13s urea test: penyediaan, hasil, positif, negatif

Sejak pengenalan yang dikaitkan dengan gastritis kronik dan ulser perut dan Helicobacter duodenum bakteria pylori telah membangunkan kaedah diagnostik, termasuk ujian urease, yang boleh mengesan mikroorganisma dalam pesakit yang diberikan, mengesahkan penglibatan mereka dalam pembangunan penyakit gastrousus dan menetapkan rawatan yang berkesan.

Enzim urease sebagai biomarker jangkitan Helicobacter pylori

Bakteria H. Pylori dilindungi dari persekitaran berasid dalam lumen perut dalam dua cara. Pertama, merosakkan mukosa dengan flagella, mikroorganisma masuk ke lapisan bawahnya, ke sel epitelium, di mana pH lebih tinggi (iaitu keasidannya lebih rendah). Kedua, bakteria meneutralkan asid, mensintesis dalam kuantiti besar metalloenzyme urease molekul tinggi molekul aktif atau urea amidohydrolase.

Penggunaan urease dalam diagnosis  Helicobacter  mungkin disebabkan oleh tidak hanya aktiviti sitoplasma enzim ini, tetapi juga interaksi luar dengan sel-sel tuan rumah.

Di bawah pengaruh urease, urea urea terurai kepada hidrogen nitrida (ammonia) dan karbon dioksida (karbon dioksida). Mereka bertindak balas dengan asid hidroklorik jus gastrik dan memberikan sekitar H. Pylori zon dengan keasidan neutral, dan juga menyokong metabolisme sel bakteria.

Itulah sebabnya urease adalah penjajahan penting H. Pylori mukosa gastrik manusia, dan mengenal pasti aktiviti ureoliticheskoy dianggap sebagai penanda bio daripada kejahatan bakteria yang gastroenterologi - menghabiskan ujian urease - digunakan untuk diagnosis jangkitan H. Pylori dan juga memantau keputusan kemusnahan yang disebabkan oleh dadah (pembasmian) bakteria.

Diagnosis H. Pylori termasuk ujian invasif dan tidak invasif - bergantung kepada sama ada pemeriksaan endoskopi perut (fibrogastroduodenoscopy) diperlukan atau tidak. Ujian invasif adalah ujian urease pesat atau ujian ekspres untuk urease (ujian RUT), yang memerlukan sampel tisu (biopsi). Ujian pernafasan urease 13C (13C-UBT) - yang paling biasa di kalangan ujian bukan invasif.

Perlu diingatkan bahawa diagnosis tidak invasif H.pylori boleh dijalankan melalui ujian darah untuk antibodi (kekhususan pada 75% sensitiviti - 84%), analisis ELISA air kencing (sensitiviti 96% dan spesifisiti 79%), antigen coprogram pada bakteria. Maklumat lanjut -  Helicobacter pylori jangkitan: antibodi ke Helicobacter pylori dalam darah

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7]

Petunjuk untuk prosedur ujian urease

Dengan sendirinya penjajahan mukosa perut H. Pylori bukan penyakit, ia adalah faktor peningkatan beban bakteria pada tubuh, yang dalam keadaan tertentu dapat memberi dorongan kepada perkembangan sejumlah gastrik dan atas gastrointestinal pathologies.

Tanda-tanda untuk diagnosis jangkitan H. Pylori, khususnya, ujian urease yang, yang berkaitan dengan gastritis dengan keasidan yang tinggi, dan gastritis atropik antral, duodenitis, ulser gastrik dan ulser duodenum, gastrik MALT-lymphoma. Selepas endoskopik resection awal peringkat kanser perut boleh dijalankan pemeriksaan histologi sempena ujian urease pesat - EGD dengan ujian urease.

Gastroenterologi boleh melantik ujian urease dengan aduan pesakit untuk rasa berat dan rasa tidak selesa di rantau ini epigastric, pedih ulu hati yang kerap selepas makan, untuk sendawa masam atau busuk di kepahitan di dalam mulut, loya, gangguan gastrousus, sakit atau kekejangan sakit di perut.

[8], [9]

Persediaan

Bersedia untuk ujian nafas 13C urea ialah pesakit perlu berhenti: antibiotik untuk 4 minggu sebelum ujian, dan NSAID dadah proton kumpulan pam perencat (mengurangkan keasidan perut) dan digunakan untuk pedih ulu hati, antasid atau penjerap - sekurang-kurangnya dua minggu. Mengambil sebarang ubat-ubatan perlu dihentikan selama lima atau enam hari, dan penggunaan minuman alkohol dan tembakau - tiga hari sebelum ujian.

Juga, kira-kira seminggu sebelum ujian, disyorkan untuk tidak makan kekacang, kerana kacang, kacang, kacang, kacang dan kacang mempunyai urease (yang melindungi tumbuh-tumbuhan daripada penyakit dan perosak).

Pada waktu petang pada malam ujian, makan malam lewat malam adalah kontraindikasi; pada hari ujian anda perlu melakukan kebersihan mulut biasa, dan selama sejam sebelum analisis tidak boleh apa-apa untuk diminum atau menggunakan biak.

[10], [11], [12], [13], [14]

Teknik ujian urease

Teknik:

• pertama mengambil sampel pernafasan asas - diisapkan ke dalam bekas plastik yang lembut (dan tertutup secara hermetikal);
• diambil secara dalaman dengan cecair dengan tambahan 13C-urea;
• Selepas 25-30 minit sampel kedua udara yang dihembuskan diambil - ke dalam bekas lain.

Sampel yang diperolehi dianalisis pada spektrometer massa dengan pemisahan isotop dalam sampel kedua dan penentuan kepekatan mereka. Perbezaan antara nilai dalam sampel kedua dan pertama dinyatakan sebagai delta (δ) berbanding dengan garis dasar. Nilai normal, iaitu nilai-nilai negatif dilabel 13C atom pada pesakit yang tidak dijangkiti berbeza 0,15-0,46%, manakala nilai-nilai positif kehadiran jangkitan sehingga 1,2-9,5% kadar urea hidrolisis lebih tinggi daripada 12-14 g / min.

Jika mudah: 13C pengesanan karbon dioksida dilabel di udara hembusan menunjukkan bahawa urea adalah tertakluk kepada hidrolisis oleh H. Enzim urease pylori, yang, sebenarnya, mengesahkan bahawa kehadirannya di dalam perut.

Ujian pernafasan untuk H. Pylori

13C-UBT ujian atau 13C urea ujian nafas untuk Helicobacter pylori adalah salah satu kaedah tidak invasif yang paling penting untuk mengesan jangkitan: dengan 100% sensitiviti dan spesifisiti risiko 98% daripada keputusan positif atau negatif yang palsu berbanding histologi dan ujian darah untuk antibodi kepada bawah 2 , 3%.

Analisis ini adalah berdasarkan kepada hidrolisis H. Pylori urease secara lisan administrable cecair urea atom dilabelkan (bukan radioaktif isotop stabil) 13C karbon (50-75 mg 13C-urea, dicairkan dengan 100 ml cecair).

Urea penyurih dilabel dalam perut mengalami hidrolisis untuk membebaskan ammonia dan tracers terdiri daripada karbon dioksida yang meresap ke dalam darah dan nafas output cahaya. Dilabelkan karbon dioksida yang membetulkan radas untuk analisis - sebuah spektrometer massa, yang tindakannya didasarkan pada spektroskopi isotopelektif bukan dispersif, atau penganalisis spektroskopi inframerah.

Ujian urease pantas

Ujian urease pesat (Rapid Urease Test atau RUT) dilakukan semasa pemeriksaan endoskopi perut dan duodenum - menggunakan endofibroskop moden - dan sampel persampelan spesies biopsi secara serentak. Biomaterial harus diambil dari bahagian perut perut. Jadi fibroadastroduodenoscopy atau FGD dengan ujian urease adalah kaedah diagnostik invasif.

Sampel biopsi yang diperolehi benar-benar tenggelam ke dalam medium yang seragam yang disediakan mengandungi gel agar, urea, penunjuk asid-bes dan phenolsulfonphthalein bacteriostatic (ditambah untuk mencegah pertumbuhan mikroorganisma mencemarkan dan keputusan positif palsu).

Jika sampel tisu perut bakteria yang hadir H. Pylori, urease dihasilkan oleh mereka akan hydrolyze urea, dan meningkatkan pH, yang dapat dilihat dengan jelas untuk menukar penunjuk kuning kepada oren (pH 6.8), dan magenta (pada pH> 8) 75% ujian positif menukar warna dalam 120-180 minit, dan semakin cepat penunjuk berubah warna, lebih banyak bakteria ada di sana. Tetapi ujian yang kelihatan negatif, berdiri selama 24 jam.

Ujian urease cepat adalah positif, apakah itu? Ujian RUT yang positif dari penunjuk-menunjukkan bahawa terdapat sekurang-kurangnya 105 H. Bakteria pylori dalam spesimen biopsi yang ditempatkan dalam medium agar, walaupun biasanya kepekatannya lebih tinggi.

Kepekaan pelbagai pengubahsuaian ujian berbeza dalam lingkungan 90-98%, dan kekhususannya adalah 97-99%.

Sebagai gastroenterologi berkata, jika pesakit berada dalam tahanan Set mendadak ujian urease positif (meletakkan tiga salib), ia bermakna: pH> 8, dan penunjuk telah bertukar warna dalam masa kurang daripada 60 minit selepas rendaman biopsi, menunjukkan bahawa sebilangan besar H.pylori dan tahap ekspresi urease yang tinggi. Anggaran bilangan bakteria boleh dianggarkan dengan pemeriksaan histologi biopsi di bawah mikroskop, dan jika ia melebihi bahagian yang diberikan 40-50, kadar jangkitan adalah dianggap tinggi.

13C ujian urea nafas jarang memberikan keputusan positif yang palsu, dan pada pesakit dengan ulser perut disyaki atau ulser duodenum adalah satu ujian yang positif adalah satu pengesahan diagnosis, manakala keputusan negatif mesti disahkan oleh keputusan EGD dengan ujian urease.