Penanda imunohistokimia dalam diagnosis lesi prakanser mukosa mulut dan sempadan bibir merah

Diagnosis tepat pada masanya dan berkesan lesi neoplastik mukosa mulut (OM) dan sempadan vermilion bibir (VBL) kekal sebagai masalah serius dalam onkostomatologi. Karsinoma sel skuamosa rongga mulut menduduki tempat keenam di dunia dari segi kekerapan di kalangan tumor malignan dari semua penyetempatan. Di Persekutuan Rusia, kejadian neoplasma ganas rongga mulut adalah 2-4% daripada jumlah keseluruhan tumor ganas pada manusia.

Dalam tahun-tahun kebelakangan ini, perubahan ketara telah berlaku dalam struktur penyakit mukosa mulut, khususnya, peningkatan dalam bahagian penyakit prakanser. Dalam hal ini, pengesanan berkesan bukan invasif tanda-tanda keganasan kekal sebagai tugas yang mendesak dalam pergigian.

Walaupun kesederhanaan visualisasi klinikal perubahan ramalan dalam mukosa mulut dan CCG berkaitan dengan penyetempatan luaran, definisi bentuk nosologi prakanser, hanya berdasarkan gambaran pemeriksaan dan palpasi, sering membawa kepada kesilapan diagnostik, kerana tahap keratinisasi atau ulser yang berbeza-beza unsur penanda lesi menjadikannya sukar untuk dibezakan. Diagnosis awal keganasan amat sukar, kerana tanda-tanda klinikalnya muncul sedikit lewat daripada transformasi malignan sebenar.

Oleh itu, kajian VP Kharchenko et al. menunjukkan bahawa lebih daripada 2/3 pesakit mempunyai peringkat III-IV penyakit pada masa mereka mendapatkan rawatan perubatan dan didiagnosis. Salah satu sebab untuk rawatan lewat adalah gambaran klinikal "kabur" pada peringkat awal penyakit. Di samping itu, keperluan untuk kerja organisasi dan metodologi dan meningkatkan tahap pengetahuan doktor gigi tentang manifestasi klinikal awal penyakit prakanser mukosa mulut telah terbukti. Ujian menunjukkan bahawa hanya 42.8% doktor gigi membezakan manifestasi awal kanser mukosa mulut, 4.2% responden boleh menjalankan langkah diagnostik utama dengan betul untuk mengesan kanser penyetempatan ini.

Peratusan bentuk kanser mukosa mulut yang tidak dapat diubati akibat kesilapan diagnostik, menurut pelbagai penulis, mencapai 58.4-70%. Keadaan ini rumit oleh isu-isu diagnostik klinikal prakanser yang tidak dapat diselesaikan, terutamanya kesukaran membezakan permulaan keganasan, serta masalah memilih kaedah merawat penyakit prakanser. Tiada petunjuk mutlak dan relatif untuk biopsi, terutamanya pada peringkat rawatan konservatif. Sehingga kini, tidak ada satu contoh pun dalam literatur tentang kriteria diagnostik tahap klinikal yang boleh dirujuk oleh doktor gigi apabila memilih kaedah yang mencukupi untuk merawat penyakit prakanser tertentu.

Kebanyakan penulis melihat penyelesaian kesukaran diagnostik dalam kaedah diagnostik tambahan (pemeriksaan sitologi, cheilostomatoscopy, biomikroskopi, tomografi koheren optik). Walau bagaimanapun, kaedah ini agak subjektif, kerana ia hanya deskriptif perubahan kualitatif dalam tisu yang terjejas. Salah satu kaedah untuk penilaian kuantitatif perubahan morfologi ialah penentuan penanda imunohistokimia.

Pengenalan kaedah morfologi moden pengesahan tumor ke dalam amalan harian telah meningkatkan kualiti diagnostik dan rawatan neoplasma malignan dengan ketara. Keupayaan metodologi onkologi molekul moden telah berkembang; pada masa ini, menggunakan penyelidikan imunohistokimia, adalah mungkin untuk menubuhkan bukan sahaja diagnosis histologi tumor, tetapi juga untuk memberikan ciri-ciri morfofungsinya dari segi keagresifan dan prognosis berhubung dengan lesi prakanser dan penyakit onkologi yang telah berkembang.

Menurut konsep moden, transformasi sel malignan adalah berdasarkan pengaktifan onkogen selular tunggal atau berbilang atau gen penindas. Ia diperhatikan dalam 30% kanser manusia dan dalam banyak kes boleh dikesan secara imunohistokimia. Onkogen ras p21, HER2/neu, bcl-2 dan gen penindas p53 dan Rb telah dikaji dalam pelbagai tumor. Beberapa onkogen yang disenaraikan (dan gen penindas) adalah ciri prognostik dan ramalan bebas.

Epitelium mukosa mulut adalah lokus praedifeksi pembentukan tumor kanser. Faktor luaran (nod oklusi traumatik, tepi tajam pemulihan, struktur ortopedik insolvent, kebersihan mulut individu yang tidak rasional, lesi periodontal yang merosakkan keradangan) bersama-sama dengan faktor genetik (keturunan) boleh memainkan peranan yang menentukan dalam kejadian kanser penyetempatan ini. Kerosakan pada mekanisme kawalan hiperplasia epitelium dan proses metaplasia sel skuamosa boleh terlibat dalam perkembangan kanser sel skuamosa mukosa mulut.

Ciri morfologi epitelium mukosa mulut dalam proses keganasan dikaitkan dengan perubahan dalam set penanda pembezaan (terutamanya fenotip sitokeratin lapisan epitelium), ekspresi CEA, serta penanda percambahan Ki - 67.

P53 ialah gen penindas tumor yang produk proteinnya merupakan faktor transkripsi nuklear dengan banyak fungsi, termasuk menyekat laluan sel melalui kitaran sel dan mendorong apoptosis. Protein p53 dinyatakan dalam semua sel badan. Sekiranya tiada kerosakan pada alat genetik, protein p53 tidak aktif, dan apabila kerosakan DNA berlaku, ia diaktifkan. Pengaktifan terdiri daripada memperoleh keupayaan untuk mengikat DNA dan mengaktifkan transkripsi gen yang mengandungi urutan nukleotida di kawasan pengawalseliaan, yang ditetapkan sebagai elemen tindak balas p53. Mutasi p53, yang berlaku dalam sel kira-kira 50% tumor kanser, membawa kepada sintesis protein dengan kehilangan fungsinya, tetapi mempunyai kestabilan tinggi dan terkumpul dalam nukleus, yang secara imunohistokimia dinyatakan dalam pewarnaan nuklear yang berbeza.

Jenis "liar" gen penindas tumor wt-53 dan protein p53 yang dikodkan memainkan peranan penting dalam perkembangan apoptosis. Apabila DNA rosak, gen wt53 dan protein yang sepadan dinyatakan. Yang terakhir menyekat kitaran sel dalam fasa G1-S dan dengan itu menghalang replikasi selanjutnya DNA yang rosak, yang disintesis dalam fasa S, dan mewujudkan keadaan untuk penyingkiran tapak yang rosak dan pembaikan bahagiannya yang diubah. Jika pembaikan berlaku, sel terus membahagi dan menjana sel yang sihat. Walau bagaimanapun, jika pembaikan tidak berlaku, mekanisme lain diaktifkan yang memastikan pemusnahan sel sedemikian dengan DNA yang rosak (mutagenik), iaitu program genetik kematian sel, apoptosis, berkembang.
Kajian baru-baru ini telah mencadangkan bahawa status p53 mungkin merupakan faktor penentu yang menentukan sensitiviti tumor terhadap terapi kemo dan radiasi. Andaian ini disokong oleh banyak kajian yang menunjukkan bahawa p53 bermutasi adalah faktor prognosis yang buruk dan ketidakberkesanan terapi pembantu untuk pelbagai neoplasma mukosa mulut.

Penanda proliferasi juga mempunyai nilai diagnostik yang sangat bermaklumat dalam meramalkan perjalanan tumor malignan. Aktiviti proliferatif adalah faktor utama dalam mekanisme transformasi sel malignan dan dalam tingkah laku biologi tumor yang telah timbul. Penanda aktiviti proliferatif yang menjanjikan ialah antigen Ki-67, yang dinyatakan dalam hampir semua fasa kitaran sel dan, dengan itu, mencerminkan saiz kolam proliferatif. Pengekodan gen Ki-67 terletak pada lengan panjang kromosom 10. Ki-67 ialah protein pengawalseliaan. Penampilannya bertepatan dengan kemasukan sel ke dalam mitosis, yang membolehkan ia digunakan sebagai penanda percambahan sejagat dalam menilai pertumbuhan tumor malignan.

Beberapa kajian telah dijalankan untuk mengkaji nilai diagnostik penanda imunohistokimia dalam meramalkan perjalanan lesi prakanser mukosa mulut dan sempadan vermilion. Murti PR et al. mengkaji ekspresi p53 dalam lichen planus mukosa mulut. Penentuan imunohistokimia ekspresi p53 gagal mendedahkan status malignan prakanser mukosa mulut. Penulis mencadangkan bahawa kemuncak hiperekspresi p53 adalah dekat dengan masa transformasi prakanser kepada kanser dan tidak boleh digunakan sebagai penanda awal untuk meramalkan keganasan prakanser mukosa mulut. Penyelidik lain telah mendapati bahawa gen TP53 manusia mengekod sekurang-kurangnya 9 isoform yang berbeza. Satu lagi ahli keluarga p53, p63, termasuk 6 isoform berbeza dan memainkan peranan penting dalam pembangunan mukosa mulut, kelenjar air liur, gigi dan kulit. Telah dicadangkan bahawa p63 dikaitkan dengan perkembangan karsinoma sel skuamosa kepala dan leher. Walau bagaimanapun, perubahan ketara secara statistik dalam ekspresi isoform p53 dan p63 baru dalam prakanser mukosa mulut berbanding dengan tisu tidak berubah tidak dikesan. Kajian De Sousa FA mengesahkan kepentingan prognostik penanda p53 dalam menentukan potensi untuk transformasi malignan prakanser mukosa mulut. Pada masa yang sama, sesetengah penulis percaya bahawa p53 tidak boleh digunakan sebagai satu-satunya penanda untuk meramalkan perkembangan kanser.

Tidak kurang menjanjikan dari segi prognosis ialah pengesanan imunohistokimia podoplanin dalam sampel tisu yang dikaji - mukoprotein membran integral yang dinyatakan oleh kedua-dua endotel kapilari limfa yang tidak berubah dan radang-diubah dan neoplastik. Para penyelidik mengenal pasti hubungan yang signifikan secara statistik antara ekspresi podoplanin dan ABCG2 (protein pengikat ATP, subkumpulan G2) dengan risiko transformasi malignan lichen planus (risiko adalah jauh lebih tinggi dengan ekspresi bersama podoplanin dan ABCG2 berbanding tanpa ekspresi bersama podoplanin dan ABCG2) dan membuat kesimpulan bahawa podoplanin dan penanda risiko ABCG2 boleh digunakan dalam transformasi malignan dan ABCG2. lesi prakanser mukosa mulut.

Kajian oleh saintis asing telah mengesahkan kepentingan diagnostik ekspresi Fas/FasL sebagai biomarker untuk perkembangan kanser mukosa mulut. Fas ialah glikoprotein transmembran jenis I (sinonim APO-I, CD95) dan mendorong apoptosis dalam sel selepas interaksi dengan ligan Fas (FasL) atau antibodi monoklonal agonis terhadap Fas.

Pada masa yang sama, diketahui bahawa Fas dinyatakan dalam hampir semua jenis tisu. Peningkatan ekspresi Fas diperhatikan dalam buah pinggang, hati, jantung, dan timus. Di samping itu, reseptor ini dinyatakan pada banyak tumor, serta sel yang dijangkiti virus. Sebab rintangan pelbagai jenis sel terhadap apoptosis yang bergantung kepada Fas mungkin disebabkan oleh peningkatan pengeluaran Fas larut oleh sel-sel ini. Fas Larut ialah produk penyambungan alternatif dan mampu menghalang apoptosis yang disebabkan oleh antibodi monoklonal agonis terhadap Fas atau FasL.

Oleh itu, tafsiran samar-samar hasil kajian yang dijalankan oleh pelbagai pengarang membolehkan kita menyimpulkan bahawa pada peringkat semasa perkembangan onkologi molekul, penggunaan penanda imunohistokimia menjanjikan dalam kombinasi dengan kaedah diagnosis dan prognosis lain dari lesi prakanser mukosa mulut.

Masalah kedudukan penanda imunohistokimia mengikut kepentingan diagnostik adalah sangat relevan. Kami percaya bahawa dalam tertib kepentingan menurun mereka boleh disusun dalam susunan berikut:

1. Penanda imunohistokimia yang mempunyai kepentingan diagnostik yang tinggi: podoplanin, ABCG2, bcl-2;
2. Penanda imunohistokimia dengan kepentingan diagnostik sederhana: Bax, MMP-9;
3. Penanda imunohistokimia yang menjanjikan, kepentingan diagnostik yang memerlukan kajian lanjut: MMP-2, MT1-MMP, Fas/FasL;
4. Penanda imunohistokimia yang kepentingan diagnostiknya untuk meramalkan perjalanan penyakit prakanser belum terbukti: p53, p63.

Berdasarkan analisis data sastera yang dijalankan, dapat disimpulkan bahawa penentuan penanda imunohistokimia tidak boleh dianggap sebagai satu-satunya kaedah untuk meramalkan perjalanan penyakit prakanser mukosa mulut dan mengenal pasti tahap risiko transformasi malignan, tetapi, bagaimanapun, kaedah ini mempunyai nilai diagnostik yang tinggi apabila digabungkan dengan kaedah lain untuk meramalkan perjalanan penyakit prakanser.

Penyelidik kanan Kuznetsova Roza Gilevna. Penanda imunohistokimia dalam diagnostik lesi prakanser mukosa mulut dan sempadan merah bibir // Perubatan Praktikal. 8 (64) Disember 2012 / Jilid 1

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ]