Hepatitis C PCR

HCV biasanya tiada dalam bahan.

Tidak seperti kaedah serologi untuk mendiagnosis hepatitis C virus, yang mengesan antibodi kepada HCV, PCR membolehkan untuk mengesan kehadiran RNA HCV secara langsung dan untuk mengukur kepekatannya dalam bahan ujian. Ujian ini mempunyai kekhususan spesies dan kepekaan yang tinggi: sepuluh molekul RNA HCV dalam bahan ujian sudah cukup untuk mengesannya. Pengesanan antibodi kepada HCV hanya mengesahkan fakta jangkitan pesakit, tetapi tidak membenarkan untuk menilai aktiviti proses berjangkit (replikasi virus) dan prognosis penyakit. Di samping itu, antibodi kepada HCV dikesan dalam darah pesakit dengan hepatitis akut dan kronik, dan pada pesakit yang sakit dan pulih, dan selalunya antibodi dalam darah muncul hanya beberapa bulan selepas permulaan gambaran klinikal penyakit, yang merumitkan diagnosis. Pengesanan HCV dalam darah menggunakan PCR adalah kaedah diagnostik yang lebih bermaklumat. Pengesanan RNA HCV dalam PCR menunjukkan viremia, membolehkan untuk menilai replikasi virus dalam badan dan berfungsi sebagai salah satu kriteria untuk keberkesanan terapi antiviral. Pengesanan RNA HCV oleh PCR pada peringkat awal jangkitan virus dengan ketiadaan lengkap sebarang penanda serologi boleh berfungsi sebagai bukti jangkitan terawal. Walau bagaimanapun, pengesanan terpencil RNA HCV dengan ketiadaan lengkap mana-mana penanda serologi lain tidak boleh mengecualikan sepenuhnya keputusan PCR positif palsu. Dalam kes sedemikian, penilaian menyeluruh terhadap kajian klinikal, biokimia dan morfologi dengan pengesahan berbilang berulang tentang kehadiran jangkitan oleh PCR adalah perlu.

Penggunaan kaedah PCR pada pesakit dengan hepatitis C virus kronik adalah sangat penting, kerana kebanyakan mereka tidak mempunyai korelasi antara kehadiran replikasi virus dan aktiviti enzim hati. Dalam kes sedemikian, hanya PCR yang membolehkan kita menilai kehadiran replikasi virus, terutamanya jika keputusan akhir dinyatakan secara kuantitatif. Dalam kebanyakan kes penyakit ini, kehilangan RNA HCV dari serum darah berlaku lebih lewat daripada normalisasi enzim hati, jadi normalisasi mereka tidak boleh berfungsi sebagai asas untuk menghentikan rawatan antivirus.

Secara praktikalnya penting untuk memeriksa bukan sahaja serum darah, tetapi juga limfosit dan spesimen hepatobiopsi menggunakan kaedah PCR untuk mengesan RNA HCV. Virus boleh dikesan 2-3 kali lebih kerap dalam tisu hati daripada dalam serum darah. Apabila menilai keputusan ujian serum darah untuk RNA HCV, harus diingat bahawa viremia boleh berubah-ubah sifatnya (serta perubahan dalam aktiviti enzim). Oleh itu, selepas keputusan ujian PCR positif, keputusan negatif boleh diperolehi dan begitu juga sebaliknya. Dalam kes sedemikian, adalah lebih baik untuk memeriksa spesimen hepatobiopsi untuk menyelesaikan sebarang keraguan yang timbul.

Pengesanan RNA HCV dalam bahan menggunakan PCR digunakan untuk tujuan berikut:

• penyelesaian keputusan ujian serologi yang dipersoalkan;
• pembezaan hepatitis C virus daripada bentuk hepatitis lain;
• pengenalpastian peringkat akut penyakit berbanding dengan jangkitan atau sentuhan sebelumnya; penentuan peringkat jangkitan bayi baru lahir daripada ibu HCV-seropositif;
• memantau keberkesanan rawatan antivirus.

Pesakit yang disyaki hepatitis C virus:

• penderma;
• orang yang mempunyai faktor risiko;
• individu yang mempunyai aktiviti ALT yang tinggi;
• pesakit dengan hepatitis akut

Semua ciri penilaian keputusan dan pendekatan yang dinyatakan di atas untuk diagnosis HCV menggunakan PCR juga terpakai kepada jangkitan lain.

Kaedah PCR membolehkan bukan sahaja untuk mengesan RNA HCV dalam bahan yang sedang dikaji, tetapi juga untuk menubuhkan genotipnya. Penentuan genotip virus adalah sangat penting untuk pemilihan pesakit dengan hepatitis C virus kronik untuk rawatan dengan interferon-alpha dan ribavirin. Petunjuk makmal untuk rawatan hepatitis C virus kronik dengan interferon alpha adalah seperti berikut:

• peningkatan aktiviti transaminase;
• kehadiran RNA HCV dalam darah;
• Genotip HCV 1;
• viremia yang tinggi dalam darah (lebih daripada 8×10 ⁵ salinan/ml).

Pada masa ini, adalah mungkin untuk menentukan secara kuantitatif kandungan RNA HCV dalam serum darah menggunakan kaedah PCR, yang sangat penting untuk memantau rawatan interferon alpha. Tahap viremia dinilai seperti berikut: dengan kandungan RNA HCV dari 10 ² hingga 10 ⁴ salinan/ml - lemah; daripada 10 ⁵ hingga 10 ⁷ salinan/ml - purata, melebihi 10 ⁸ salinan/ml - tinggi. Dengan rawatan yang berkesan, tahap viremia berkurangan.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]