Pakar perubatan artikel itu
Penerbitan baru
PCR sebagai kaedah mendiagnosis penyakit genetik
Ulasan terakhir: 04.07.2025
Semua kandungan iLive disemak secara perubatan atau fakta diperiksa untuk memastikan ketepatan faktual sebanyak mungkin.
Kami mempunyai garis panduan sumber yang ketat dan hanya memautkan ke tapak media yang bereputasi, institusi penyelidikan akademik dan, apabila mungkin, dikaji semula kajian secara medis. Perhatikan bahawa nombor dalam kurungan ([1], [2], dan lain-lain) boleh diklik pautan ke kajian ini.
Jika anda merasakan bahawa mana-mana kandungan kami tidak tepat, ketinggalan zaman, atau tidak dipersoalkan, sila pilih dan tekan Ctrl + Enter.
PCR ialah pencapaian baharu genetik molekul, digunakan untuk penguatan DNA dan membolehkan pendaraban in vitro pantas bagi rantau DNA tertentu (iaitu mana-mana gen yang diminati) lebih daripada 200,000 kali. Untuk menjalankan tindak balas, cukup untuk mempunyai bahan DNA dari satu sel; jumlah DNA yang dikuatkan oleh PCR adalah sangat besar sehingga DNA ini hanya boleh diwarnakan (penggunaan probe radioaktif selepas elektroforesis tidak diperlukan). Prasyarat untuk menjalankan PCR ialah pengetahuan tentang urutan nukleotida bagi kawasan DNA yang diperkuatkan untuk pemilihan primer yang disintesis secara buatan yang betul.
Pada masa ini, PCR ialah satu proses tiub tunggal yang terdiri daripada kitaran penguatan berulang (pembiakan, penyalinan) urutan molekul DNA tertentu untuk mendapatkan bilangan salinan yang cukup besar yang boleh dikenal pasti melalui elektroforesis. Salah satu komponen utama tindak balas ialah "primer" - oligonukleotida sintetik yang terdiri daripada 20-30 asas pelengkap kepada "tapak" (kawasan) penyepuhlindapan (attachment) pada kawasan DNA matriks yang dikenal pasti.
PCR berlaku secara automatik dalam termostat boleh atur cara - kitar haba (penguat). Kitaran tiga peringkat, yang menghasilkan salinan tepat bahagian DNA matriks yang dikenal pasti, diulang 30-50 kali mengikut program kitar haba yang ditentukan. Dalam kitaran pertama, oligoprimer berhibrid dengan DNA matriks asal, dan kemudian (dalam kitaran seterusnya) dengan molekul DNA yang baru disintesis apabila ia terkumpul dalam campuran tindak balas. Dalam kes kedua, sintesis DNA berakhir bukan akibat perubahan suhu, tetapi apabila mencapai had polimerase DNA bahagian yang dikuatkan, yang menentukan saiz bahagian DNA yang baru disintesis dengan ketepatan satu nukleotida.
Elektroforesis digunakan sebagai kaedah untuk mengesan molekul DNA yang diperolehi, dengan bantuan bahan yang diperkuatkan dipisahkan mengikut saiz amplikon (produk penguatan).
PCR boleh digunakan untuk memeriksa secara langsung lokasi mutasi yang disyaki atau tapak polimorfik, serta untuk mengkaji kehadiran sebarang ciri DNA khusus lain.
[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]