Immunofenotip hemoblastoses

Kemajuan yang ketara dalam penyelidikan hematologi dalam beberapa tahun kebelakangan ini dikaitkan dengan penggunaan kaedah imunologi moden dan cara analisis automatik dan pengasingan darah periferal dan sel sumsum tulang - sitometer aliran. Kajian morfologi dan sitokimia tradisional sel substrat penyakit (darah, sumsum tulang merah, nodus limfa, limpa, dll.) Dalam banyak kes, terutamanya dalam penyakit limfoproliferatif, tidak membenarkan kami untuk mengenal pasti pelbagai variasi penuh antara bentuk morfologi yang serupa dan mewujudkan sumber asal klon patologi. Masalah ini boleh diselesaikan hanya dengan mengkaji ciri imunologi sel. Setiap peringkat pembezaan sel hematopoietik sepadan dengan set antigennya sendiri, yang menurut klasifikasi antarabangsa dipanggil pembezaan dan dibahagikan kepada kelompok pembezaan, CD yang ditetapkan.

Dalam perubahan neoplastik, blok pembezaan boleh berlaku pada mana-mana peringkat perkembangan sel normal, mengakibatkan pembentukan klon sel patologi yang menentukan substrat penyakit dan mempunyai ciri imunologi (atau fenotip) yang sama. Dengan menjalankan kajian penanda ini pada sel, adalah mungkin untuk menentukan bentuk dan varian penyakit yang sesuai dengannya, iaitu, berdasarkan fenotip imunologi sel, untuk menjalankan diagnostik pembezaan, yang paling sukar dalam penyakit limfoproliferatif, kerana sel utama substrat patologi penyakit adalah sel morfologi yang hampir sama.

Fenotaip membolehkan penggunaan antibodi monoklonal untuk menaip letupan dan sel darah matang siri myelo-, mono-, limfositik dengan kehadiran antigen pembezaan (reseptor) dalam dinding sel. Bahagian "Penilaian status imun badan" sebahagiannya menerangkan ciri dan nilai diagnostik kajian penanda selular; di bawah adalah penerangan ringkas tentang penanda antigen sel berhubung dengan diagnosis hemoblastosis. Antigen (penanda) berikut boleh dikesan pada membran sel darah dan sumsum tulang merah.

• CD2 ialah glikoprotein transmembran monomerik. Ia terdapat pada permukaan semua T-limfosit yang beredar dalam darah dan pada beberapa NK-limfosit. CD2 terlibat dalam proses pengaktifan alternatif T-limfosit. Pengesanan CD2 menggunakan antibodi monoklonal dalam amalan klinikal digunakan untuk fenotaip leukemia sel T akut, limfoma, keradangan kronik dan keadaan kekurangan imun.
• CD3 adalah kompleks protein yang dikaitkan dengan reseptor sel T khusus antigen, ia adalah penanda fungsi utama T-limfosit. Ia memudahkan pemindahan isyarat pengaktifan dari membran ke sitoplasma sel. Penentuan CD3 ditunjukkan untuk diagnosis leukemia sel T akut, limfoma (CD3 tidak dinyatakan dalam neoplasma limfoid bukan sel T) dan penyakit imunodefisiensi.
• CD4 ialah glikoprotein transmembran yang dinyatakan oleh subpopulasi T-helper (inducers), yang membentuk 45% daripada limfosit darah periferi. Pada peringkat awal perkembangan limfosit dalam timus, antigen CD4, serta CD8, dinyatakan oleh semua limfosit kortikal. Timosit medula, fenotip yang serupa dengan sel T CD4+ matang darah periferi (T-helper), sudah mengekspresikan sama ada reseptor CD4 atau CD8. Dalam darah periferal, sehingga 5% sel membawa kedua-dua penanda CD4 dan CD8. Ekspresi kecil CD4 mungkin pada beberapa sel siri monocytic. CD4 dinyatakan dalam kebanyakan kes limfoma sel T, termasuk mycosis fungoides, serta dalam leukemia sel T yang berkaitan dengan HTLV (HTLV - virus T-limfotropik manusia).
• CD5 ialah glikoprotein rantai tunggal yang terdapat pada semua limfosit T matang dan kebanyakan thymocytes, dan diekspresikan dengan lemah oleh limfosit B. CD5 dikesan pada sel neoplastik leukemia limfositik kronik sel B dan limfoma centrocytic. Dalam jenis penyakit limfoid malignan lain - limfoma folikel, leukemia sel berbulu, limfoma sel besar - CD5 tidak dinyatakan.
• CD7 ialah protein rantai tunggal, penanda terawal pembezaan sel T. Ia dinyatakan oleh pro-T-limfosit walaupun sebelum penghijrahan mereka ke timus. CD7 dikesan pada kebanyakan sel NK, ekspresi lemah dicatatkan pada monosit. B-limfosit dan granulosit tidak mengandungi antigen ini. Penentuan CD7 digunakan untuk mendiagnosis limfoma, leukemia limfoblastik sel T kanak-kanak.
• CD8 ialah protein yang terdiri daripada dua rantai polipeptida yang dihubungkan oleh jambatan disulfida. Ia dinyatakan oleh subpopulasi limfosit T sitotoksik dan penindas, yang membentuk 20-35% daripada limfosit darah periferi. Antigen ini juga dinyatakan oleh limfosit NK, timosit kortikal, 30% timosit medula, dan subpopulasi sel sumsum tulang merah. CD8 dikaji untuk mengukur kandungan penekan T (lihat bahagian "limfosit T penekan dalam darah" di atas).

• CD10 ialah endopeptidase yang berkaitan dengan membran sel. CD10 dinyatakan oleh bentuk muda limfosit B dan subpopulasi limfosit kortikal. CD10 dinyatakan oleh semua SEMUA sel.
• CD11c diekspresikan pada membran sel oleh makrofaj, monosit, granulosit, sel NK dan sel leukemia sel berbulu.
• CD13 ialah glikoprotein yang dinyatakan oleh sel-sel keturunan myelomonocytic (sel progenitor, neutrofil, basofil, eosinofil, monosit, dan sel leukemia myeloid). Ia tidak terdapat dalam limfosit T dan B, eritrosit, dan platelet.
• CD14 ialah glikoprotein membran permukaan. Ia dinyatakan terutamanya oleh monosit dan makrofaj. CD14 dikesan pada lebih daripada 95% monosit dalam darah periferi dan sumsum tulang. Ekspresi kuat CD14 diperhatikan dalam leukemia myeloblastik akut. Antigen ini tidak dinyatakan dalam leukemia limfoblastik akut dan kronik.
• CD15 ialah oligosakarida. Ia terlibat dalam fagositosis dan kemotaksis. Antigen ini terdapat pada permukaan granulosit matang dan sel Berezovsky-Sternberg. Ekspresi antigen CD15 dikesan dalam penyakit Hodgkin. Dalam limfoma bukan Hodgkin, CD15 tidak dikesan dalam kebanyakan kes.
• CD16 dinyatakan pada permukaan granulosit, monosit, makrofaj dan sel NK. Semua limfosit yang menyatakan antigen ini mempunyai kapasiti untuk sitotoksisiti selular yang bergantung kepada antibodi. CD16 ditentukan semasa menaip leukemia myelocytic kronik, untuk mencirikan sel NK.
• CD19 ialah glikoprotein yang terdapat pada semua limfosit B periferi dan semua prekursor sel B. Ia tidak terdapat dalam sel plasma. Ia adalah penanda terawal sel B dan memainkan peranan penting dalam mengawal pengaktifan dan percambahan sel B. CD19 dinyatakan pada semua sel neoplastik leukemia akut asal sel B dan juga terdapat dalam beberapa bentuk leukemia monoblastik akut.
• CD20 ialah protein tidak glikosilasi. Dalam ontogenesis B-limfosit, antigen CD20 muncul selepas CD19 pada peringkat pembezaan pra-B sel limfosit. Ia tidak terdapat dalam membran plasma sel plasma. Ia dinyatakan dalam SEMUA, leukemia limfositik kronik sel B, leukemia sel berbulu, limfoma Burkitt dan sangat jarang dalam leukemia monoblastik akut.
• CD21 ialah glikoprotein yang terdapat dalam jumlah yang ketara pada B-limfosit dalam organ limfoid dan dalam jumlah kecil pada sel B dalam darah periferi. CD21 adalah reseptor untuk virus Epstein-Barr.
• CD22 ialah protein yang terdiri daripada dua rantai polipeptida. Ia dinyatakan pada membran kebanyakan limfosit B, termasuk sel prekursor (prolimfosit). Antigen tidak dinyatakan pada limfosit B (sel plasma) selepas pengaktifannya. Ekspresi CD22 yang paling ketara dikesan pada sel dalam leukemia sel berbulu, lemah - dalam leukemia myeloid dan SEMUA bukan sel T.
• CD23 adalah glikoprotein yang dinyatakan pada tahap yang lebih tinggi oleh limfosit B darah periferal yang diaktifkan. CD23 mengantara sitotoksisiti dan fagositosis yang bergantung kepada IgE oleh makrofaj dan eosinofil.
• CD25 ialah glikoprotein rantai tunggal yang dikenal pasti sebagai reseptor pertalian rendah untuk IL-2. Reseptor ini dinyatakan pada limfosit T yang diaktifkan dan, kepada ketumpatan yang lebih rendah, pada sel B yang diaktifkan. Dalam darah periferi individu yang sihat, antigen terdapat pada lebih daripada 5% sel limfoid.
• CD29 ialah reseptor fibronektin. Ia diedarkan secara meluas dalam tisu dan dinyatakan oleh leukosit. Pengesanan CD29 pada sel darah periferi digunakan untuk menaip subpopulasi sel T dengan fenotip CD4+CD29+, yang dipanggil pembantu jenis 2 (Th2). Sel-sel ini mengambil bahagian dalam tindak balas imun humoral dengan menghasilkan limfokin.
• CD33 ialah glikoprotein transmembran. Ia terdapat pada permukaan sel siri myeloid dan monocytic. Ia ditemui pada permukaan monosit dan, pada tahap yang lebih rendah, granulosit dalam darah periferi. Kira-kira 30% sel sumsum tulang merah mengekspresikan CD33, termasuk myeloblasts, promyelocytes, dan myelocytes. Antigen tidak hadir dalam membran sel stem pluripoten. Penentuan CD33 digunakan untuk mencirikan sel dalam leukemia yang berasal dari myeloid. Sel leukemia yang berasal dari limfoid dan eritroid tidak mengekspresikan CD33.
• CD34 ialah fosfoglikoprotein yang dinyatakan oleh sel progenitor hematopoietik, termasuk sel stem monopoten. Ekspresi Ag yang paling ketara diperhatikan pada nenek moyang awal; apabila sel matang, ekspresi penanda berkurangan. CD34 juga terdapat pada sel endothelial. Penentuan CD34 digunakan untuk mencirikan sel dalam leukemia mieloblastik dan limfoblastik akut. Dalam leukemia limfositik kronik dan limfoma, ekspresi antigen CD34 tidak dikesan.

• CD41a dinyatakan oleh platelet dan megakaryocytes. Antibodi monoklonal untuk mengesan CD41a digunakan untuk mendiagnosis leukemia megakaryoblastik. Dalam trombasthenia Glanzmann, ekspresi antigen ini tidak hadir atau ditindas dengan ketara.
• CD42b ialah glikoprotein membran yang terdiri daripada dua rantai polipeptida. Penanda dikesan pada permukaan platelet dan megakaryocytes. Dalam amalan klinikal, pengesanan CD42b digunakan untuk mendiagnosis trombositopati - sindrom Bernard-Soulier.
• CD45RA tergolong dalam kelas glikoprotein transmembran. Ia adalah antigen leukosit biasa. Ia dinyatakan pada membran sel limfosit B, pada tahap yang lebih rendah limfosit T dan pada timosit medula yang matang. Penanda tidak dinyatakan oleh granulosit.
• CD45RO ialah isoform molekul rendah CD45RA, antigen leukosit biasa. Ia dikesan pada sel T (limfosit T ingatan), subpopulasi limfosit B, monosit, dan makrofaj. Antibodi monoklonal kepada CD45RO berinteraksi dengan kebanyakan thymocytes, subpopulasi limfosit T CD4+ dan CD8+ yang sedang berehat, dan sel T aktif yang matang. Sel-sel asal myelomonocytic, granulosit, dan monosit juga membawa antigen ini. Ia dikesan dalam limfoma centroblastik dan imunoblastik.
• CD46 ialah dimer O-glikosilasi. Ia diedarkan secara meluas dalam tisu dan dinyatakan oleh limfosit T dan B, monosit, granulosit, sel NK, platelet, sel endothelial, fibroblas, tetapi tidak terdapat pada permukaan sel darah merah. CD46 menyediakan perlindungan tisu daripada pelengkap.
• CD61 ialah antigen platelet. Ia dinyatakan pada platelet darah periferal dan sumsum tulang merah, serta pada megakaryocytes dan megakaryoblasts. Penentuannya digunakan sebagai penanda dalam leukemia megakaryoblastik akut. Ekspresi antigen tidak hadir atau ditindas pada pesakit dengan trombasthenia Glanzmann.
• CD95, juga dipanggil Fas atau APO-1, adalah glikoprotein transmembran, ahli keluarga reseptor faktor nekrosis tumor. Ia dinyatakan dalam jumlah yang ketara pada limfosit T (CD4+ dan CD8+) dalam darah periferal dan, pada tahap yang lebih rendah, pada limfosit B dan sel NK. Antigen ini juga dinyatakan pada granulosit, monosit, sel tisu, dan sel neoplastik. Pengikatan CD95 kepada ligan Fas (CD95L) mendorong apoptosis dalam sel.
• CD95L, atau ligan Fas, adalah protein membran yang tergolong dalam keluarga reseptor faktor nekrosis tumor. Antigen ini dinyatakan oleh limfosit T sitotoksik, sel NK, dan selalunya sel tumor; ia adalah inducer utama apoptosis dalam sel.
• HLA-DR ialah penentu monomorfik bagi molekul kelas II kompleks histokompatibiliti utama manusia (HLA). Penanda dinyatakan pada sel Langerhans, sel dendritik organ limfoid, jenis makrofaj tertentu, limfosit B, sel T diaktifkan dan sel epitelium timus. Kajian penanda ini digunakan untuk penentuan kuantitatif limfosit T yang diaktifkan dengan fenotip CD3+ HLA-DR+.

Menggunakan pilihan antibodi monoklonal yang berbeza untuk penanda, adalah mungkin untuk mencipta potret fenotip ciri sel bagi bentuk leukemia tertentu.

Sebagai tambahan kepada penggunaan kaedah immunophenotyping untuk diagnostik dan diagnostik pembezaan hemoblastoses, penggunaannya dalam proses rawatan untuk menilai keadaan remisi dan populasi sisa sel leukemik telah terbukti sangat penting. Mengetahui "potret" fenotip sel letupan semasa tempoh diagnosis, penanda ini memungkinkan untuk mengesan sel klon leukemik semasa tempoh remisi, dan dengan peningkatan bilangannya - untuk meramalkan perkembangan kambuh jauh sebelum (1-4 bulan) penampilan tanda-tanda klinikal dan morfologinya.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]