Sel stem hematopoietik

Sel-sel stem hematopoietik (HSCs) sebagai sel-sel leluhur mesenchymal dicirikan oleh multipotency dan menimbulkan bahagian sel, unsur-unsur terhingga yang membentuk sel-sel darah dan sesetengah sel tisu khusus sistem imun.

Hipotesis kewujudan moyang yang sama semua sel-sel darah, dan juga "sel stem" istilah, yang dimiliki oleh A. Maximov (1909) Potensi pembentukan jisim sel daripada GSK besar -. Bone sel-sel sum-sum stem menghasilkan sel-sel hari ke-10 yang membentuk korpuskel darah periferal itu sendiri. Kewujudan sel-sel stem hematopoietic telah ditubuhkan pada tahun 1961 dalam eksperimen ke atas pemulihan hematopoiesis dalam tikus yang menerima dos maut pendedahan radiasi yang memusnahkan sel-sel sum-sum tulang stem. Pos iaitu pemindahan sel-sel sum-sum tulang syngeneic supaya lethally radiasi haiwan tumpuan diskret hematopoiesis dikesan di limpa penerima yang sumber - single sel-sel leluhur clonogenic.

Kemudian, keupayaan sel stem hematopoietik untuk menyokong diri ditunjukkan, yang menyediakan fungsi hematopoiesis semasa ontogenesis. Dalam proses pembangunan embrio, HSC dicirikan oleh aktiviti penghijrahan yang tinggi, yang diperlukan untuk penghijrahan mereka ke tapak organ hematopoietik. Properti HSCs ini dikekalkan juga dalam ontogenesis - disebabkan migrasi berterusan mereka, pembaharuan tetap kumpulan sel imunokompeten berlaku. Keupayaan GSK untuk berhijrah, menembusi halangan histoematologi, implan dalam tisu dan pertumbuhan klonogenik menjadi asas bagi pemindahan tulang sumsum dalam beberapa penyakit yang berkaitan dengan patologi sistem hematopoiesis.

Seperti semua sumber sel stem, sel-sel stem hematopoietic terdapat di dalam niche anda (sum-sum tulang) dalam kuantiti yang sangat kecil, yang membawa kepada kesukaran tertentu dalam peruntukan mereka. HSCs manusia Immunophenotypic mempunyai ciri-ciri sebagai sel CD34 + NK mampu berhijrah ke dalam aliran darah dan menjajah organ sistem imun atau repopulate stroma sumsum tulang. Ia adalah perlu untuk memahami dengan jelas bahawa GSK tidak sel-sel sum-sum tulang yang tidak matang, dan berasal dari prekursor, termasuk dormantnye sel fibroblast SB34-negatif. Ia telah mendapati bahawa sel-sel dengan fenotip CD34 dapat memasuki aliran darah, di mana perubahan fenotip mereka dalam CD34 +, tetapi penghijrahan pulangan dalam sum-sum tulang di bawah pengaruh mikro sekali lagi menjadi unsur-unsur sel stem CD34-negatif. Pada rehat ~ CD34-sel tidak bertindak balas terhadap isyarat paracrine peraturan stroma (faktor pertumbuhan, sitokin). Walau bagaimanapun, dalam situasi yang memerlukan intensiti penguatan sel-sel stem hematopoietic dengan CD34 phenotype bertindak balas terhadap isyarat pembezaan membentuk kedua-dua hematopoietic dan sel-sel leluhur mesenchymal. Hematopoiesis dijalankan oleh hubungan secara langsung dengan unsur-unsur sel GSK daripada stroma sumsum tulang menyampaikan rangkaian kompleks makrofaj, sel-sel endothelial reticular, osteoblas, fibroblas stromal dan matriks extracellular. Tulang rangka kerja sumsum stromal - bukan sahaja matriks atau "skeleton" untuk tisu hematopoietik, ia membawa peraturan denda hematopoiesis kerana isyarat peraturan paracrine faktor pertumbuhan, sitokin dan chemokines, dan juga menyediakan interaksi pelekat perlu untuk pembentukan sel-sel darah.

Oleh itu, asas sistem hematopoietik terus dikemas kini terletak pluripotent (dari sudut pandangan hematopoiesis) sel-sel hematopoietic stem mampu jangka panjang pembaharuan diri. Semasa proses melakukan, HSCs menjalani pembezaan utama dan membentuk klon sel yang berbeza dalam ciri sitomorfologi dan imunofenotip mereka. Pembentukan sel-sel progenitor primitif dan komited berturut-turut diselesaikan dengan pembentukan sel-sel nenek morfologi yang dapat dikenal pasti dari pelbagai jenis hematopoietik. Hasil daripada peringkat seterusnya proses berbilang kompleks adalah kematangan sel-sel hematopoietic dan hasil matang untuk darah periferi elemen terbentuk - eritrosit, leukosit, limfosit dan platelet.

[1], [2], [3],

Sumber sel stem hematopoietik

Sel-sel stem hematopoietik dianggap sumber stem yang paling dikaji, yang sebahagian besarnya disebabkan oleh penggunaannya di klinik pemindahan sum-sum tulang. Pada pandangan pertama, banyak yang diketahui tentang sel-sel ini. Sedikit sebanyak ini adalah benar, kerana keturunan pertengahan dan matang GSK - unsur-unsur sel yang paling berpatutan, setiap yang (eritrosit, leukosit, limfosit, monosit / makrofaj dan platelet) sedang dikaji secara menyeluruh di semua peringkat - dari cahaya kepada elektron mikroskop, dari ciri-ciri biokimia dan imunofenotip sebelum dikenalpasti oleh analisis PCR. Walau bagaimanapun, pemantauan yang dijalankan oleh morfologi, ultrastructural, biokimia, immunophenotypic, dan parameter biofizikal daripada genom GSK tidak menghasilkan jawapan kepada banyak isu-isu bermasalah, penyelesaian yang perlu untuk pembangunan pemindahan sel. Ia masih belum mewujudkan mekanisme penstabilan GSK dalam keadaan tidak aktif, ia diaktifkan, memasuki peringkat bahagian simetri atau tidak simetri, dan yang paling penting - komitmen kepada pendidikan sebagai sel-sel fungsi yang berbeza darah, eritrosit, leukosit, limfosit, dan platelet.

Kehadiran dalam sel-sel sum-sum tulang dengan fenotip CD34, yang merupakan nenek moyang kedua-dua mesenchymal dan hematopoietic sel-sel stem telah menimbulkan persoalan mengenai kewujudan hampir paling awal sel-sel CD34-negatif dalam pembezaan sel leluhur dan garis stromal hematopoietic. Kaedah penanaman yang berpanjangan telah diperolehi oleh budaya jangka panjang yang dipanggil "memulakan sel-sel '(budaya memulakan sel jangka panjang - LTC-IC). Jangka hayat sel-sel leluhur seperti di tanah jajahan aktiviti stromal sumsum tulang berdasarkan gabungan faktor-faktor pertumbuhan membentuk lebih daripada 5 minggu, manakala daya maju unit tanah jajahan membentuk komited (CFU) dalam budaya hanya 3 minggu. Ia kini dipercayai bahawa LTC-IC - analog berfungsi GCW sebagai repopulyatsionnom pada potensi yang tinggi kira-kira 20% LTC-IC dicirikan oleh fenotip CD34 + CD38- dan mempamerkan kapasiti yang tinggi untuk pembaharuan diri. Sel-sel tersebut dijumpai di dalam sum-sum tulang manusia dengan kekerapan 01:50 000. Walau bagaimanapun, ia perlu diiktiraf sel limfoidoinitsiiruyuschie-mieloid paling dekat dengan HSC yang didapati di bawah syarat-syarat jangka panjang (15 minggu) budaya. Sel-sel tersebut ditetapkan sebagai LTC, antara sel-sel sum-sum tulang manusia terdapat dalam 10 kali kurang daripada LTC-IC, dan terbentuk garisan sel mieloid dan batang hemopoietic limfoid.

Walaupun sel-sel stem hematopoietic pelabelan dengan antibodi monoklonal, diikuti dengan pengenalan immunophenotypic adalah kaedah utama untuk mengenal pasti dan menyusun terpilih sel stem hematopoietic dengan penggunaan klinikal potensi berdedikasi GSK itu terhad. Menyekat CD34 antibodi reseptor antigen atau penanda lain semasa menyusun immunopositive tidak dapat tidak mengubah sifat-sifat sel terpencil dengannya. Lebih lebih suka dianggap immunonegativnoe pilihan GSK pada tiang magnet. Walau bagaimanapun, dalam kes ini, penyisihan biasanya digunakan antibodi monoklonal, tetap pada sokongan logam. Juga, penting, kedua-dua kaedah peruntukan GSK berdasarkan fenotip, dan bukannya ciri-ciri fungsi. Oleh itu, ramai penyelidik memilih untuk menggunakan analisis parameter clonogenic GSK, yang membolehkan saiz dan komposisi tanah jajahan untuk menentukan tahap kematangan dan arah pembezaan sel-sel leluhur. Adalah diketahui bahawa dalam proses melakukan bilangan sel-sel dan bilangan jenis di tanah jajahan dikurangkan. Sel stem hematopoietik dan sel anak yang awal, yang dipanggil "granulocyte-eritrosit unit monosit-megakariotsitokolonieobrazuyuschaya" (SFU-GEMM), mewujudkan budaya multilinear koloni besar yang mengandungi, masing-masing, granulocytes, eritrosit, monosit dan megakaryocytes. Terletak di bawah garis unit granulocyte-keturunan komitmen monotsitokolonieobrazuyuschaya (SFU-GM) menjana koloni granulosit dan makrofaj, dan unit tanah jajahan membentuk granulocytic (SFU-G) - hanya jajahan kecil granulocytes matang. Awal eritrosit pendahulu - unit burstoobrazuyuschaya sel-sel darah merah (SFU-E) - adalah sumber merah koloni sel darah unit besar dan lebih matang membentuk (SFU-E) - kecil jajahan sel darah merah. Dalam populasi umum, dengan pertumbuhan sel-sel dalam media separuh pepejal boleh mengenal pasti sel-sel membentuk enam jenis jajahan mieloid: SFU-GEMM, GM-SFU, SFU-G, M-SFU, VFU-E dan E-SFU).

Walau bagaimanapun, sebagai tambahan kepada derivatif hematopoietik, sebarang bahan sumber untuk pemisahan HSC mengandungi sejumlah besar sel bersamaan. Dalam hubungan ini, pembersihan awal pemindahan, pertama sekali, sel-sel aktif sistem imun penderma adalah perlu. Biasanya digunakan untuk immunoselection ini berdasarkan pada ungkapan antigen tertentu dengan limfosit, yang membolehkan mereka untuk diasingkan dan dikeluarkan dengan menggunakan antibodi monoklonal. Di samping itu, teknik immunorozetochnaya T-limfosit habis pemindahan sum-sum tulang, yang berdasarkan kepada pembentukan kompleks CD4 + limfosit dan antibodi monoklonal tertentu cekap dikeluarkan menggunakan apheresis. Teknik ini menyediakan bahan sel yang dimurnikan dengan 40-60% sel stem hematopoietik.

Meningkatkan bilangan sel-sel leluhur kerana penyingkiran sel-sel darah matang dari produk leukapheresis dicapai dengan pengemparan counterflow diikuti oleh penapisan (di hadapan pengkelat yang - trisodium citrate) melalui ruangan yang mengandungi serat nilon bersalut dengan immunoglobulin manusia. Penggunaan urutan kedua-dua teknik menyediakan pembersihan lengkap rasuah dari platelet sebanyak 89% - daripada eritrosit dan dengan 91% - dari leukosit. Oleh kerana penurunan yang ketara dalam kehilangan HSC, tahap CD34 + sel dalam jumlah jisim sel boleh ditingkatkan menjadi 50%.

Untuk ciri-ciri fungsian sel stem hematopoietik yang terpencil, keupayaan mereka untuk mewujudkan koloni unsur-unsur darah matang dalam budaya digunakan. Analisis koloni terbentuk memungkinkan untuk mengenal pasti dan mengukur jenis sel-sel progenitor, tahap yang mereka lakukan, dan untuk menentukan arah pembezaan mereka. Aktivitas klonogenik ditentukan dalam media separa pepejal pada metilcellulosa, agar, plasma atau gel fibrin, yang mengurangkan aktiviti penghijrahan sel, yang menghalang lampiran mereka pada permukaan kaca atau plastik. Di bawah keadaan budaya yang optimum, klon dari sel tunggal berkembang dalam masa 7-18 hari. Sekiranya terdapat kurang daripada 50 sel dalam klon, ia dikenal pasti sebagai kumpulan tunggal, jika jumlah sel melebihi 50 - sebagai tanah jajahan. Bilangan sel yang mampu membentuk koloni (unit pembentukan koloni - CFU atau sel pembentuk koloni - COC) diambil kira. Harus diingat bahawa parameter CFU dan COC tidak sesuai dengan jumlah HSC dalam penggantungan sel, walaupun ia berkaitan dengannya, yang sekali lagi menggariskan keperluan untuk menentukan fungsi (pembentukan koloni) HSC secara in vitro.

Di antara sel-sel sum-sum tulang, sel stem hematopoietik mempunyai potensi proliferatif tertinggi, yang mana koloni-koloni terbesar terbentuk dalam budaya. Dengan jumlah koloni sedemikian, ia dicadangkan untuk secara tidak langsung menentukan bilangan sel stem. Selepas pembentukan koloni in vitro melebihi 0.5 mm diameter dan dengan bilangan sel 1000, penulis telah menguji kestabilan sel-sel ini untuk sublethal dos 5-fluorourasil dan diteliti kemampuan mereka untuk repopulate sumsum tulang lethally haiwan sinaran. Menurut parameter ini, sel terpencil tidak banyak berbeza dari HSC dan menerima simbol singkatan HPP-CFC - sel pembentuk koloni dengan potensi proliferatif yang tinggi.

Mencari kemungkinan pemilihan sel stem hematopoietik yang lebih kualitatif berterusan. Walau bagaimanapun, sel-sel hematopoietik batang mirip morfologi limfosit dan mewakili set sel yang agak homogen dengan nukleus hampir bulat, kromatin halus yang tersebar dan sejumlah kecil sitoplasma yang lemah-basophilic. Nombor yang tepat juga sukar untuk ditentukan. Dianggap bahawa GSK dalam sumsum tulang seseorang terjadi dengan kekerapan 1 setiap sel yang mengandungi 106 nukleus.

Pengenalpastian sel stem hematopoietik

Untuk meningkatkan pengenalan sel stem hematopoietic dijalankan secara berturutan atau pada masa yang sama (pada sorbitan berbilang saluran tere) penyelidikan membrannosvyazannyh spektrum antigen, di mana GSK phenotype CD34 + CD38 perlu digabungkan dengan kekurangan penanda pembezaan linear, terutamanya antigen sel immunocompetent seperti CD4 dan imunoglobulin permukaan glycophorin.

Secara praktiknya semua skema phenotyping sel stem hematopoietik termasuk penentuan antigen CD34. Glikoprotein ini dengan jisim molekul kira-kira 110 kDa, membawa laman glycosylation beberapa dinyatakan pada membran sel plasma selepas pengaktifan gen setempat pada kromosom 1. Fungsi molekul CD34 dikaitkan dengan interaksi L-selectin-mediated sel-sel prekursor awal hematopoietik dengan asas stromal sumsum tulang. Walau bagaimanapun, perlu diingat bahawa kehadiran CD34 antigen pada permukaan sel membenarkan hanya membuat penilaian awal daripada kandungan GSK dalam penggantungan sel, kerana ia dinyatakan, dan lain-lain sel-sel leluhur hematopoietic dan sel-sel stromal sumsum tulang dan sel-sel endothelial.

Semasa pembezaan sel-sel progenitor hematopoietik, ungkapan CD34 dikurangkan secara kekal. Erythrokytik, leluhur komited granulocytic dan monocytic memuat lemah menyatakan antigen CD34, sama ada pada permukaannya ia tidak hadir (phenotype CD34). Pada membran permukaan sel yang dibezakan dari sumsum tulang dan sel darah matang, antigen CD34 tidak dikesan.

Ia harus diperhatikan bahawa dalam dinamik pembezaan sel-sel leluhur hematopoietic bukan sahaja mengurangkan tahap ungkapan daripada CD34, tetapi selari ungkapan progresif daripada CD38 antigen - penting Glikoprotein membran dengan berat molekul 46 kDa mempunyai NAD-glikogidrolaznoy dan aktiviti cyclase ADP-ribosyl, menunjukkan penglibatannya dalam pengangkutan dan sintesis ADP-ribose. Oleh itu, terdapat kemungkinan kawalan dua darjah untuk melakukan sel-sel progenitor hematopoietik. Penduduk sel dengan phenotype CD34 + CD38 +, daripada 90 kepada 99% sel-sel sum-sum tulang CD34 positif terdiri daripada sel-sel leluhur dengan terhad proliferatif pembezaan berpotensi dan, manakala dengan phenotype sel CD34 + CD38 boleh menuntut peranan GSK itu.

Sesungguhnya, sel-sel sum-sum tulang yang dijelaskan oleh formula CD34 + CD38- mengandungi sejumlah besar sel induk primitif yang dapat membezakan dalam arah myeloid dan limfoid. Dalam konteks penanaman jangka panjang dengan phenotype sel CD34 + CD38- berjaya mendapatkan semua sel-sel darah matang: neutrofil, eosinofil, basophils, monosit, megakaryocytes, eritrosit dan limfosit.

Baru-baru ini, sel-sel CD34 positif meluahkan dua lagi penanda - AC133 dan CD90 (Thy-1), yang juga digunakan untuk mengenal pasti sel stem hematopoietik. Antigen-1 adalah sama dengan reseptor CD117 (c-kit) pada sel CD34 + sumsum tulang, tali pusat dan darah periferal. Ini adalah permukaan phosphatidylinositol mengikat glikoprotein dengan berat molekul 25-35 kDa, yang mengambil bahagian dalam proses perekatan sel. Beberapa penulis percaya bahawa antigen Thy-1 adalah penanda sel CD34 yang paling tidak matang. Sel-sel penghasilan semula dengan phenotype CD34 + Thy-1 + menimbulkan garis lama yang ditanam dengan pembentukan sel anak perempuan. Adalah dicadangkan bahawa antigen Thy-1 menghalang isyarat pengawalseliaan yang menyebabkan bahagian sel berhenti. Walaupun pada hakikatnya bahawa sel-sel CD34 + Tu1 + mampu pembaharuan diri dan pembentukan garis-garis berbudaya jangka panjang, phenotype mereka tidak boleh dikaitkan semata-mata untuk HSC, kerana Thy-1 + kandungan dalam jumlah berat unsur-unsur sel CD34 positif kira-kira 50%, jauh melebihi bilangan sel hematopoietik.

Lebih cerah untuk mengenal pasti sel-sel stem haematopoietic harus mengakui AC133 - penanda antigen sel-sel leluhur hematopoietik, ungkapan yang pertama kali dikesan pada sel-sel hati embrio. AC133 - Glikoprotein transmembran yang muncul pada permukaan membran sel pada peringkat awal kematangan GSK - ia adalah mungkin bahawa walaupun sebelum antigen CD34 itu. Dalam kajian A. Petrenko dan V. Grishchenko (2003), didapati bahawa AC133 mengekspresikan sehingga 30% sel CD34 positif pada hati embrionik.

Oleh itu, profil yang ideal fenotip sel stem hematopoietic mengikut konsep hari ini, jumlah garis sel, dalam litar yang perlu hadir CD34 antigen konfigurasi, AC133 dan Thy-1 tetapi tidak ada tempat bagi unjuran molekul CD38, HLA-DR dan penanda pembezaan linear GPA , CD3, CD4, CD8, CD10, CD14, CD16, CD19, CD20.

GSK fenotip Perubahan potret mungkin gabungan CD34 + CD45RalowCD71low, kerana sifat-sifat sel digambarkan oleh formula ini tidak berbeza daripada parameter fungsi sel-sel dengan phenotype CD34 + CD38 itu. Di samping itu, manusia HSC boleh dikenal pasti dengan tanda-tanda fenotip CD34 + Thy-l + CD38Iow / 'c-kit / rendah - hanya 30 sel-sel ini benar-benar memulihkan hematopoiesis pada tikus lethally sinaran.

Daripada analisis ciri-ciri fenotip umum sel-sel sum-sum tulang sebenarnya bermula 40 tahun penyelidikan intensif GSK pada masa yang sama mampu kedua-dua pembaharuan diri dan pembezaan kepada unsur-unsur sel yang lain, yang membolehkan untuk membenarkan penggunaan tulang sumsum pemindahan untuk merawat pelbagai pathologies sistem hemopoietic. Baru-baru ini ditemui jenis sel stem baru belum digunakan secara meluas dalam amalan klinikal. Walau bagaimanapun, sel stem dari tali pusat darah (saraf) dan hati janin ketara boleh mengembangkan pemindahan sel bukan sahaja dalam hematologi, tetapi juga dalam bidang-bidang lain perubatan, berbeza daripada HSC tulang sumsum sebagai prestasi dan kualiti ciri-ciri kuantitatif.

Jisim jisim sel hematopoietik batang yang diperlukan untuk pemindahan biasanya diperolehi daripada sumsum tulang, darah periferal dan tali, dan juga dari hati embrionik. Di samping itu, sel-sel progenitor hematopoiesis boleh diperoleh secara in vitro oleh penyebaran ESC diikuti oleh pembezaan arahnya ke dalam unsur-unsur sel hematopoietik. A. Petrenko, V. Grishchenko (2003) memang menunjukkan perbezaan yang signifikan sifat imunologi dan keupayaan untuk memulihkan hematopoiesis GSK asal yang berbeza, kerana nisbah yang tidak sama rata yang terkandung dalam sumber-sumber mereka pluripotent awal dan leluhur kemudian komited. Di samping itu, sel-sel stem hematopoietik yang berasal dari sumber-sumber batang berbeza mempunyai persatuan-persatuan sel hemopoietik yang berbeza-beza secara kuantitatif dan kualitatif.

Sumber tradisional sel stem hematopoietik adalah sumsum tulang. Suspensi sel sum-sum tulang diperolehi dari tulang abdomen atau sternum oleh larut lesap di bawah anestesia tempatan. Penggantungan itu diperolehi adalah heterogen dan terdiri daripada campuran GSK unsur-unsur sel stromal sel leluhur komited untuk mieloid dan limfoid baris dan sel-sel darah yang matang. Jumlah sel dengan fenotip CD34 + dan CD34 + CD38 di antara sel mononuklear sumsum tulang adalah 0.5 hingga 3.6 dan 0 hingga 0.5%, masing-masing. Darah periferal selepas pengguguran G-CSF yang disebabkan oleh HSC mengandungi 0.4-1.6% CD34 + dan 0-0.4% CD34 + CD38.

Satu peratusan yang lebih tinggi daripada sel-sel dengan CD34 + CD38 immunophenotype dan darah tali CD34 + - dan 0-0,6 OD-2.6%, dan bilangan maksimum mereka dikesan di kalangan sel-sel hati janin hematopoietic - dan 2,3 0,2-12,5 -35.8%, masing-masing.

Walau bagaimanapun, kualiti bahan rasuah bukan hanya bergantung kepada jumlah yang terkandung di dalamnya CD34 + sel-sel, tetapi juga kepada aktiviti kerja mereka, yang boleh dianggarkan dengan tahap pembentukan koloni in vivo (sumsum repopulation pada haiwan lethally sinaran) dan in vitro - pertumbuhan koloni di media separuh pepejal . Ia telah mendapati bahawa tanah jajahan membentuk dan aktiviti proliferatif sel leluhur hemopoietic dengan phenotype CD34 + CD38 HLA-DR, diasingkan daripada hati janin, janin sumsum tulang dan darah tali pusat, dan banyak melebihi kapasiti proliferatif sel koloni-membentuk hematopoietic sumsum tulang dan darah periferi orang dewasa. Analisis kuantitatif dan kualitatif GSK asal yang berbeza mendedahkan perbezaan yang signifikan kandungan relatif dalam penggantungan sel, dan fungsi. Jumlah maksimum CD34 + sel (24.6%) didapati dalam bahan transplantasi yang diperolehi daripada sumsum tulang janin. Sumsum tulang manusia dewasa mengandungi 2.1% unsur-unsur sel positif CD34. Antara sel-sel mononuklear dewasa manusia darah periferi hanya 0.5% mempunyai fenotip CD34 +, manakala darah tali jumlah mereka mencapai 2%. Oleh itu tanah jajahan membentuk keupayaan CD34 + sel-sel sum-sum tulang janin sebanyak 2.7 kali melebihi kapasiti pertumbuhan klon sumsum tulang hematopoietic sel-sel manusia dewasa dan sel-sel darah tali Borang jajahan jauh lebih besar daripada unsur-unsur hematopoietic diasingkan daripada darah periferi orang dewasa: 65,5-40 dan , 8 koloni / 105 sel.

Perbezaan dalam aktiviti proliferatif dan keupayaan pembentukan koloni sel stem hematopoietik tidak hanya dikaitkan dengan tahap kematangan yang berbeza, tetapi juga dengan alam sekitar alam semulajadi mereka. Adalah diketahui bahawa keamatan proliferasi dan pembezaan sel-sel stem kelajuan yang ditentukan oleh pengaruh kawal selia yang penting dalam sistem pelbagai komponen faktor pertumbuhan dan sitokin yang dihasilkan oleh kedua-dua sel-sel stem dan unsur-unsur sel mikro matriks-stromal. Menggunakan populasi sel suci dan media yang bebas serum dengan tujuan untuk kultur sel yang memberikan faktor pertumbuhan dicirikan yang mempunyai kesan perangsangan dan melarang pada sel-sel stem daripada pelbagai peringkat, sel-sel leluhur dan sel-sel komited ke arah linear tertentu. Hasil kajian yang dilakukan secara meyakinkan memberi kesaksian bahwa GSK, yang diperoleh dari sumber-sumber dengan tahap perkembangan ontogenetik yang berlainan, berbeza secara fenotip dan fungsional. Untuk GSK, tinggal di peringkat awal ontogeny, dicirikan oleh potensi tinggi untuk pembiakan diri dan aktiviti proliferatif yang tinggi. Sel-sel tersebut dibezakan oleh panjang telomere yang panjang dan tertakluk kepada pembentukan semua sel-sel sel hematopoietik. Reaksi sistem imun ke asal embrio HSC ditangguhkan, kerana sel-sel semacam itu mengekspresikan molekul HLA. Terdapat penggredan yang jelas tentang kandungan relatif HSCs dan keupayaan mereka untuk diri memperbaharui dan bilangan talian mereka membentuk jenis komitmen: sel-sel CD34 + hati janin> sel CD34 + darah tali> CD34 + sel-sel sum-sum tulang. Ia adalah penting bahawa perbezaan tersebut tidak unik untuk intra dan neo postanatalnomu tempoh awal pembangunan manusia, tetapi juga di seluruh ontogeny - proliferatif dan tanah jajahan membentuk aktiviti HSCs berasal dari sum-sum tulang atau darah periferi orang dewasa, berkadar songsang dengan usia penderma.