Imunoelektroforesis protein darah

Paraprotein biasanya tiada dalam serum darah.

Immunoglobulinopathies, atau gammopati, terdiri daripada sekumpulan besar keadaan patologi yang dicirikan oleh hipergammaglobulinemia poliklonal atau monoklonal. Imunoglobulin terdiri daripada dua rantai berat (H) (berat molekul 50,000) dan dua rantai ringan (L) (berat molekul 25,000). Rantai itu dihubungkan oleh jambatan disulfida dan terdiri daripada struktur yang dipanggil domain (H - 4, L - 2 domain). Di bawah tindakan enzim proteolitik, Ig dibahagikan kepada serpihan: serpihan Fc dan serpihan Fab. Rantai berat Ig manusia diwakili oleh lima varian struktur, yang ditetapkan oleh huruf abjad Yunani: γ, α, μ, δ, ε. Mereka sepadan dengan 5 kelas Ig - G, A, M, D, E. Rantaian ringan diwakili oleh dua varian struktur berbeza: κ (kappa) dan λ (lambda), yang sepadan dengan dua jenis Ig setiap kelas. Dalam setiap molekul Ig, kedua-dua rantai berat dan ringan adalah sama. Semua orang biasanya mempunyai Ig dari semua kelas dan kedua-dua jenis, tetapi kandungan relatif mereka tidak sama. Nisbah molekul κ dan λ dalam kelas Ig yang berbeza juga tidak sama. Pengesanan gangguan dalam nisbah Ig atau serpihannya memainkan peranan penting dalam diagnosis immunoglobulinopathies monoklonal.

Imunoglobulinopathy monoklonal (paraproteinemia) adalah sindrom yang ditunjukkan dalam pengumpulan Ig atau serpihannya homogen dalam semua parameter fizikokimia dan biologi dalam serum darah dan/atau air kencing pesakit. Monoclonal Ig (paraprotein, M-protein) adalah hasil rembesan satu klon B-limfosit (sel plasma), oleh itu ia mewakili kumpulan molekul homogen berstruktur dengan rantai berat satu kelas (subkelas), rantai ringan satu jenis dan kawasan berubah-ubah struktur yang sama. Imunoglobulinopati monoklonal biasanya dibahagikan kepada benigna dan malignan. Dalam bentuk gammopati monoklonal yang jinak, pembiakan sel plasma dikawal (mungkin oleh sistem imun) sedemikian rupa sehingga gejala klinikal tidak hadir. Dalam bentuk malignan, percambahan sel limfoid atau plasma yang tidak terkawal berlaku, yang menentukan gambaran klinikal penyakit ini.

Klasifikasi imunoglobulinopati monoklonal

Kategori gammopati onoklonal	Sifat patologi	Kepekatan Ig patologi dalam serum darah, g/l
Keganasan sel B	Mieloma berbilang, makroglobulinemia Waldenstrom	Lebih daripada 25
	Plasmacytoma (bersendirian - tulang dan extramedullary), limfoma, leukemia limfositik kronik, penyakit rantaian berat	Bawah 25
B-sel jinak	Gamopati monoklonal dari genesis yang tidak diketahui	Bawah 25
Keadaan imunodefisiensi dengan ketidakseimbangan pautan T dan B sistem imun	Primer (Wiskott-Aldrich, DiGeorge, Neselef, sindrom kekurangan imun gabungan yang teruk)	Bawah 25
	Sekunder (berkaitan dengan usia, disebabkan oleh penggunaan imunosupresan, dikaitkan dengan penyakit onkologi bukan limfoid (contohnya, kanser kolon, kanser payudara, kanser prostat, dll.)	Di bawah 2.5
Keadaan imunodefisiensi dengan ketidakseimbangan pautan T dan B sistem imun	Penstrukturan semula sistem imun selepas pemindahan sumsum tulang merah	Bawah 25
	Rangsangan antigen pada ontogenesis awal (jangkitan intrauterin)	Bawah 25
Tindak balas imun yang homogen	Jangkitan bakteria	Bawah 25
	Penyakit autoimun seperti cryoglobulinemia, SLE, rheumatoid arthritis, dll.	Bawah 25

Imunoelektroforesis protein serum darah membolehkan untuk mengesan rantai monoklonal (patologi) IgA, IgM, IgG, H dan L, paraprotein. Semasa elektroforesis konvensional, Ig normal, sifat heterogen, terletak di zon γ, membentuk dataran tinggi atau jalur lebar. Ig monoklonal, kerana kehomogenannya, berhijrah terutamanya ke zon γ, kadang-kadang ke zon β dan juga ke rantau α, di mana ia membentuk puncak tinggi atau jalur yang dibatasi jelas (M-gradient).

Mieloma berbilang (penyakit Rustisky-Kahler) adalah hemoblastosis paraproteinemik yang paling biasa; ia dikesan tidak kurang kerap daripada leukemia myelo- dan limfositik kronik, limfogranulomatosis dan leukemia akut. Kelas dan jenis Ig patologi yang dirembeskan oleh myeloma menentukan varian imunokimia penyakit. Kekerapan kelas dan jenis Ig patologi dalam myeloma umumnya berkorelasi dengan nisbah kelas dan jenis Ig normal pada orang yang sihat.

Bersama dengan peningkatan kandungan Ig patologi dalam serum pesakit dengan pelbagai myeloma, Ig normal ditentukan dalam kepekatan yang dikurangkan. Kandungan jumlah protein meningkat secara mendadak - sehingga 100 g / l. Aktiviti proses dalam G-myeloma dinilai oleh bilangan sel plasma dalam tusukan sternum, kepekatan kreatinin dan kalsium dalam serum darah (peningkatan kalsium menunjukkan perkembangan penyakit). Kepekatan M-protein (dalam air kencing dipanggil protein Bence-Jones) berfungsi sebagai kriteria untuk menilai perkembangan penyakit dalam A-myeloma. Kepekatan paraprotein dalam serum dan air kencing berbeza-beza semasa perjalanan penyakit di bawah pengaruh terapi.

Untuk membuat diagnosis pelbagai myeloma, kriteria berikut mesti dipenuhi.

yang besarkriteria

1. Plasmacytoma berdasarkan keputusan biopsi.
2. Plasmacytosis dalam sumsum tulang merah (lebih daripada 30% sel).
3. Puncak Ig monoklonal (patologi) pada elektroforesis protein serum: lebih daripada 35 g/L untuk puncak IgG atau lebih daripada 20 g/L untuk puncak IgA. Perkumuhan rantai κ dan λ dalam jumlah 1 g/hari atau lebih, dikesan oleh elektroforesis air kencing pada pesakit tanpa amyloidosis.

Kecilkriteria

1. Plasmacytosis dalam sumsum tulang merah 10-30% daripada sel.
2. Puncak PIg dalam serum adalah kurang daripada jumlah yang ditunjukkan di atas.
3. Lesi tulang litik.
4. Kepekatan IgM normal adalah di bawah 0.5 g/L, IgA di bawah 1 g/L, atau IgG di bawah 0.6 g/L.

Untuk mendiagnosis pelbagai myeloma, sekurang-kurangnya 1 kriteria major dan 1 minor atau 3 kriteria minor dengan kehadiran mandatori kriteria yang disenaraikan dalam mata 1 dan 2 diperlukan.

Untuk menentukan peringkat myeloma, sistem standardisasi Durie-Salmon digunakan, yang mencerminkan jumlah kerosakan tumor.

Semua kumpulan myeloma dibahagikan kepada subkelas bergantung kepada keadaan fungsi buah pinggang: A - kepekatan kreatinin serum di bawah 2 mg% (176.8 μmol/l), B - lebih daripada 2 mg%. Dalam penyakit myeloma, kepekatan tinggi β ₂ -microglobulin dalam serum darah (lebih daripada 6000 ng/ml) mencadangkan prognosis yang tidak menguntungkan, serta aktiviti LDH yang tinggi (melebihi 300 IU/l, set tindak balas pada 30 °C), anemia, kegagalan buah pinggang, hiperkalsemia, hipoalbuminemia dan jumlah tumor yang besar.

Penyakit rantaian ringan (Bence Jones myeloma) menyumbang kira-kira 20% daripada kes myeloma. Dalam myeloma Bence Jones, hanya rantai cahaya bebas yang terbentuk, yang dikesan dalam air kencing (protein Bence Jones), tanpa kehadiran Ig patologi serum (M-gradient).

Peringkat Multiple Myeloma

pentas	Kriteria	Jisim tumor (bilangan sel), x10 12 /m 2
Saya	Myeloma kecil jika kriteria berikut dipenuhi: Kepekatan hemoglobin dalam darah lebih tinggi daripada 100 g/l; Kepekatan jumlah kalsium dalam serum darah adalah normal (<3 mmol/l); Tiada perubahan tulang pada radiografi atau plasmacytoma tunggal tulang; Kepekatan paraprotein yang rendah dalam serum darah (IgG di bawah 50 g/l, IgA di bawah 30 g/l); Rantai L (protein Bence Jones) dalam air kencing kurang daripada 4 g/24 jam	<0.6
II	Mieloma pertengahan (kriteria adalah antara peringkat I dan III)	0.6-1.2
III	Myeloma utama dengan satu atau lebih kriteria berikut: Kepekatan hemoglobin dalam darah adalah di bawah 85 g/l; Jumlah kepekatan kalsium serum melebihi 12 mg% (3 mmol/L); Kerosakan rangka yang meluas atau patah tulang besar; Kepekatan tinggi paraprotein dalam serum darah (IgG lebih daripada 70 g/l, IgA lebih daripada 50 g/l); Rantai L (protein Bence Jones) dalam air kencing lebih daripada 12 g/24 jam.	>1,2

Varian imunokimia yang jarang berlaku bagi penyakit myeloma termasuk myeloma bukan rembesan, di mana paraprotein boleh dikesan hanya dalam sitoplasma sel myeloma, serta myeloma diklonal dan M-myeloma.

Makroglobulinemia Waldenström ialah leukemia subleukemik kronik yang berasal dari sel B, secara morfologi diwakili oleh limfosit, sel plasma dan semua bentuk peralihan sel yang mensintesis PIgM (macroglobulin). Tumor mempunyai tahap keganasan yang rendah. Dalam sumsum tulang merah, percambahan limfosit basofilik kecil (limfosit plasmacytoid) dikesan, bilangan sel mast meningkat. Elektroforegram protein serum darah mendedahkan kecerunan M dalam zon β- atau γ-globulin, kurang kerap paraprotein tidak berhijrah dalam medan elektrik, kekal di tempatnya. Secara imunokimia, ia adalah PIgM dengan satu jenis rantai ringan. Kepekatan PIgM dalam serum darah dalam makroglobulinemia Waldenström berkisar antara 30 hingga 79 g / l. Protein Bence Jones ditemui dalam air kencing dalam 55-80% pesakit. Kepekatan Ig normal dalam darah berkurangan. Kegagalan buah pinggang berkembang jarang.

Limfoma. Limfoma yang merembeskan IgM adalah yang paling kerap direkodkan, tempat kedua diduduki oleh limfoma paraproteinemik yang merembeskan IgG, limfoma dengan paraproteinemia IgA sangat jarang dikesan. Penurunan kepekatan Ig normal (biasanya pada tahap yang kecil) dalam limfoma direkodkan pada kebanyakan pesakit.

Penyakit rantai berat ialah limfoma sel B yang menghasilkan serpihan monoklonal rantai berat Ig. Penyakit rantaian berat sangat jarang berlaku. Terdapat 4 jenis penyakit rantai berat: α, γ, μ, δ. Penyakit rantai berat γ biasanya berlaku pada lelaki di bawah umur 40 tahun dan dicirikan oleh pembesaran hati, limpa, nodus limfa, bengkak lelangit lembut dan lidah, eritema, dan demam. Kemusnahan tulang biasanya tidak berkembang. Kepekatan globulin patologi dalam serum darah adalah rendah, dan ESR adalah normal. Sel-sel limfoid dan sel plasma yang berbeza-beza tahap kematangan terdapat dalam sumsum tulang. Penyakit ini berkembang pesat dan berakhir dengan kematian dalam beberapa bulan. Penyakit rantai berat dikesan terutamanya pada orang tua dan paling kerap ditunjukkan oleh hepatosplenomegali. Substrat tumor adalah unsur limfoid dengan kematangan yang berbeza-beza. Kes terpencil penyakit rantai berat δ telah diterangkan, ia berlaku sebagai myeloma. α penyakit rantai berat adalah bentuk yang paling biasa, berkembang terutamanya pada kanak-kanak dan orang di bawah 30, 85% daripada kes didaftarkan di Mediterranean. Imunoelektroforesis serum darah dan air kencing adalah satu-satunya kaedah untuk mendiagnosis penyakit, kerana kecerunan M klasik pada elektroferogram protein serum sering tidak hadir.

Paraproteinemia reaktif berlaku dengan kehadiran kecenderungan genetik sebagai tindak balas kepada jangkitan bakteria dan virus (hepatitis, jangkitan CMV) atau pencerobohan parasit (leishmaniasis, toxoplasmosis, schistosomiasis). Bentuk imunoglobulinopati monoklonal ini telah didaftarkan dalam pemindahan organ, rawatan dengan sitostatik, imunodefisiensi keturunan atau diperolehi. Paraproteinemia sementara dicirikan oleh kepekatan PIg serum yang rendah, ketiadaan atau jumlah surih protein Bence Jones dalam air kencing.

Paraproteinemia yang berkaitan mengiringi beberapa penyakit dalam patogenesis yang mana mekanisme imun memainkan peranan: penyakit autoimun, tumor, jangkitan kronik. Penyakit tersebut termasuk AL amyloidosis dan cryoglobulinemia.

Paraproteinemia idiopatik berlaku pada orang tua dan mungkin mewakili keadaan premyeloma. Dalam kes sedemikian, pemeriksaan menyeluruh diperlukan untuk mengenal pasti peringkat awal penyakit dan pemerhatian dinamik jangka panjang.

Tanda-tanda paraproteinemia benigna termasuk: ketiadaan protein Bence Jones, perubahan dalam kepekatan Ig normal, bilangan sel plasma dalam sumsum tulang yang menyedut kurang daripada 15%, limfosit kurang daripada 20%, kepekatan paraprotein serum di bawah 30 g/L.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]