Reaksi rantai polimerase (PCR) dalam diagnosis penyakit berjangkit
Ulasan terakhir: 23.04.2024
Semua kandungan iLive disemak secara perubatan atau fakta diperiksa untuk memastikan ketepatan faktual sebanyak mungkin.
Kami mempunyai garis panduan sumber yang ketat dan hanya memautkan ke tapak media yang bereputasi, institusi penyelidikan akademik dan, apabila mungkin, dikaji semula kajian secara medis. Perhatikan bahawa nombor dalam kurungan ([1], [2], dan lain-lain) boleh diklik pautan ke kajian ini.
Jika anda merasakan bahawa mana-mana kandungan kami tidak tepat, ketinggalan zaman, atau tidak dipersoalkan, sila pilih dan tekan Ctrl + Enter.
PCR - salah satu kaedah untuk diagnostik DNA yang membolehkan untuk meningkatkan bilangan salinan sebahagian dikesan genom (DNA) bakteria atau virus adalah satu juta kali menggunakan enzim polimerase DNA. Ujian untuk ini genomik segmen asid nukleik tertentu berulang kali didarab (dikuatkan) yang membolehkan pengenalannya. Pertama, molekul DNA bakteria atau virus dengan pemanas dibahagikan kepada dua rantai, maka dalam kehadiran primers DNA disintesis (urutan nukleotida tertentu untuk genomik yang ditakrifkan) mengikat mereka dengan terbentang pelengkap DNA, disintesis helai kedua asid nukleik selepas setiap buku asas dalam kehadiran polymerase DNA thermostable . Ternyata kedua-dua molekul DNA. Proses ini diulang banyak kali. Untuk diagnosis, hanya satu molekul DNA, iaitu satu bakteria atau zarah virus. Bertindak balas langkah tambahan - sintesis DNA pada molekul RNA dengan menggunakan enzim transcriptase terbalik - telah dibenarkan untuk menguji virus RNA seperti HCV virus. PCR - proses tiga peringkat, kitaran berulang penyahaslian, annealing primer, sintesis DNA (pempolimeran). Jumlah DNA disintesis telah dikenal pasti oleh ELISA atau elektroforesis.
PCR boleh digunakan dalam bahan biologi yang berbeza - serum atau plasma darah, mengikis daripada uretra, biopsi, cecair pleural, cecair serebrospina, dan lain-lain PCR pertama telah digunakan untuk diagnosis penyakit berjangkit seperti virus hepatitis B, virus hepatitis C, virus hepatitis D, jangkitan CMV, berjangkit kelamin jangkitan (gonorrhea, sampah diynaya, mycoplasma, jangkitan ureaplasma), batuk kering, HIV -infektsiya dan lain-lain
Kelebihan PCR dalam diagnosis penyakit berjangkit melalui kaedah penyelidikan lain adalah seperti berikut:
- agen penyebab jangkitan boleh didapati di mana-mana persekitaran biologi badan, termasuk bahan yang diperolehi oleh biopsi;
- Adalah mungkin untuk mendiagnosis penyakit berjangkit pada peringkat awal penyakit;
- Penilaian kuantitatif hasil penyelidikan adalah mungkin (berapa banyak virus atau bakteria terkandung dalam bahan yang sedang disiasat);
- kepekaan tinggi kaedah; cth, sensitiviti PCR untuk mengesan DNA hepatitis B virus dalam darah adalah 0001 pg / ml (kira-kira 4 × 10 2 salinan / ml), sedangkan sensitiviti kaedah penghibridan DNA menggunakan kuar bercabang - 2.1 pg / ml (anggaran 7 × 10 5 salinan / ml).
[