Brucellae

Brucellosis adalah penyakit berjangkit unik pada manusia dan haiwan yang disebabkan oleh bakteria genus Brucella. Di Rusia, kira-kira 500 kes utama brucellosis pada manusia didaftarkan setiap tahun.

Orang ramai dijangkiti brucellosis terutamanya dari haiwan domestik (biri-biri, kambing, lembu, babi, rusa - takungan utama patogen dalam alam semula jadi). Brucellosis telah wujud untuk masa yang lama dan telah diterangkan di bawah nama yang ditentukan oleh pengedaran geografinya (Maltese, Neapolitan, Gibraltar, demam Mediterranean).

Patogen itu ditemui pada tahun 1886 oleh D. Bruce, yang menemuinya dalam penyediaan dari limpa seorang askar yang meninggal dunia akibat demam Malta, dan memanggilnya micrococcus Malta - Micrococcus melitensis. Telah ditubuhkan bahawa pembawa utamanya adalah kambing dan biri-biri, dan jangkitan berlaku apabila mengambil susu mentah daripadanya. Pada tahun 1897, B. Bang dan B. Stribolt menemui patogen pengguguran berjangkit pada lembu - Bacterium abortus bovis, dan pada tahun 1914, J. Traum menemui patogen pengguguran berjangkit pada babi - Brucella abortus suis. Kajian perbandingan sifat Brucella melitensis dan Brucella abortus bovis yang dijalankan pada tahun 1916-1918 oleh A. Ivens menunjukkan bahawa mereka hampir tidak dapat dibezakan antara satu sama lain dalam banyak sifat. Dalam hal ini, dicadangkan untuk menggabungkan mereka ke dalam satu kumpulan, dinamakan sebagai penghormatan kepada Bruce - Brucella. Pada tahun 1929, I. Heddleson memasukkan Brucella abortus suis dalam kumpulan ini dan mencadangkan membahagikan genus Brucella kepada 3 spesies: Brucella melitensis (Micrococcus melitensis), Brucella abortus (Brucella abortus bovis) dan Brucella suis (Brucella abortus suis).

Penyakit manusia dan haiwan yang disebabkan oleh brucellae telah diputuskan untuk dipanggil brucellosis. Selepas itu, genus Brucella telah ditambah dengan tiga lagi spesies: Brucella ovis diasingkan daripada domba jantan yang menderita epididymitis (1953), Brucella neotomae - daripada tikus belukar (1957) dan Brucella canis - daripada anjing hound (1966). Menurut klasifikasi Bergey (2001), brucellae tergolong dalam kelas Alphaproteobacteria.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ]

Morfologi Brucella

Brucella mempunyai sifat morfologi, tinctorial dan budaya yang serupa. Mereka adalah sel coccoid kecil gram-negatif dengan diameter 0.5-0.7 μm dan panjang 0.6-1.5 μm, terletak secara rawak, kadang-kadang berpasangan, tidak mempunyai flagella, tidak membentuk spora dan kapsul. Kandungan G + C dalam DNA ialah 56-58 mol %.

Sifat biokimia Brucella

Brucella adalah aerobes atau mikroaerofil, tidak tumbuh dalam keadaan anaerobik. Suhu optimum untuk pertumbuhan ialah 36-37 °C; pH 7.0-7.2; tumbuh dengan baik pada media nutrien konvensional, tetapi lebih baik dengan penambahan serum atau darah. Media yang disyorkan: agar nutrien dengan penambahan serum (5%) dan glukosa; agar disediakan pada infusi kentang, dengan tambahan 5% serum; agar darah; sup daging-pepton. Ciri Brucella abortus ialah keperluannya untuk kandungan CO2 yang meningkat (5-10%) dalam suasana pertumbuhan. Pertumbuhan perlahan adalah ciri brucella, terutamanya pada generasi pertama: apabila disemai dari manusia dan haiwan, pertumbuhan kadang-kadang muncul selepas 2-4 minggu. Koloni Brucella tidak berwarna, cembung, bulat - berbentuk S, atau kasar - berbentuk R, halus dan lutsinar pada mulanya, menjadi keruh dengan usia.

Koloni Brucella canis, Brucella ovis dan biotaip ke-5 Brucella suis sentiasa mempunyai bentuk R. Pertumbuhan Brucella dalam media sup disertai dengan kekeruhan seragam. Tiamin, biotin, dan niasin diperlukan untuk pertumbuhan Brucella. Brucella menapai glukosa dan arabinosa dengan pembentukan asid tanpa gas, tidak membentuk indol, dan mengurangkan nitrat kepada nitrit. Pembentukan hidrogen sulfida paling ketara dalam Brucella suis.

Secara keseluruhan, 10-14 pecahan antigen telah dikesan dalam Brucella menggunakan immunoelectrophoresis ekstrak yang disediakan daripada sel yang dimusnahkan oleh ultrasound. Brucella mempunyai antigen khusus genus biasa, pelbagai antigen somatik lain, termasuk spesies khusus M (terutama dalam Brucella melitensis), A (terutama dalam Brucella abortus) dan R (dalam bentuk kasar). Antigen M dan A juga dikesan dalam spesies lain (biovar) Brucella, tetapi dalam perkadaran yang berbeza, yang mesti diambil kira semasa mengenal pasti mereka. Antigen yang biasa kepada Francisella tularensis, Bordetella bronchiseptica dan Y. enterocolitica (serotype 09) telah dikesan. Disebabkan fakta bahawa beberapa ciri brucellae berbeza-beza, spesies Brucella melitensis dibahagikan kepada 3 biovar, spesies Brucella abortus - kepada 9 dan B. suis - kepada 5 biovar. Untuk pembezaan mereka ke dalam spesies dan biotaip dan pengenalpastian, kompleks ciri digunakan, yang termasuk, sebagai tambahan kepada sifat morfologi dan tinctorial, juga keperluan untuk CO2 untuk pertumbuhan, keupayaan untuk berkembang pada media dengan kehadiran pewarna tertentu (fuchsin asas, thionine, safranin), untuk merembeskan H2S, untuk membentuk urease, fosfatase, enzim yang paling kuat dalam enzim ini, yang diekspresikan oleh Brucellase, katalase. jangan tumbuh pada medium dengan safranin), kepekaan terhadap bakteriofaj Tbilisi, aglutinasi dengan serum monospesifik. Sekiranya perlu, ujian metabolik tambahan digunakan: keupayaan untuk mengoksidakan asid amino tertentu (alanine, asparagine, asid glutamat, ornithine, citrulline, arginin, lisin) dan karbohidrat (arabinose, galaktosa, ribosa, D-glukosa, D-erythritol, D-xylose).

Biovar keempat ialah Brucella suis, kerana pembawa utamanya bukan babi, tetapi rusa, dan mengambil kira ciri-ciri lain, adalah dinasihatkan untuk membezakannya sebagai spesies bebas, Brucella rangiferis.

Biovar B. suis kelima termasuk kultur yang diasingkan daripada lembu dan biri-biri yang digugurkan dan mengandungi bentuk R Brucella yang stabil.

Brucella ke Tbilisi phage: dalam pencairan kerja biasa, phage hanya melisiskan B. abortus. Walau bagaimanapun, dalam dos yang sama dengan sepuluh pencairan yang berfungsi, fag melisis, walaupun lemah, strain Brucella suis dan Brucella neotomae.

[ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ], [ 12 ]

Rintangan Brucella

Brucella agak tahan dalam persekitaran. Mereka bertahan dalam tanah dan air lembap sehingga 2-3 bulan, dan pada suhu 11-13 °C - sehingga 4.5 bulan; dalam air bertakung - sehingga 3 bulan; dalam susu - sehingga 273 hari; dalam mentega - sehingga 142 hari; dalam keju - sehingga 1 tahun; dalam keju feta - sehingga 72 hari; dalam susu masam - sehingga 30 hari; dalam kefir - sehingga 11 hari. Walau bagaimanapun, mereka sangat sensitif kepada suhu tinggi - pada 70 °C mereka mati selepas 10 minit, dan apabila direbus - dalam beberapa saat. Pempasteuran susu pada suhu 80-90 °C menyebabkan kematian susu selepas 5 minit. Brucella juga sensitif terhadap pelbagai bahan pembasmi kuman kimia.

Faktor patogenik Brucella

Brucella tidak membentuk eksotoksin. Patogenesis mereka adalah disebabkan oleh endotoksin dan keupayaan untuk menyekat fagositosis, mencegah "letusan oksidatif". Faktor khusus yang menyekat fagositosis belum dikaji dengan secukupnya. Patogenik brucella juga dikaitkan dengan hyaluronidase dan enzim lain. Adalah penting bahawa brucella mempunyai sifat alergen yang sangat kuat, yang sebahagian besarnya menentukan patogenesis dan gambaran klinikal brucellosis.

[ 13 ], [ 14 ], [ 15 ], [ 16 ]

Kekebalan selepas berjangkit

Imuniti selepas berjangkit adalah tahan lama dan kuat, tetapi penyakit berulang adalah mungkin. Kekebalan berkait silang (terhadap semua jenis Brucella) dan disebabkan oleh T-limfosit dan makrofaj. Pada orang dan haiwan yang imun, fagositosis selesai. Peranan antibodi dalam imuniti adalah untuk merangsang aktiviti fagositik. Reaksi alahan yang positif menunjukkan bukan sahaja pemekaan badan, tetapi juga kehadiran imuniti. Satu kejayaan dalam imuniti boleh berlaku dengan jangkitan oleh dos besar patogen atau dengan virulensi yang tinggi.

Epidemiologi brucellosis

Pembawa utama brucellosis ialah biri-biri, kambing (Brucella melitensis), lembu (Brucella abortus), babi (Brucella suis) dan rusa (Brucella rangiferis). Walau bagaimanapun, mereka juga boleh merebak ke banyak spesies haiwan lain (yak, unta, kerbau, serigala, musang, tikus, llama, saiga, bison, kuda, arnab, landak, ayam, dll.). Peralihan Brucella melitensis kepada lembu adalah sangat berbahaya, kerana dalam kes ini ia mengekalkan patogenik yang tinggi untuk manusia. Daripada semua spesies, yang paling patogenik untuk manusia di negara kita ialah Brucella melitensis. Ia menyebabkan penyakit manusia dalam lebih daripada 95-97% daripada semua kes brucellosis. Brucella abortus, sebagai peraturan, menyebabkan bentuk laten penyakit, dan manifestasi klinikal diperhatikan hanya dalam 1-3%. Brucella suis menyebabkan penyakit ini walaupun kurang kerap (kurang daripada 1%). Patogenik brucellosis berbeza-beza bergantung bukan sahaja pada spesies, tetapi juga pada biovar. Khususnya, biovar 3, 6, 7, 9 Brucella abortus tidak lebih rendah dalam virulensi daripada Brucella melitensis. Varian Brucella suis Amerika juga sangat ganas, oleh itu, peranan etiologi spesies individu brucellosis menunjukkan dirinya secara berbeza di negara yang berbeza. Sebagai contoh, di Mexico, peranan utama dalam epidemiologi brucellosis dimainkan oleh Brucella melitensis, di Amerika Syarikat - Brucella suis, dan di Kanada dan beberapa negara Eropah - Brucella abortus. Ada kemungkinan bahawa biovar 3, 6, 7, 9 Brucella abortus timbul akibat daripada penghijrahan Brucella melitensis kepada lembu dan transformasinya.

Pada haiwan, brucellosis berlaku sebagai penyakit umum, gambaran yang boleh berbeza. Untuk lembu besar dan kecil, manifestasi penyakit yang paling tipikal adalah pengguguran berjangkit, terutamanya jika ia adalah jisim. Pada babi, pengguguran adalah kurang biasa, penyakit ini berlaku sebagai sepsis kronik dengan kerosakan pada sendi, buah zakar dan organ lain. Dari haiwan yang sakit, patogen dikumuhkan dengan susu, air kencing, najis, nanah dan terutamanya dengan banyak - semasa tempoh keguguran dengan janin, membran amniotik dan pelepasan dari saluran kelahiran, yang merupakan bahan yang paling berjangkit. Pembiakan brucellae yang banyak dalam membran janin dikaitkan dengan kehadiran alkohol polihidrik - erythritol, yang berfungsi sebagai faktor pertumbuhan penting untuk Brunella semua spesies, kecuali Brucella ovis.

Seseorang dijangkiti daripada haiwan (jarang sekali daripada orang yang sakit) terutamanya melalui hubungan atau hubungan rumah tangga (80-90% daripada semua penyakit). Kaedah jangkitan makanan diperhatikan terutamanya apabila mengambil susu yang tidak dipasteurisasi daripada haiwan yang sakit atau produk tenusu yang disediakan daripadanya, serta air. Semua orang yang secara berterusan atau sementara berurusan dengan haiwan atau bahan mentah haiwan kerana profesion mereka (penggembala, penternak, pembantu susu, pekerja veterinar dan lain-lain) boleh dijangkiti melalui hubungan atau hubungan rumah tangga. Brucella memasuki tubuh manusia melalui kulit atau, lebih kerap, melalui membran mukus mulut, hidung, mata (dibawa oleh tangan yang kotor).

[ 17 ], [ 18 ], [ 19 ], [ 20 ], [ 21 ]

Gejala brucellosis

Tempoh inkubasi brucellosis berbeza dari 1 minggu hingga beberapa bulan.

Patogen memasuki nodus limfa melalui laluan limfa; mendarab, ia membentuk "kompleks brucellosis utama", penyetempatan yang bergantung pada tapak pintu masuk, tetapi selalunya ia adalah alat limfa rongga mulut, kelenjar retropharyngeal, serviks, submandibular dan radas limfa usus. Dari nodus limfa, patogen memasuki darah dan merebak ke seluruh badan, secara selektif mempengaruhi tisu sistem limfohematopoetik. Bakteremia dan generalisasi proses membawa kepada alahan teruk badan. Brucellosis berlaku sebagai sepsis kronik. Ini disebabkan oleh sifat fagositosis yang tidak lengkap. Berada dan membiak di dalam sel, termasuk fagosit, brucellae tidak boleh diakses sama ada antibodi atau ubat kemoterapi. Di samping itu, mereka boleh berubah menjadi L-bentuk di dalam sel dan dalam bentuk ini berterusan di dalam badan untuk masa yang lama, dan kembali ke bentuk asal, menyebabkan penyakit berulang.

Gejala brucellosis sangat pelbagai dan kompleks. Mereka bergantung terutamanya pada alahan dan mabuk badan dan organ dan tisu mana yang terlibat dalam proses berjangkit. Selalunya, sistem limfa, vaskular, hepatosplenik, saraf, dan terutamanya muskuloskeletal terjejas. Brucellosis dicirikan oleh kursus yang panjang (kadang-kadang sehingga 10 bulan), dalam kes-kes yang teruk ia boleh membawa kepada kehilangan jangka panjang keupayaan untuk bekerja dan kecacatan sementara, tetapi masih penyakit itu, sebagai peraturan, berakhir dengan pemulihan lengkap.

Diagnosis makmal brucellosis

Brucellosis didiagnosis menggunakan ujian biologi, kaedah bakteriologi, tindak balas serologi, ujian alahan Burnet dan kaedah hibridisasi DNA-DNA. Bahan untuk kajian adalah darah, sumsum tulang, rembesan konjunktiva, air kencing, susu ibu (pada ibu yang menyusu), kurang kerap - najis, cecair periartikular. Oleh kerana tempat kediaman utama patogen dalam badan adalah sel-sel sistem hemo- atau limfopoietik, keutamaan harus diberikan kepada pengasingan hemo- atau mielokultur. Dalam penyelidikan bakteriologi, adalah perlu untuk menyediakan syarat untuk pertumbuhan Brucella abortus (keperluan untuk CO2). Pengenalpastian kultur brucella terpencil dijalankan berdasarkan tanda-tanda yang dinyatakan dalam Jadual 30. Ujian biologi (jangkitan babi guinea) dilakukan dalam kes-kes di mana bahan tersebut banyak tercemar dengan mikroflora asing dan sukar untuk mendapatkan budaya tulen patogen secara langsung daripadanya. Reaksi serologi boleh digunakan sama ada untuk mengesan antigen patogen atau untuk mengesan antibodi terhadapnya. Untuk mengesan antigen brucellosis yang boleh beredar dalam darah sama ada dalam bentuk bebas atau dalam bentuk kompleks antigen + antibodi (CIC - kompleks imun yang beredar), tindak balas berikut digunakan: RPGA (terutamanya menggunakan diagnostik eritrosit dengan antibodi monoklonal terhadap antigen spesifik genus Brucella); tindak balas agregat-hemaglutinasi (AGR); eritrosit membawa antibodi kepada antigen brucellosis; koaglutinasi, pemendakan dan tindak balas IFM. Untuk mengesan antibodi dalam serum pesakit, perkara berikut digunakan: Tindak balas aglutinasi Wright, Tindak balas Coombs (untuk mengesan antibodi yang tidak lengkap), tindak balas imunofluoresensi tidak langsung, RPGA, IFM, RSK, OFR, serta tindak balas dipercepatkan pada kaca: Heddleson, Rose Bengal, aglutinasi lateks, tindak balas hemolisis tidak langsung dengan kehadiran LPS. antibodi dan pelengkap).

Bagaimana untuk mencegah brucellosis?

Vaksin Brucellosis adalah profilaksis khusus brucellosis. Vaksinasi dijalankan menggunakan vaksin hidup yang disediakan daripada strain B. abortus (vaksin brucellosis hidup - LBB), hanya dalam fokus brucellosis kambing dan biri-biri. Vaksin digunakan secara kutaneus, sekali. Vaksinasi semula dijalankan hanya untuk individu yang mempunyai ujian Burnet negatif dan tindak balas serologi. Oleh kerana LBB mempunyai kesan alergen yang kuat, vaksin brucellosis kimia (CBV) yang disediakan daripada antigen dinding sel brucella telah dicadangkan. Ia mempunyai imunogenik yang tinggi, tetapi kurang alergenik. Penggantungan brucellae yang terbunuh (vaksin terapeutik terbunuh) atau LBB boleh digunakan untuk merawat brucellosis kronik (merangsang pembentukan imuniti selepas jangkitan).