Pakar perubatan artikel itu
Penerbitan baru
Analisis polimorfisme panjang serpihan sekatan
Ulasan terakhir: 05.07.2025
Semua kandungan iLive disemak secara perubatan atau fakta diperiksa untuk memastikan ketepatan faktual sebanyak mungkin.
Kami mempunyai garis panduan sumber yang ketat dan hanya memautkan ke tapak media yang bereputasi, institusi penyelidikan akademik dan, apabila mungkin, dikaji semula kajian secara medis. Perhatikan bahawa nombor dalam kurungan ([1], [2], dan lain-lain) boleh diklik pautan ke kajian ini.
Jika anda merasakan bahawa mana-mana kandungan kami tidak tepat, ketinggalan zaman, atau tidak dipersoalkan, sila pilih dan tekan Ctrl + Enter.
Penggunaan meluas pelbagai endonuklease sekatan untuk analisis DNA kromosom telah mendedahkan kebolehubahan besar genom manusia. Malah perubahan kecil dalam pengekodan dan kawasan pengawalseliaan gen struktur boleh menyebabkan pemberhentian sintesis protein tertentu atau kehilangan fungsinya dalam tubuh manusia, yang biasanya menjejaskan fenotip pesakit. Walau bagaimanapun, kira-kira 90% daripada genom manusia terdiri daripada jujukan bukan pengekodan, yang lebih berubah-ubah dan mengandungi banyak yang dipanggil mutasi neutral, atau polimorfisme, dan tidak mempunyai ekspresi fenotip. Kawasan polimorfik (loci) sedemikian digunakan dalam diagnosis penyakit keturunan sebagai penanda genetik. Lokus polimorfik terdapat dalam semua kromosom dan dikaitkan dengan kawasan gen tertentu. Dengan menentukan penyetempatan lokus polimorfik, adalah mungkin untuk menentukan gen mana yang dikaitkan dengan mutasi yang menyebabkan penyakit pada pesakit.
Untuk mengasingkan kawasan DNA polimorfik, enzim bakteria digunakan - restrictases, produk yang merupakan tapak sekatan. Mutasi spontan yang berlaku di tapak polimorfik menjadikannya tahan atau, sebaliknya, sensitif terhadap tindakan restrictase tertentu.
Kebolehubahan mutasi dalam tapak sekatan boleh dikesan dengan menukar panjang serpihan sekatan DNA dengan mengasingkannya menggunakan elektroforesis dan hibridisasi seterusnya dengan probe DNA tertentu. Sekiranya tiada sekatan dalam tapak polimorfik, satu serpihan besar akan dikesan pada elektroforegram, dan dengan kehadirannya, serpihan yang lebih kecil akan hadir. Kehadiran atau ketiadaan tapak sekatan dalam lokus serupa kromosom homolog membolehkan pelabelan yang agak boleh dipercayai bagi gen mutan dan normal dan menjejaki penghantarannya kepada keturunan. Oleh itu, apabila mengkaji DNA pesakit dalam kedua-dua kromosom yang mana tapak sekatannya terdapat dalam kawasan polimorfik, serpihan DNA pendek akan dikesan pada elektroforegram. Pada pesakit homozigot untuk mutasi yang mengubah tapak sekatan polimorfik, serpihan yang lebih panjang akan dikesan, dan pada pesakit heterozigot, serpihan pendek dan panjang.
[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]