Pakar perubatan artikel itu
Penerbitan baru
Analisis polimorfisme panjang pecahan pecahan
Ulasan terakhir: 23.04.2024
Semua kandungan iLive disemak secara perubatan atau fakta diperiksa untuk memastikan ketepatan faktual sebanyak mungkin.
Kami mempunyai garis panduan sumber yang ketat dan hanya memautkan ke tapak media yang bereputasi, institusi penyelidikan akademik dan, apabila mungkin, dikaji semula kajian secara medis. Perhatikan bahawa nombor dalam kurungan ([1], [2], dan lain-lain) boleh diklik pautan ke kajian ini.
Jika anda merasakan bahawa mana-mana kandungan kami tidak tepat, ketinggalan zaman, atau tidak dipersoalkan, sila pilih dan tekan Ctrl + Enter.
Penggunaan luas pelbagai endonuclease sekatan untuk analisis DNA kromosom menunjukkan variasi yang besar dalam genom manusia. Walaupun perubahan kecil dalam pengekodan dan kawasan peraturan gen struktur boleh membawa kepada penamatan sintesis protein tertentu atau untuk kehilangan fungsinya dalam tubuh manusia yang biasanya memberi kesan kepada phenotype pesakit. Walau bagaimanapun, kira-kira 90% daripada genom manusia terdiri daripada urutan bukan pengekodan yang lebih berubah-ubah dan mengandungi banyak mutasi yang dipanggil neutral, atau polimorfisme, dan tidak mempunyai ungkapan fenotip. Tapak polymorphic (loci) tersebut digunakan dalam diagnosis penyakit keturunan sebagai penanda genetik. Loki polymorphic hadir dalam semua kromosom dan dikaitkan dengan rantau tertentu gen. Setelah menentukan lokalisasi lokus polimorf, mungkin untuk menentukan genom mutasi yang dikaitkan yang menyebabkan penyakit dalam pesakit.
Untuk mengasingkan kawasan polimorfik DNA, enzim bakteria digunakan - enzim sekatan, produk yang mana adalah tapak sekatan. Mutasi spontan yang berlaku di laman polimorfik menjadikannya tahan atau, sebaliknya, sensitif terhadap tindakan enzim sekatan tertentu.
Kebolehubahan mutasi dalam laman sekatan dapat dikesan dengan mengubah panjang serpihan DNA yang dibatasi, dengan memisahkannya menggunakan elektroforesis dan hibridisasi berikutnya dengan probe DNA tertentu. Dalam ketiadaan sekatan di tapak polimorf, satu pecahan besar akan dikesan pada elektrophoregram, dan jika ada, serpihan yang lebih kecil akan hadir. Kehadiran atau ketiadaan tapak sekatan dalam lokus identik kromosom homologous membolehkan kemungkinan untuk label label gen mutant dan normal dan mengesan penghantarannya kepada anak-anak. Oleh itu, dalam kajian DNA pesakit, di kedua-dua kromosom di mana tapak sekatan hadir di kawasan polimorfik, serpihan pendek DNA akan diturunkan pada electrophoregram. Pada pesakit homozygous untuk mutasi yang mengubah tapak sekatan polymorphic, serpihan panjang yang lebih besar akan dikesan, dan dalam serpihan heterozigot, serpihan pendek dan panjang akan dikenalpasti.
[