (dari darah anak lembu) solkoseril (ekstrak darah lembu) dan ubat-ubatan domestik - vitreous ( mata lembu vitreous) kerakol (dari kornea lembu), splenin (dari limpa lembu), epitalyamin (dari rantau epitalyamo-epiphyseal) juga berbohong penyelidikan Filatov. Harta bersama untuk semua persediaan tisu adalah kesan keseluruhan pada keseluruhan organisma. Oleh itu, "terapi tisu" Ahli akademik Filatov adalah asas perkembangan moden yang paling dan trend dalam pembedahan, imunologi, obstetrik dan ginekoloii, gerontologi, combustiology, dermatologi dan sel dan produk biosintesis yang berkaitan kosmetologi.

Masalah transplantasi tisu telah membangkitkan kemanusiaan sejak zaman purba. Jadi dalam papirus papirus Ebers, yang bertarikh 8,000 SM, sudah ada sebutan tentang penggunaan pemindahan tisu untuk mengimbangi kecacatan di bahagian individu badan. Dalam "Buku Kehidupan" saintis India, Sushruta, yang hidup selama 1,000 liter. BC terdapat penerangan terperinci pemulihan hidung dari kulit pipi dan dahi.

Keperluan untuk kulit penderma telah berkembang secara berkadar meningkatkan bilangan plastik dan pembedahan rekonstruktif. Dalam hal ini, dan mula menggunakan kulit janin yang sudah meninggal dunia. Terdapat keperluan untuk pemeliharaan sumber penderma dan mengenal pasti peluang untuk haiwan penggantian tisu kulit manusia, pelbagai penjelmaan simulasi kulit. Dan ia adalah di kawasan ini saintis yang bekerja apabila pada tahun 1941 P.Medovar pertama menunjukkan kemungkinan asas pertumbuhan keratinosit in vitro. Langkah seterusnya yang penting dalam pembangunan teknologi selular adalah kerja Karásek M. Dan M. Charlton, yang pada tahun 1971 dijalankan pemindahan berjaya pertama keratinosit autologous dari budaya utama luka arnab, menggunakan sebagai substrat untuk penanaman KC kolagen gel, sekali gus meningkatkan percambahan sel dalam budaya. J.Rheinvvald. H Green. Teknologi maju penanaman massa dalam kuantiti yang banyak keratinosit manusia. Pada tahun 1979, Green dan rakan sekerja menemui prospek permohonan perubatan budaya sel keratinocyte dalam pembinaan semula kulit dengan luka bakar yang banyak, selepas itu teknik ini sentiasa bertambah baik, ia mula digunakan oleh pakar bedah membakar pusat di luar negara dan di negara kita.

Dalam proses mengkaji sel-sel hidup menunjukkan bahawa sel-sel menghasilkan bukan sahaja stimulator biogenik asal bukan protein, tetapi juga beberapa cytokines, neurotransmitter, faktor pertumbuhan, polypeptides, yang memainkan peranan penting dalam pengawalan homeostasis organisma keseluruhan. Ia telah mendapati bahawa, dalam pelbagai sel-sel dan tisu-tisu yang mengandungi bioregulators peptida. Yang mempunyai spektrum yang luas aktiviti dan proses biologi menyelaras pembangunan dan fungsi sistem multisel. Era kultur sel digunakan sebagai ubatan a. Penggantungan tansplantatsiyu negara kita fibroblast dan sel keratinocyte lapisan berlamina dalam dekad yang lalu kita telah menerima pakai dalam combustiology. Apa-apa kepentingan aktif dalam pemindahan sel-sel kulit terbakar kerana keperluan penutupan pesat permukaan membakar besar dan defisit penderma kulit. Kemungkinan sebahagian kecil kulit terbesar membezakan sel-sel yang boleh meliputi permukaan luka di 1000 dan juga 10 000 kali lebih besar daripada kawasan kulit penderma adalah sangat menarik dan penting untuk Combustiology dan membakar pesakit. Peratusan lapisan engraftment keratinocyte berbeza-beza bergantung kepada kawasan terbakar, umur dan keadaan kesihatan pesakit 71,5-93,6%. Kepentingan dalam pemindahan keratinosit dan fibroblas dikaitkan bukan sahaja dengan keupayaan untuk cepat menutup kecacatan pada kulit, tetapi juga kepada fakta bahawa pemindahan ini mempunyai potensi bioaktif mujarab untuk meningkatkan penampilan tisu diperolehi daripada pemindahan organ. Neoplasma saluran darah, penyingkiran hipoksia, peningkatan trophism, kematangan tisu tidak matang dipercepatkan - bahawa asas Morpho-fungsi perubahan positif yang berlaku disebabkan oleh pembebasan sel yang dipindahkan, faktor-faktor pertumbuhan dan sitokin. Oleh itu, terima kasih kepada pengenalan ke dalam amalan klinikal maju teknologi selular pemindahan lapisan multicellular keratinosit dan fibroblas autologous dan allogeneic pada permukaan luka yang banyak, Combustiology mempunyai peluang bukan sahaja untuk mengurangkan kadar kematian dipecat dengan peratusan besar luka-luka kulit, tetapi juga untuk memperbaiki tisu berkualiti parut, yang pasti ia berlaku di tapak terbakar IIb dan IIIa dan ijazah b. Combustiologists pengalaman yang diperolehi dalam rawatan permukaan luka pada pesakit membakar mencadangkan idea untuk menggunakan sudah diubahsuai kaedah Green dalam dermatologi dan amalan pembedahan dalam pelbagai kulit dan patologi kosmetik (trofik ulser, vitiligo, nevus, epidermolysis bullosa, membuang tatu, yang berkaitan dengan usia perubahan kulit, dan juga untuk memperbaiki rupa parut).

Penggunaan keratinosit allogenic dalam pembedahan, dermatologi dan combustiology mempunyai beberapa kelebihan berbanding keratinosit autologous primeneiya sebagai bahan selular boleh disediakan terlebih dahulu dalam jumlah yang tidak terhad, dipelihara dan digunakan apabila diperlukan. Ia juga diketahui bahawa KC allogeneic mempunyai aktiviti antigenik yang berkurangan, sejak sel Langerhans, pembawa antigen dari kompleks HLA, hilang penanaman vitro. Memihak kepada penggunaan allogeneic KC juga mengatakan bahawa ia digantikan dengan autologous selepas pemindahan, menurut penulis yang berbeza dalam tempoh dari 10 hari untuk 3 bulan. Sehubungan dengan ini, bank-bank sel telah diwujudkan di banyak negara, terima kasih kepada transplantasi sel yang mana dapat dihasilkan dalam jumlah yang tepat dan pada waktu yang tepat. Bank seperti di Jerman, AS, Jepun.

Kepentingan dalam penggunaan teknologi selular dalam dermatologi dan kosmetologi disebabkan oleh hakikat bahawa "komposisi selular" membawa potensi bioenergetic dan maklumat yang kuat, terima kasih kepada yang adalah mungkin untuk mendapatkan hasil rawatan kualitatif baru. Autokiny (faktor pertumbuhan, sitokin, oksida nitrik, dan lain-lain.) Sel-sel dipindahkan diperuntukkan bertindak terutamanya kepada fibroblas mereka sendiri, meningkatkan aktiviti sintetik dan proliferatif mereka. Fakta ini amat menarik bagi para penyelidik, kerana fibroblast adalah sel utama dermis, keadaan fungsional yang bergantung kepada keadaan semua lapisan kulit. Ia juga dikenali bahawa selepas kecederaan kulit Cauter, laser, jarum dan alat-alat lain, dari sum-sum tulang, tisu adipos dan kapilari pericyte diisi semula dengan prekursor stem fibroblast kulit segar yang menggalakkan "peremajaan" Kolam sel-sel sendiri. Mereka secara aktif mula mensintesis faktor kolagen, elastin, enzim, glycosaminoglycans, pertumbuhan, dan molekul biologi aktif yang lain, yang membawa kepada meningkatkan penghidratan dan vascularization daripada derma, meningkatkan kekuatan,