Immunophenotyping hemoblastoses

Kemajuan yang ketara dalam kajian hematologi yang berkaitan dalam tahun-tahun kebelakangan dengan penggunaan kaedah imunologi moden dan alat automatik untuk menganalisis dan menyusun sel-sel darah periferi dan sumsum tulang - cytometers aliran. Morfologi tradisional dan kajian cytochemical daripada penyakit sel substrat (darah, merah sum-sum tulang, nodus limfa, limpa, dan lain-lain), dalam banyak kes, terutamanya dalam penyakit lymphoproliferative, tidak mendedahkan keseluruhan pelbagai pilihan antara morfologi borang yang serupa dan mengenal pasti asal-usul klon patologi . Masalah ini boleh diselesaikan hanya dengan mengkaji ciri-ciri imunologi sel. Setiap peringkat pembezaan sel-sel hematopoietic telah menetapkan sendiri antigen yang klasifikasi antarabangsa yang dikenali sebagai pembezaan dan pembezaan dibahagikan kepada kelompok, CD ditetapkan.

Di blok pembezaan perubahan neoplastic boleh berlaku pada mana-mana peringkat pembangunan sel normal, menyebabkan klon sel patologi menentukan penyakit substrat dan mempunyai ciri imunologi sama (atau fenotip). Selepas kajian penanda ini dalam sel-sel boleh ditentukan dengan sebarang bentuk atau penjelmaan penyakit ini adalah konsisten, iaitu berdasarkan immunologic diagnosis sel phenotype berbeza, yang adalah yang paling sukar dalam gangguan lymphoproliferative, kerana sel substrat utama penyakit patologi hampir jenis yang sama sel-sel morfologi.

Phenotyping membolehkan menaip sel-sel darah dan matang dalam siri myelo-, mono-, dan limfositik menggunakan antibodi monoklonal dengan adanya antigen pembezaan (reseptor) di dinding sel. Dalam seksyen "Penilaian status imun organisma," ciri-ciri dan makna diagnostik penanda sel sebahagiannya diterangkan; Berikut adalah penerangan ringkas penanda sel antigen yang digunakan untuk diagnosis hemoblastosis. Pada membran sel-sel darah dan sumsum tulang merah, antigen berikut (penanda) boleh dikenalpasti.

• CD2 adalah glikoprotein transmembran monomerik. Ia hadir di permukaan semua T-limfosit yang beredar dan beberapa NK-limfosit. CD2 mengambil bahagian dalam proses pengaktifan alternatif T-limfosit. Pengesanan CD2 menggunakan antibodi monoklonal dalam amalan klinikal digunakan untuk phenotyping leukemia akut T-sel, limfa, keradangan kronik dan keadaan immunodeficient.
• CD3 - kompleks protein yang berkaitan dengan reseptor sel T spesifik antigen, adalah penanda fungsi utama limfosit T. Ia memudahkan pemindahan isyarat pengaktifan dari membran ke sitoplasma sel. Pengesanan CD3 ditunjukkan untuk diagnosis leukemia sel T yang akut, limfoma (CD3 tidak dinyatakan dalam tumor limfoid sel T) dan penyakit imunodefisiensi.
• CD4 - transmembran Glikoprotein dinyatakan oleh subset T penolong (pengaruh) yang menjadi 45% daripada limfosit darah periferal. Pada peringkat awal pembangunan limfosit dalam timus, CD4 antigen, dan juga daripada CD8, menyatakan semua limfosit kortikal. Thymocytes berkenaan dgn sumsum, yang adalah sama dengan phenotype CD4 matang + darah periferi T-sel (sel T penolong), sama ada sudah menyatakan CD4, atau reseptor CD8. Dalam darah periferi, sehingga 5% sel-sel secara serentak dilabel CD4 dan CD8. Ekspresi sedikit CD4 adalah mungkin pada beberapa sel monosit. CD4 dinyatakan dalam kebanyakan kes, T limfoma sel, termasuk Mycosis fungoides, dan dalam leukemia sel T HTLV-berkaitan (HTLV - manusia T-lymphotropic virus - Human T-lymphotropic virus).
• CD5 - satu glikoprotein rantaian tunggal, yang hadir pada semua limfosit T yang matang dan kebanyakan thymocytes, lemah dinyatakan oleh limfosit B. CD5 dikesan pada sel-sel neoplastik sel B-sel leukemia limfositik kronik dan limfoma centro-sitik. Dalam jenis lain penyakit limfoid malignan - limfoma folikular, leukemia sel berbulu, limfoma sel yang besar - CD5 tidak dinyatakan.
• CD7 adalah protein tunggal terkandas, penanda terawal pembezaan sel T. Ia dinyatakan oleh pro-T-limfosit sebelum mereka berhijrah ke timus. CD7 dikesan pada kebanyakan sel NK, ungkapan lemah dinyatakan pada monosit. B-limfosit dan granulosit tidak mengandungi antigen ini. Definisi CD7 digunakan untuk diagnosis limfoma, leukemia limfoblastik T-sel anak-anak.
• CD8 adalah protein yang terdiri daripada dua rantai polipeptida yang dihubungkan dengan jambatan disulfida. Ia dinyatakan oleh subpopulation limfosit T sitotoksik dan penindas, yang terdiri daripada 20-35% limfosit darah periferi. Antigen ini juga mempunyai limfosit NK, thymocytes kortikal, 30% daripada thymocytes medullary, dan subpopulation sel tulang sumsum merah. CD8 diperiksa untuk penilaian kuantitatif kandungan penindas T (lihat bahagian "T-limfosit-penahan dalam darah" di atas).

• CD10 adalah endopeptidase yang berkaitan dengan membran sel. CD10 meluahkan bentuk muda limfosit B dan subpopulasi limfosit kortikal. CD10 menyatakan semua sel SEMUA.
• CD11c melancarkan makrofaj, monosit, granulosit, sel NK dan sel leukemia sel berbulu pada membran sel.
• CD13 adalah glikoprotein yang diungkapkan oleh sel myelomonocytic (sel progenitor, neutrofil, basofil, eosinofil, monosit dan sel leukemia myeloid). Ia tidak hadir dalam limfosit T dan B, eritrosit dan platelet.
• CD14 adalah glikoprotein membran permukaan. Ia dinyatakan terutamanya oleh monosit dan makrofaj. CD14 dikesan dalam lebih daripada 95% monosit darah perifer dan sumsum tulang. Ekspresi kuat CD14 diperhatikan dalam leukemia myeloblastik akut. Dalam leukemia limfoblastik akut dan kronik, antigen ini tidak dinyatakan.
• CD15 adalah oligosakarida. Dia mengambil bahagian dalam proses fagositosis dan chemotaxis. Antigen ini terdapat pada permukaan granulosit matang dan sel Berezovsky-Sternberg. Ekspresi antigen CD15 dikesan dalam penyakit Hodgkin. Di dalam limfoma bukan Hodgkin, CD15 tidak dikesan dalam kebanyakan kes.
• CD16 dinyatakan pada permukaan granulosit, monosit, makrofag dan sel NK. Semua limfosit yang menyatakan antigen ini mempunyai keupayaan untuk sitotoksis selular yang bergantung kepada antibodi. CD16 ditentukan semasa menaip leukemias myelocytic kronik, untuk mencirikan sel NK.
• CD19 adalah glikoprotein yang hadir pada semua limfosit B periferi, dan juga pada semua prekursor sel B. Ia tidak wujud pada sel plasma. Ini adalah penanda terawal sel B, memainkan peranan penting dalam mengawal selia pengaktifan dan pembiakan limfosit B-B. CD19 dinyatakan pada semua sel neoplastik leukemia akut sel B-sel, dan juga terdapat dalam beberapa bentuk leukemia monoblast akut.
• CD20 adalah protein bukan glikosilat. Dalam ontogenesis B-limfosit, antigen CD20 muncul selepas CD19 pada peringkat pembezaan sel pra-B limfosit. Ia tidak hadir pada membran plasma sel plasma. Ia dinyatakan dalam SEMUA, sel-sel leukemia limfositik kronik, sel leukemia berbulu, limfoma Burkitt dan sangat jarang dalam leukemia monoblast akut.
• CD21 adalah glikoprotein, dalam jumlah yang banyak terdapat pada limfosit B-l dalam organ limfoid dan dalam jumlah kecil pada sel B darah periferal. CD21 adalah reseptor untuk virus Epstein-Barr.
• CD22 adalah protein yang terdiri daripada dua rantai polipeptida. Ia dinyatakan pada membran kebanyakan limfosit B, termasuk sel progenitor (prolymphocytes). Antigen tidak dinyatakan pada limfosit B (plasma sel) selepas pengaktifannya. Ekspresi CD22 yang paling ketara dikesan pada sel-sel dengan leukemia sel berbulu, lemah - dalam leukemias myeloid dan SEM tidak sel-T.
• CD23 adalah glikoprotein yang diungkapkan oleh limfosit B-aktif dari darah periferal hingga jauh lebih besar. CD23 mengantara cytotoxicity dan fagositosis yang bergantung kepada IgE oleh makrofaj dan eosinofil.
• CD25 adalah satu glikoprotein rantai tunggal yang dikenal pasti sebagai reseptor rendah afiniti untuk IL-2. Reseptor ini dinyatakan pada T-limfosit diaktifkan dan, pada kepadatan yang lebih rendah, pada sel B yang diaktifkan. Di dalam darah periferal orang yang sihat, antigen hadir di lebih daripada 5% sel-sel limfoid.
• CD29 adalah reseptor fibronectin. Ia diedarkan secara meluas dalam tisu, ia dinyatakan oleh leukosit. Pengesanan CD29 pada sel darah periferal digunakan untuk menonjolkan subpopulasi sel T yang mempunyai CD4 + CD29 + phenotype, yang disebut Type 2 helper (Th2). Sel-sel ini, melalui pengeluaran limfokin, mengambil bahagian dalam merealisasikan tindak balas imun humoral.
• CD33 adalah glikoprotein transmembran. Ia hadir di permukaan sel siri myeloid dan monocytic. Ia didapati di permukaan monosit dan, sedikit sebanyak, granulosit darah periferal. Kira-kira 30% sel sumsum tulang merah menyatakan CD33, termasuk myeloblasts, promyelocytes dan myelocytes. Antigen tidak terdapat pada membran sel stem pluripoten. CD33 digunakan untuk mencirikan sel-sel dalam leukemia mieloid. Sel-sel leukemia limfoid dan erythroid tidak menyatakan CD33.
• CD34 adalah phosphoglycoprotein, yang diungkapkan oleh sel-sel progenitor hematopoietik, termasuk sel stem monopoten. Ekspresi Ar yang paling ketara diperhatikan pada zaman awal; apabila sel-sel matang, ungkapan penanda jatuh. CD34 juga dijumpai pada sel endothelial. CD34 digunakan untuk mencirikan sel dalam leukemia myelogenous dan limfobastik akut. Dengan leukemia limfositik kronik dan limfoma, ungkapan antigen CD34 tidak dapat dikesan.

• CD41a dinyatakan oleh platelet dan megakaryosit. Antibodi monoklonal untuk pengesanan CD41a digunakan untuk mendiagnosis leukemia megakaryoblastik. Dengan thrombasthenia Glązmann, ungkapan antigen ini tidak hadir atau ditindas dengan ketara.
• CD42b adalah glikoprotein membran yang terdiri daripada dua rantai polipeptida. Penanda didapati pada permukaan platelet dan megakaryosit. Dalam amalan klinikal, pengesanan CD42b digunakan untuk mendiagnosis thrombocytopathy - sindrom Bernard-Soulier.
• CD45RA tergolong dalam kelas glikoprotein transmembran. Ini adalah antigen leukocyte biasa. Ia dinyatakan pada membran sel B-limfosit, kepada limfosit T yang lebih rendah dan pada thymocytes medullary yang matang. Penanda tidak dinyatakan oleh granulosit.
• CD45RO adalah molekul berat molekul rendah CD45RA - leukocyte Ag biasa. Mereka dijumpai pada sel T (memori T-limfosit), subpopulasi B-limfosit, monosit dan makrofaj. Antibodi monoklonal kepada CD45RO berinteraksi dengan kebanyakan thymocytes, subpopulation berehat CD4 + dan CD8 + T-limfosit dan sel T-aktif yang matang. Sel dari myelomonocytic origin, granulocytes dan monocytes juga membawa antigen ini. Ia dikesan dalam lymphomas centroblastic dan immunoblastic.
• CD46 - Dimer glikosilasi. Ia diedarkan secara meluas dalam tisu dan menyatakan T- dan B-limfosit, monosit, granulocytes, NK-cells, platelet, sel-sel endothelial, fibroblas, tetapi tidak hadir di permukaan eritrosit. CD46 menyediakan perlindungan tisu daripada tindakan pelengkap.
• CD61 adalah antigen platelet. Ia dinyatakan pada platelet darah periferal dan sumsum tulang merah, serta pada megakaryosit dan megacaryoblasts. Definisinya digunakan sebagai penanda untuk leukemia megakaryoblastik akut. Ekspresi antigen tidak hadir atau ditekan pada pesakit dengan thrombastenia Glanzmann.
• CD95, juga dikenali sebagai Fas atau APO-1, adalah glikoprotein transmembran, ahli keluarga reseptor faktor nekrosis tumor. Ia dinyatakan dalam jumlah yang ketara pada limfosit T-darah (CD4 + dan CD8 +) darah dan, pada tahap yang lebih rendah, pada sel-limfosit B dan sel NK. Antigen ini juga dinyatakan pada granulosit, monosit, sel tisu dan sel-sel neoplastik. Mengikat CD95 ke ligan Fas (CD95L) menginduksi apoptosis dalam sel.
• CD95L, atau ligan Fas, protein membran yang tergolong dalam keluarga reseptor faktor nekrosis tumor. Antigen ini dinyatakan oleh limfosit sitotoksik T, sel-sel NK dan selalunya oleh sel-sel tumor; inducer utama apoptosis dalam sel.
• HLA-DR adalah penentu monomorphik molekul kelas II kompleks histokompatibiliti manusia utama (HLA). Penanda pada sel Langerhans, sel-sel dendrit organ limfoid, dan beberapa jenis makrofaj, limfosit B, diaktifkan sel-sel T dan sel-sel epitelium timus. Ujian untuk penanda ini digunakan untuk mengukur T-limfosit yang diaktifkan dengan fenotip CD3 + HLA-DR +.

Menggunakan pemilihan antibodi monoklonal yang berbeza kepada penanda, adalah mungkin untuk membuat potret fenotip sel ciri-ciri bentuk leukemia yang diberikan.

Selain menggunakan teknik immunophenotyping untuk diagnosis dan diagnosis pembezaan keganasan hematologi, penting bertukar penggunaannya dalam proses rawatan untuk menilai keadaan pengampunan dan sisa penduduk sel-sel leukemia. Mengetahui fenotip "potret" sel-sel letupan dalam tempoh diagnosis, untuk penanda ini ia boleh mencari sel klon leukemia dalam pengampunan, dan dari peningkatan bilangan mereka - untuk meramalkan perkembangan berulang panjang (untuk 1-4 bulan) sehingga ciri-ciri klinikal dan morfologi itu.

[1], [2], [3], [4],