Kolera vibrio

Menurut WHO, taun adalah penyakit berjangkit yang dicirikan oleh cirit-birit akut, teruk, dehidrasi dengan najis dalam bentuk air beras, yang merupakan akibat daripada jangkitan Vibrio cholerae. Disebabkan oleh fakta bahawa ia dicirikan oleh keupayaan yang jelas untuk merebak secara meluas dalam wabak, kursus yang teruk dan kadar kematian yang tinggi, kolera dianggap sebagai jangkitan yang sangat berbahaya.

Tanah air bersejarah kolera adalah India, atau lebih tepat lagi, delta sungai Gangga dan Brahmaputra (kini India Timur dan Bangladesh), di mana ia telah wujud sejak zaman berzaman (wabak kolera di wilayah ini diperhatikan seawal 500 SM). Kewujudan lama tumpuan endemik kolera di sini dijelaskan oleh banyak sebab. Kolera vibrio bukan sahaja boleh bertahan di dalam air untuk masa yang lama, tetapi juga membiak di dalamnya dalam keadaan yang menggalakkan - suhu melebihi 12 °C, kehadiran bahan organik. Semua keadaan ini jelas di India: iklim tropika (purata suhu tahunan dari 25 hingga 29 °C), hujan dan paya yang banyak, kepadatan penduduk yang tinggi, terutamanya di delta Sungai Ganges, sejumlah besar bahan organik di dalam air, pencemaran air yang berterusan sepanjang tahun dengan kumbahan dan najis, taraf hidup material yang rendah dan upacara keagamaan dan pemujaan yang unik.

Dalam sejarah wabak kolera, empat tempoh boleh dibezakan.

Tempoh I - sehingga 1817, apabila kolera hanya tertumpu di Asia Timur dan Selatan, terutamanya di India, dan tidak merebak di luar sempadannya.

Tempoh II - dari 1817 hingga 1926. Dengan penubuhan hubungan ekonomi yang luas dan hubungan lain antara India dan Eropah dan negara-negara lain, kolera melampaui India dan, merebak di sepanjang laluan hubungan ekonomi dan agama, menyebabkan 6 wabak yang meragut jutaan nyawa manusia. Rusia adalah negara Eropah pertama di mana kolera menembusi. Dari 1823 hingga 1926, Rusia mengalami 57 tahun kolera. Pada masa ini, lebih daripada 5.6 juta orang jatuh sakit dengan taun dan 2.14 juta orang mati akibatnya ("40%).

Tempoh III - dari 1926 hingga 1961 Kolera kembali ke fokus endemik utamanya, dan tempoh kesejahteraan relatif bermula. Nampaknya dengan pembangunan sistem moden untuk membersihkan air minuman, membuang dan membasmi kuman air kumbahan, dan membangunkan langkah-langkah anti-kolera khas, termasuk penciptaan perkhidmatan kuarantin, negara-negara di dunia akan dilindungi dengan pasti daripada serangan taun yang lain.

Tempoh keempat bermula pada tahun 1961 dan berterusan sehingga hari ini. Pandemik ketujuh bermula bukan di India, tetapi di Indonesia, dengan cepat merebak ke Filipina, China, negara Indochina, dan kemudian ke negara lain di Asia, Afrika, dan Eropah. Keistimewaan wabak ini termasuk hakikat bahawa, pertama, ia disebabkan oleh varian khas kolera vibrio - V. cholerae eltor, yang sehingga tahun 1961 tidak diiktiraf secara rasmi sebagai agen penyebab kolera; kedua, dari segi tempoh, ia mengatasi semua wabak sebelumnya; ketiga, ia berlaku dalam dua gelombang, yang pertama berlarutan sehingga 1990, dan yang kedua bermula pada 1991 dan meliputi banyak negara di Amerika Selatan dan Utara, termasuk Amerika Syarikat, yang tidak pernah mengalami wabak taun sejak 1866. Dari 1961 hingga 1996, 3,943,239 orang jatuh sakit dengan 14cholera.

Agen penyebab kolera, Vibrio cholerae, ditemui pada tahun 1883 semasa pandemik kelima oleh R. Koch, tetapi vibrio pertama kali ditemui dalam najis pesakit dengan cirit-birit pada tahun 1854 oleh F. Pacini.

V. cholerae tergolong dalam keluarga Vibrionaceae, yang merangkumi beberapa genera (Vibrio, Aeromonas, Plesiomonas, Photobacterium). Genus Vibrio mempunyai lebih daripada 25 spesies sejak 1985, yang mana yang paling penting bagi manusia ialah V. cholerae, V. parahaemolyticus, V. alginolyticus, V. vulnificus dan V. fluvialis.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ]

Ciri-ciri utama genus Vibrio

Batang pendek, bukan spora dan berbentuk kapsul, melengkung atau lurus batang gram negatif, diameter 0.5 µm dan panjang 1.5-3.0 µm, motil (V. cholerae bersifat monotrik, sesetengah spesies mempunyai dua atau lebih flagela kutub); tumbuh dengan baik dan cepat pada media biasa, adalah chemoorganotrophs, dan menapai karbohidrat untuk menghasilkan asid tanpa gas (glukosa ditapai melalui laluan Embden-Meyerhof). Oksidase-positif, membentuk indole, mengurangkan nitrat kepada nitrit (V. cholerae memberikan tindak balas nitrosoindole positif), memecahkan gelatin, selalunya memberikan tindak balas Voges-Proskauer yang positif (iaitu, membentuk asetilmetilcarbinol), tidak mempunyai urease, tidak membentuk H2S, mempunyai lisin dan ornithine decarboxylase, tetapi tidak mempunyai arginine dihidrolase. Ciri ciri genus Vibrio ialah sensitiviti kebanyakan strain bakteria kepada ubat 0/129 (2,4-diamino-6,7-diazopropylpteridine), manakala wakil keluarga Pseudomonadaceae dan Enterobacteriaceae tahan terhadap ubat ini. Vibrios adalah aerobes dan anaerobes fakultatif, suhu optimum untuk pertumbuhan ialah 18-37 C, pH 8.6-9.0 (tumbuh dalam julat pH 6.0-9.6), sesetengah spesies (halofil) tidak tumbuh tanpa kehadiran NaCl. Kandungan G + C dalam DNA ialah 40-50 mol % (untuk V. cholerae kira-kira 47 mol %). Ujian biokimia digunakan untuk membezakan dalam keluarga Vibrionaceae daripada genera Aeromonas dan Plesiomonas yang serupa secara morfologi, serta untuk membezakan daripada keluarga Enterobacteriaceae.

Kolera vibrio berbeza daripada keluarga Pseudomonadaceae kerana ia menapai glukosa hanya melalui laluan Embden-Meyerhof (tanpa penyertaan O2), manakala yang pertama mengambil glukosa hanya dengan kehadiran O2. Perbezaan antara mereka mudah didedahkan pada medium Hugh-Leifson. Medium mengandungi agar nutrien, glukosa dan penunjuk. Penyemaian dilakukan dalam dua lajur dengan medium Hugh-Leifson, salah satunya diisi dengan jeli petroleum (untuk mewujudkan keadaan anaerobik). Dalam kes pertumbuhan kolera vibrio, warna medium berubah dalam kedua-dua tabung uji, dalam kes pertumbuhan pseudomonads - hanya dalam tabung uji tanpa jeli petroleum (keadaan pertumbuhan aerobik).

Kolera vibrio sangat tidak menuntut kepada media nutrien. Ia membiak dengan baik dan cepat dalam 1% beralkali (pH 8.6-9.0) air pepton (PV) yang mengandungi 0.5-1.0% NaCl, mengatasi pertumbuhan bakteria lain. Untuk menyekat pertumbuhan Proteus, disyorkan untuk menambah potassium tellurite (dalam pencairan akhir 1:100,000) kepada 1% PV. 1% PV adalah medium pengayaan terbaik untuk kolera vibrio. Semasa pertumbuhan, ia membentuk filem halus, longgar, kelabu pada permukaan PV selepas 6-8 jam, yang mudah musnah apabila digoncang dan jatuh ke bahagian bawah dalam bentuk kepingan, PV menjadi keruh sederhana. Pelbagai media terpilih telah dicadangkan untuk pengasingan kolera vibrio: agar alkali, agar garam hempedu, albuminat alkali, agar alkali dengan darah, laktosa-sukrosa dan media lain. Yang terbaik ialah medium TCBS (thiosulfate citrate-bromothymol sucrose agar) dan pengubahsuaiannya. Walau bagaimanapun, MPA beralkali paling kerap digunakan, di mana kolera vibrio membentuk koloni licin, telus berkaca, berwarna kebiruan, berbentuk cakera dengan konsistensi likat.

Apabila disemai melalui suntikan ke dalam lajur gelatin, vibrio, selepas 2 hari pada suhu 22-23 C, menyebabkan pencairan dari permukaan dalam bentuk gelembung, kemudian berbentuk corong, dan akhirnya, lapisan demi lapisan.

Dalam susu, vibrio cepat membiak, menyebabkan pembekuan selepas 24-48 jam, dan kemudian peptonisasi susu berlaku, dan selepas 3-4 hari vibrio mati akibat perubahan pH susu ke bahagian berasid.

B. Heiberg, berdasarkan keupayaan mereka untuk menapai mannose, sukrosa dan arabinosa, membahagikan semua vibrio (cholera dan cholera-like) kepada beberapa kumpulan, yang jumlahnya kini berjumlah 8.

Vibrio cholerae tergolong dalam kumpulan pertama Heiberg.

Vibrios serupa dalam ciri morfologi, budaya dan biokimia kepada kolera vibrio adalah dan dipanggil secara berbeza: parakolera, seperti kolera, NAG-vibrios (vibrio tidak mengaglutinasi); vibrios bukan tergolong dalam kumpulan O1. Nama terakhir paling tepat menekankan hubungan mereka dengan kolera vibrio. Seperti yang diasaskan oleh A. Gardner dan K. Venkat-Raman, kolera dan vibrio seperti kolera mempunyai antigen H yang sama, tetapi berbeza dalam antigen O. Menurut antigen O, kolera dan vibrio seperti kolera kini dibahagikan kepada 139 O-serogroups, tetapi bilangan mereka sentiasa berkembang. Kolera vibrio tergolong dalam kumpulan O1. Ia mempunyai antigen A biasa dan dua antigen khusus jenis - B dan C, yang mana tiga serotype V. cholerae dibezakan - serotype Ogawa (AB), serotype Inaba (AC) dan serotype Hikoshima (ABC). Kolera vibrio dalam peringkat disosiasi mempunyai OR-antigen. Dalam hal ini, O-serum, OR-serum dan sera spesifik jenis Inaba dan Ogawa digunakan untuk mengenal pasti V. cholerae.

Pada tahun 1992-1993, wabak kolera besar bermula di Bangladesh, India, China, Malaysia dan negara-negara lain, agen penyebabnya adalah serovar spesies Vibrio cholerae yang baru, yang sebelum ini tidak diketahui. Ia berbeza daripada V. cholerae O1 dengan ciri antigen: ia mempunyai antigen 0139 dan kapsul polisakarida dan tidak diaglutinasi oleh mana-mana O-sera lain. Semua sifat morfologi dan biologinya yang lain, termasuk keupayaan untuk menyebabkan kolera, iaitu, untuk mensintesis eksotoksin-kolerogen, ternyata serupa dengan sifat V. cholerae O1. Akibatnya, agen penyebab kolera baru, V. cholerae 0139, nampaknya timbul akibat mutasi yang mengubah antigen O. Ia dinamakan V. cholerae 0139 bengal.

Persoalan tentang hubungan vibrio seperti kolera dengan V. cholerae telah lama tidak jelas. Walau bagaimanapun, perbandingan V. cholerae dan cholera-like (NAG-vibrios) dengan lebih daripada 70 ciri mendedahkan persamaan mereka sebanyak 90%, dan tahap homologi DNA V. cholerae dan NAG-vibrios yang dikaji ialah 70-100%. Oleh itu, vibrio seperti kolera digabungkan menjadi satu spesies dengan vibrio kolera, yang mana ia berbeza terutamanya dalam antigen O mereka, yang berkaitan dengannya ia dipanggil vibrio bukan kumpulan 01 - V. cholerae bukan 01.

Spesies V. cholerae dibahagikan kepada 4 biotaip: V. cholerae, V. eltor, V. proteus dan V. albensis. Sifat El Tor vibrio telah diperdebatkan selama bertahun-tahun. Vibrio ini telah diasingkan pada tahun 1906 oleh F. Gottschlich di stesen kuarantin El Tor dari mayat seorang jemaah haji yang meninggal dunia akibat disentri. F. Gottschlich mengasingkan beberapa strain tersebut. Mereka tidak berbeza daripada kolera vibrio dalam semua sifatnya dan diagregatkan oleh kolera O-serum. Walau bagaimanapun, oleh kerana tiada kolera di kalangan jemaah haji pada masa itu, dan pengangkutan jangka panjang kolera vibrio dianggap tidak mungkin, persoalan kemungkinan peranan etiologi V. eltor dalam kolera masih menjadi kontroversi untuk masa yang lama. Di samping itu, vibrio El Tor, tidak seperti V. cholerae, mempunyai kesan hemolitik. Walau bagaimanapun, pada tahun 1937, vibrio ini menyebabkan wabak taun yang besar dan teruk di pulau Sulawesi (Indonesia) dengan kadar kematian melebihi 60%. Akhirnya, pada tahun 1961, ia menjadi punca kepada wabak ke-7, dan pada tahun 1962 persoalan sifat taunnya akhirnya diselesaikan. Perbezaan antara V. cholerae dan V. eltor hanya melibatkan beberapa ciri. Dalam semua sifat lain, V. eltor pada asasnya tidak berbeza daripada V. cholerae. Di samping itu, kini telah ditetapkan bahawa biotaip V. proteus (V.finklerpriori) merangkumi keseluruhan kumpulan vibrios, kecuali kumpulan 01 (dan kini 0139), yang sebelum ini dipanggil NAG vibrios. Biotaip V. albensis telah diasingkan dari Sungai Elbe dan mempunyai keupayaan untuk memfosforus, tetapi setelah kehilangannya, ia tidak berbeza dengan V. proteus. Berdasarkan data ini, spesies Vibrio cholerae pada masa ini dibahagikan kepada 4 biotaip: V. cholerae 01 cholerae, V. cholerae eltor, V. cholerae 0139 bengal dan V. cholerae non 01. Tiga yang pertama tergolong dalam dua serovar 01 dan 0139. Biovar V yang terakhir adalah alproteus V. oleh banyak serovar vibrios lain yang tidak diagregatkan oleh 01 dan 0139 sera, iaitu NAG vibrios.

Faktor patogenik kolera vibrio

[ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ], [ 12 ]

Chemotaxis Vibrio cholerae

Dengan bantuan sifat-sifat ini, vibrio berinteraksi dengan sel epitelium. Dalam mutan vibrio kolera (yang telah kehilangan keupayaan untuk kemotaksis), virulensi berkurangan dengan ketara, dalam mutan Mob (yang kehilangan mobiliti) sama ada ia hilang sepenuhnya atau berkurangan dengan mendadak.

Faktor lekatan dan kolonisasi yang mana vibrio melekat pada mikrovili dan menjajah membran mukus usus kecil. Faktor lekatan termasuk mucinase, hemagglutinin/protease larut, neuraminidase, dll. Mereka menggalakkan lekatan dan penjajahan dengan memusnahkan bahan yang merupakan sebahagian daripada lendir. Hemagglutinin/protease larut menggalakkan pemisahan vibrio daripada reseptor sel epitelium dan keluarnya dari usus ke persekitaran luaran, memastikan wabaknya merebak. Neuraminidase menguatkan ikatan antara koleragen dan sel epitelium dan memudahkan penembusan toksin ke dalam sel, yang meningkatkan keterukan cirit-birit.

Toksin kolera ialah koleragen.

Apa yang dipanggil toksin baru yang mampu menyebabkan cirit-birit, tetapi tidak mempunyai hubungan genetik atau imunologi dengan koleragen.

Faktor dermoneurotik dan hemoragik. Sifat faktor toksik ini dan peranannya dalam patogenesis kolera belum cukup dikaji.

[ 13 ], [ 14 ], [ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ]

Endotoksin Vibrio cholerae

Lipopolysaccharides V. cholerae mempunyai sifat endotoksik yang kuat dan menyebabkan mabuk umum badan.

Faktor patogenisitas utama kolera vibrio yang disenaraikan ialah koleragen eksotoksin (CTX AB), yang menentukan patogenesis penyakit ini. Molekul kolera terdiri daripada dua serpihan - A dan B. Fragmen A terdiri daripada dua peptida - A1 dan A2, ia mempunyai sifat khusus toksin taun dan memberikannya kualiti superantigen. Fragmen B terdiri daripada 5 subunit yang sama. Ia melaksanakan dua fungsi: 1) mengenali reseptor (monosialoganglioside) enterosit dan mengikatnya; 2) membentuk saluran hidrofobik intramembran untuk laluan subunit A. Peptida A2 berfungsi untuk mengikat serpihan A dan B. Fungsi toksik sebenar dilakukan oleh peptida Aj (ADP-ribosyltransferase). Ia berinteraksi dengan NAD, menyebabkan hidrolisisnya; ADP-ribose yang terhasil mengikat kepada subunit pengawalseliaan adenilat siklase. Ini membawa kepada perencatan hidrolisis GTP. Kompleks GTP + adenilat siklase yang terhasil menyebabkan hidrolisis ATP dengan pembentukan cAMP. (Laluan lain untuk pengumpulan cAMP ialah penindasan oleh koleragen enzim yang menghidrolisis cAMP kepada 5-AMP). Manifestasi fungsi gen ctxAB yang mengekodkan sintesis eksotoksin bergantung pada fungsi beberapa gen patogenik yang lain, khususnya gen tcp (mengekodkan sintesis pili lekatan terkawal toksin - TCAP), gen pengawalseliaan toxR, toxS dan toxT, hap (soluble hemagseglutatin) (soluble hemagseglutinin) dan protein. gen. Oleh itu, kawalan genetik patogenik V. cholerae adalah kompleks.

Ternyata, terdapat dua pulau patogenik dalam kromosom V. cholerae. Salah satunya ialah genom fag penukar sederhana berfilamen CTXφ, dan yang lain ialah genom VPIcp fag penukar sederhana berfilamen juga. Setiap pulau patogenik ini mengandungi kaset gen yang dinyatakan dalam prophase, yang menentukan patogenik patogen kolera. Profaj CTXφ membawa gen CTX, gen toksin baru zot dan ace, gen ser (sintesis adhesin), dan gen ortU (sintesis produk dengan fungsi yang tidak diketahui). Kaset ini juga termasuk gen nei dan rantau phage RS2, yang mengekod untuk replikasi dan penyepaduan profaj ke dalam kromosom. Gen zot, ace, dan ortU diperlukan untuk pembentukan virion fag apabila profaj dikecualikan daripada kromosom patogen.

Profaj VPIcp membawa gen tcp (mengekodkan pengeluaran pili (protein TCPA)), toxT, toxR, gen bertindak (faktor kolonisasi tambahan, gen mobiliti (integrasi dan transposases)). Transkripsi gen virulensi dikawal oleh tiga gen pengawalseliaan: toxR, toxS, dan toxT. Gen ini secara koordinat, pada peringkat transkripsi, mengubah aktiviti lebih daripada 20 gen virulensi, termasuk ctxAB, tcp dan gen lain. Gen pengawalseliaan utama ialah gen toxR. Kerosakan atau ketiadaannya membawa kepada avirulensi atau penurunan lebih daripada 100 kali ganda dalam pengeluaran toksin kolera CTX dan TCPA. Mungkin, ini adalah bagaimana ekspresi gen virulensi yang diselaraskan dikawal dalam pulau-pulau patogenik yang dibentuk oleh fag penukar sederhana dan dalam spesies bakteria lain. Telah ditetapkan bahawa satu lagi profaj K139 terdapat dalam kromosom V. cholerae eltor, tetapi genomnya tidak banyak dikaji.

Gen hap disetempat pada kromosom. Oleh itu, virulensi (patogenisiti) dan kapasiti wabak V. cholerae ditentukan oleh 4 gen: ctxAB, tcp, toxR dan hap.

Pelbagai kaedah boleh digunakan untuk mengesan keupayaan V. cholerae menghasilkan koleragen.

Ujian biologi ke atas arnab. Apabila vibrios kolera disuntik secara intramuskular ke dalam arnab penyusuan (berumur tidak lebih daripada 2 minggu), mereka mengalami sindrom kolera tipikal: cirit-birit, dehidrasi dan kematian arnab.

Pengesanan langsung koleragen oleh PCR, IFM atau tindak balas hemolisis imun pasif (kolerogen mengikat Gmj eritrosit, dan ia dilisiskan apabila penambahan antibodi dan pelengkap antitoksik). Walau bagaimanapun, pengesanan keupayaan untuk menghasilkan toksin sahaja tidak mencukupi untuk menentukan bahaya wabak strain tersebut. Untuk ini, adalah perlu untuk mengesan kehadiran gen hap, oleh itu, cara terbaik dan paling dipercayai untuk membezakan strain toksigenik dan epidemik kolera vibrios serogroup 01 dan 0139 adalah dengan PCR menggunakan primer khusus untuk mengesan kesemua 4 gen patogenik: ctxAB, tcp, toxR dan hap.

Keupayaan V. cholerae selain daripada serogroup 01 atau 0139 untuk menyebabkan penyakit cirit-birit sporadis atau berkelompok pada manusia mungkin disebabkan sama ada oleh kehadiran enterotoksin jenis LT atau ST, yang masing-masing merangsang sistem adenylate atau guanylate cyclase, atau kehadiran hanya gen ctxAB tetapi tiada gen hap.

Semasa wabak ketujuh, strain V. cholerae dengan tahap virulensi yang berbeza-beza diasingkan: kolerogenik (virulen), kolerogenik lemah (rendah virulensi) dan bukan kolerogenik (tidak virulen). Kolera V. bukan kolerogenik, sebagai peraturan, mempamerkan aktiviti hemolitik, tidak dilisiskan oleh fag diagnostik kolera HDF(5), dan tidak menyebabkan penyakit manusia.

Untuk menaip phage V. cholerae 01 (termasuk El Tor) S. Mukherjee mencadangkan set phages, yang kemudiannya ditambah dengan phages lain di Rusia. Satu set faj tersebut (1-7) membolehkan seseorang membezakan jenis faj antara V. cholerae 0116. Untuk mengenal pasti V. cholerae El Tor toksigenik dan tidak toksik, bukannya HDF-3, HDF-4 dan HDF-5, phages CTX* (sekarang toksigenik lyse El Torxitoxibriosse) dan Cbriosse proposed adalah El Torxigenic (lyse toksigenik El Torxitox) dan Cbriosse proposed. Rusia.

[ 19 ], [ 20 ], [ 21 ]

Rintangan patogen kolera

Kolera vibrios bertahan dengan baik pada suhu rendah; mereka kekal berdaya maju dalam ais sehingga 1 bulan; dalam air laut - sehingga 47 hari, dalam air sungai - dari 3-5 hari hingga beberapa minggu, dalam air mineral rebus mereka bertahan selama lebih dari 1 tahun, di dalam tanah - dari 8 hari hingga 3 bulan, dalam najis segar - sehingga 3 hari, pada produk rebus (nasi, mi, daging, bubur, dll.) Mereka bertahan selama 2-5 hari, pada 2-4 hari, pada hari-hari mentah, pada 2-4 hari, pada hari-hari mentah. susu dan produk tenusu - 5 hari; apabila disimpan dalam keadaan sejuk, tempoh survival meningkat sebanyak 1-3 hari; pada linen linen yang tercemar dengan najis, mereka bertahan sehingga 2 hari, dan pada bahan lembap - seminggu. Kolera vibrios mati dalam masa 5 minit pada suhu 80 °C, dan serta-merta pada 100 °C; mereka sangat sensitif kepada asid; mereka mati dalam masa 5-15 minit di bawah pengaruh chloramine dan pembasmi kuman lain. Mereka sensitif kepada pengeringan dan cahaya matahari langsung, tetapi mereka bertahan dengan baik dan untuk masa yang lama malah membiak dalam badan air terbuka dan air sisa yang kaya dengan bahan organik, dengan pH beralkali dan suhu melebihi 10-12 °C. Mereka sangat sensitif terhadap klorin: dos klorin aktif sebanyak 0.3-0.4 mg/l air dalam 30 minit menyebabkan pembasmian kuman yang boleh dipercayai daripada kolera vibrios.

Vibrios patogenik kepada manusia yang bukan tergolong dalam spesies Vibrio Cholerae

Genus Vibrio merangkumi lebih daripada 25 spesies, di mana, sebagai tambahan kepada V. cholerae, sekurang-kurangnya lapan mampu menyebabkan penyakit pada manusia: V. parahaemolyticus, V. alginolyticus, V. vulnificus, V. fluvialis, V. fumissii, V. mimicus, V. damsela, dan V. hollisae. Semua vibrio ini mendiami laut dan teluk. Jangkitan berlaku sama ada melalui berenang atau melalui makan makanan laut. Telah didapati bahawa kolera dan bukan kolera vibrios boleh menyebabkan bukan sahaja gastroenteritis, tetapi juga jangkitan luka. Keupayaan ini telah ditemui dalam kumpulan V. cholerae 01 dan bukan-01, V. parahaemolyticus, V. alginolyticus, V. mimicus, V. damsela, dan V. vulnificus. Ia menyebabkan proses keradangan dalam tisu lembut apabila ia rosak oleh cangkerang haiwan laut atau apabila bersentuhan langsung dengan air laut yang dijangkiti.

Daripada vibrios bukan kolera patogen yang disenaraikan, minat yang paling praktikal ialah V. parahaemolyticus, V. alginolyticus, V. vulnificus dan V. fluvialis.

V. parahaemolyticus - vibrio parahaemolytic - pertama kali diasingkan di Jepun pada tahun 1950 semasa wabak besar keracunan makanan yang disebabkan oleh pengambilan sardin separuh kering (kematian ialah 7.5%). Ejen penyebabnya tergolong dalam genus Vibrio oleh R. Sakazaki pada tahun 1963. Dia membahagikan strain yang dikaji kepada 2 spesies: V. parahaemolyticus dan V. alginolyticus. Kedua-dua spesies ditemui dalam air laut pantai dan dalam penduduknya, mereka adalah halofil (hals Yunani - garam); tidak seperti vibrio biasa, yang halofilik tidak tumbuh pada media tanpa NaCl dan membiak dengan baik pada kepekatannya yang tinggi. Gabungan spesies vibrio halofilik ditentukan oleh keupayaan mereka untuk menapai sukrosa, membentuk asetilmetilkarbinol, dan membiak dalam PV dengan 10% NaCl. Semua ciri ini wujud dalam spesies V. alginolyticus, tetapi tiada dalam V. parahaemolyticus.

Vibrio parahaemolytic mempunyai tiga jenis antigen: antigen flagellar H yang tahan haba, antigen O-stabil haba yang tidak dimusnahkan dengan pemanasan hingga 120 °C selama 2 jam, dan antigen K permukaan yang dimusnahkan oleh pemanasan. Kultur V. parahaemolyticus yang baru diasingkan mempunyai antigen K yang jelas yang melindungi vibrio hidup daripada penggumpalan oleh O-sera homolog. Antigen H adalah sama untuk semua strain, tetapi antigen H monotrichus berbeza daripada antigen H peritrik. Menurut antigen O, V. parahaemolyticus dibahagikan kepada 14 serogroup. Dalam serogroup, vibrios dibahagikan kepada serotype mengikut K-antigen, jumlahnya ialah 61. Skim antigen V. parahaemolyticus telah dibangunkan untuk strainnya yang diasingkan daripada manusia sahaja.

Patogenisiti V. parahaemolyticus dikaitkan dengan keupayaannya untuk mensintesis hemolysin, yang mempunyai sifat enterotoksik. Yang terakhir dikesan menggunakan kaedah Kanagawa. Intipatinya terletak pada fakta bahawa V. parahaemolyticus, patogenik untuk manusia, menyebabkan hemolisis yang jelas pada agar darah yang mengandungi 7% NaCl. Pada agar darah yang mengandungi kurang daripada 5% NaCl, hemolisis disebabkan oleh banyak strain V. parahaemolyticus, dan pada agar darah dengan 7% NaCl - hanya strain dengan sifat enteropatogenik. Vibrio parahaemolytic ditemui di pantai Jepun, Caspian, Hitam dan laut lain. Ia menyebabkan jangkitan toksik bawaan makanan dan penyakit seperti disentri. Jangkitan berlaku apabila memakan makanan laut mentah atau separuh mentah yang dijangkiti V- parahaemolyticus (ikan laut, tiram, krustasea, dll.).

Antara lapan vibrio bukan kolera yang disebutkan di atas, yang paling patogenik untuk manusia ialah V. vulnificus, yang pertama kali diterangkan pada tahun 1976 sebagai Beneckea vulnificus dan kemudian diklasifikasikan semula sebagai Vibrio vulnificus pada tahun 1980. Ia sering ditemui dalam air laut dan penduduknya dan menyebabkan pelbagai penyakit manusia. Strain V. vulnificus dari marin dan asal klinikal tidak berbeza antara satu sama lain sama ada secara fenotip atau genetik.

Jangkitan luka yang disebabkan oleh V. vulnificus berkembang pesat dan membawa kepada pembentukan tumor dengan nekrosis tisu berikutnya, disertai oleh demam, menggigil, kadang-kadang sakit teruk, dan dalam beberapa kes memerlukan amputasi.

V. vulnificus didapati menghasilkan eksotoksin. Eksperimen haiwan telah menunjukkan bahawa patogen menyebabkan kerosakan tempatan yang teruk dengan perkembangan edema dan nekrosis tisu, diikuti dengan kematian. Peranan eksotoksin dalam patogenesis penyakit sedang dikaji.

Sebagai tambahan kepada jangkitan luka, V. vulnificus boleh menyebabkan radang paru-paru pada mangsa lemas dan endometritis pada wanita selepas terdedah kepada air laut. Bentuk jangkitan paling teruk yang disebabkan oleh V. vulnificus ialah septikemia primer yang dikaitkan dengan makan tiram mentah (dan mungkin haiwan laut lain). Penyakit ini berkembang sangat cepat: pesakit mengalami malaise, demam, menggigil, dan sujud, kemudian hipotensi yang teruk, yang merupakan punca utama kematian (kadar kematian adalah kira-kira 50%).

V. fluvialis pertama kali digambarkan sebagai patogen gastroenteritis pada tahun 1981. Ia tergolong dalam subkumpulan vibrio patogenik bukan kolera yang mempunyai arginin dihidrolase tetapi tiada netornithine dan lisin dekarboksilase (V. fluvialis, V. furnissii, V. damsela, iaitu, fenotipinya serupa dengan Afenomonas). V. fluvialis adalah agen penyebab gastroenteritis yang biasa, yang disertai dengan muntah yang teruk, cirit-birit, sakit perut, demam, dan dehidrasi teruk atau sederhana. Faktor patogenik utama ialah enterotoksin.

Epidemiologi kolera

Sumber utama jangkitan hanya seseorang - pesakit kolera atau pembawa vibrio, serta air yang tercemar dengannya. Tiada haiwan di alam semula jadi yang mendapat taun. Laluan jangkitan adalah feco-oral. Laluan jangkitan: a) yang utama - melalui air yang digunakan untuk minum, mandi dan keperluan rumah; b) hubungi-isi rumah dan c) melalui makanan. Semua wabak utama dan wabak kolera dikaitkan dengan air. Vibrios kolera mempunyai mekanisme penyesuaian sedemikian yang memastikan kewujudan populasi mereka dalam tubuh manusia dan dalam ekosistem tertentu badan air terbuka. Cirit-birit yang teruk, yang disebabkan oleh kolera vibrio, membawa kepada pembersihan usus daripada bakteria pesaing dan menyumbang kepada penyebaran patogen yang meluas dalam persekitaran, terutamanya dalam air sisa dan dalam badan air terbuka di mana ia dibuang. Seseorang yang menghidap kolera mengeluarkan patogen dalam kuantiti yang banyak - dari 100 juta hingga 1 bilion setiap 1 ml najis, pembawa vibrio mengeluarkan 100-100,000 vibrios dalam 1 ml, dos berjangkit adalah kira-kira 1 juta vibrios. Tempoh perkumuhan kolera vibrio dalam pembawa yang sihat adalah dari 7 hingga 42 hari dan 7-10 hari pada mereka yang telah pulih. Perkumuhan yang lebih lama sangat jarang berlaku.

Keanehan kolera ialah selepas itu, sebagai peraturan, tidak ada pengangkutan jangka panjang dan tiada fokus endemik yang stabil terbentuk. Walau bagaimanapun, seperti yang telah dinyatakan di atas, disebabkan oleh pencemaran badan air terbuka dengan air sisa yang mengandungi sejumlah besar bahan organik, detergen dan garam meja, pada musim panas kolera vibrio bukan sahaja bertahan di dalamnya untuk masa yang lama, tetapi juga berganda.

Kepentingan epidemiologi yang hebat ialah hakikat bahawa kolera vibrio kumpulan 01, kedua-dua bukan toksik dan toksik, boleh bertahan lama dalam pelbagai ekosistem akuatik sebagai bentuk yang tidak ditanam. Menggunakan tindak balas rantai polimerase, gen vct daripada bentuk V. chokrae yang tidak ditanam telah dikesan dalam pelbagai badan air di beberapa wilayah endemik CIS semasa kajian bakteriologi negatif.

Tumpuan endemik vibrio kolera El Tor adalah Indonesia, kemunculan penyebab pandemik ketujuh dari sana ini dipercayai dikaitkan dengan perluasan hubungan ekonomi Indonesia dengan dunia luar selepas mencapai kemerdekaan, dan tempoh dan perkembangan sepantas kilat wabak itu, terutamanya gelombang kedua, sangat dipengaruhi oleh pelbagai krisis sosial di negara-negara Asia, Afrika dan Afrika. dan Amerika.

Sekiranya kolera, pelbagai langkah anti-wabak diambil, antaranya yang utama dan tegas adalah aktif, pengesanan dan pengasingan tepat pada masanya (penghospitalan, rawatan) pesakit dalam bentuk akut dan atipikal dan pembawa vibrio yang sihat; langkah-langkah diambil untuk mencegah kemungkinan laluan jangkitan; perhatian khusus diberikan kepada bekalan air (pengklorinan air minuman), pematuhan dengan keadaan kebersihan dan kebersihan di perusahaan makanan, di institusi kanak-kanak, tempat awam; kawalan ketat, termasuk bakteriologi, dijalankan di atas badan air terbuka, imunisasi penduduk dijalankan, dsb.

[ 22 ], [ 23 ], [ 24 ], [ 25 ], [ 26 ]

Gejala kolera

Tempoh inkubasi kolera berbeza dari beberapa jam hingga 6 hari, selalunya 2-3 hari. Setelah memasuki lumen usus kecil, kolera vibrios, kerana mobiliti mereka dan chemotaxis ke membran mukus, diarahkan ke lendir. Untuk menembusi melaluinya, vibrios menghasilkan beberapa enzim: neuraminidase, mucinase, protease, lecithinase, yang memusnahkan bahan yang terkandung dalam lendir dan memudahkan pergerakan vibrios ke sel epitelium. Dengan lekatan, vibrios melekat pada glycocalyx epitelium dan, kehilangan mobiliti, mula membiak secara intensif, menjajah mikrovili usus kecil (lihat sisipan warna, Rajah 101.2), dan pada masa yang sama menghasilkan sejumlah besar eksotoksin-kolerogen. Molekul koleragen mengikat kepada monosialoganglioside Gni! Dan menembusi membran sel, di mana mereka mengaktifkan sistem adenylate cyclase, dan cAMP yang terkumpul menyebabkan hipersekresi cecair, kation dan anion Na, HCO, Kl, Cl daripada enterosit, yang membawa kepada cirit-birit kolera, dehidrasi dan penyahgaraman badan. Terdapat tiga jenis penyakit:

• penyakit cirit-birit dehidrasi yang ganas dan teruk yang mengakibatkan kematian pesakit dalam masa beberapa jam;
• kursus kurang teruk, atau cirit-birit tanpa dehidrasi;
• perjalanan asimtomatik penyakit (pembawaan vibrios).

Dalam kes kolera yang teruk, pesakit mengalami cirit-birit, kekerapan najis meningkat, najis menjadi lebih banyak, menjadi berair, hilang bau najis dan kelihatan seperti sup nasi (cecair keruh dengan sisa lendir dan sel epitelium terapung di dalamnya). Kemudian muntah yang melemahkan berlaku, pertama dari kandungan usus, dan kemudian muntah mengambil rupa sup nasi. Suhu pesakit turun di bawah normal, kulit menjadi kebiruan, berkedut dan sejuk - kolera algid. Akibat dehidrasi, darah menebal, sianosis berkembang, kebuluran oksigen, fungsi buah pinggang menderita secara mendadak, sawan muncul, pesakit kehilangan kesedaran dan kematian berlaku. Kadar kematian akibat taun semasa wabak ketujuh berbeza daripada 1.5% di negara maju kepada 50% di negara membangun.

Imuniti selepas berjangkit adalah kuat, tahan lama, dan penyakit berulang jarang berlaku. Kekebalan adalah antitoksik dan antimikrobial, disebabkan oleh antibodi (antitoksin kekal lebih lama daripada antibodi antimikrobial), sel memori imun, dan fagosit.

Diagnosis makmal kolera

Kaedah utama dan menentukan untuk mendiagnosis kolera adalah bakteriologi. Bahan untuk pemeriksaan daripada pesakit adalah najis dan muntah; najis diperiksa untuk pengangkutan vibrio; bahagian berikat usus kecil dan pundi hempedu diambil untuk pemeriksaan daripada orang yang meninggal dunia akibat taun; daripada objek persekitaran luaran, air dari takungan terbuka dan air sisa paling kerap diperiksa.

Apabila menjalankan kajian bakteriologi, tiga syarat berikut mesti dipenuhi:

• menyemai bahan dari pesakit secepat mungkin (cholera vibrio bertahan dalam najis untuk jangka masa yang singkat);
• bekas di mana bahan diambil tidak boleh dibasmi kuman dengan bahan kimia dan tidak boleh mengandungi kesannya, kerana kolera vibrio sangat sensitif terhadapnya;
• menghapuskan kemungkinan pencemaran dan jangkitan orang lain.

Budaya diasingkan mengikut skema berikut: menyemai pada PV, serentak pada MPA beralkali atau mana-mana medium terpilih (TCBS adalah yang terbaik). Selepas 6 jam, filem yang terbentuk pada PV diperiksa, dan jika perlu, pemindahan dibuat ke PV kedua (kadar penyemaian vibrio kolera dalam kes ini meningkat sebanyak 10%). Daripada PV, pemindahan dibuat kepada MPA beralkali. Koloni yang mencurigakan (kaca-lutsinar) dipindahkan untuk mendapatkan kultur tulen, yang dikenal pasti oleh sifat morfologi, budaya, biokimia, motilitas dan akhirnya ditaip menggunakan sera aglutinasi diagnostik O-, OR-, Inaba dan Ogawa dan phages (HDF). Pelbagai pilihan untuk diagnostik dipercepatkan telah dicadangkan, yang terbaik adalah kaedah serologi luminescent. Ia membolehkan untuk mengesan kolera vibrio secara langsung dalam bahan ujian (atau selepas penanaman awal dalam dua tabung uji dengan 1% PV, kepada salah satu daripadanya kolera phage ditambah) dalam masa 1.5-2 jam. Untuk pengesanan kolera vibrio yang dipercepatkan, Nizhny Novgorod IEM telah mencadangkan satu set cakera penunjuk kertas yang terdiri daripada 13 ujian biokimia (oksidase, indole, urease, laktosa, glukosa, sukrosa, mannose, arabinose, manitol, inositol, arginine, ornithine, membenarkan wakil genebrios Visine yang berbeza daripada gen. Aeromonas, Plesiomonas, Pseudomonas, Comamonas dan daripada keluarga Enterobacteriaceae. Untuk pengesanan cepat kolera vibrio dalam najis dan dalam objek persekitaran, RPGA dengan diagnosticum antibodi boleh digunakan. Untuk mengesan bentuk kolera vibrio yang tidak ditanam dalam objek persekitaran, hanya kaedah tindak balas rantai polimerase digunakan.

Dalam kes di mana non-Ol-kumpulan V. cholerae diasingkan, mereka harus ditaip menggunakan sera aglutinasi yang sepadan bagi serogroup lain. Pengasingan bukan-Ol-kumpulan V. kolerae daripada pesakit dengan cirit-birit (termasuk cirit-birit seperti kolera) memerlukan langkah anti-wabak yang sama seperti dalam kes pengasingan Ol-kumpulan V. kolera. Jika perlu, kehadiran gen patogenik ctxAB, tcp, toxR dan hap ditentukan dalam vibrio tersebut menggunakan PCR.

Diagnostik serologi kolera adalah bersifat tambahan. Untuk tujuan ini, tindak balas aglutinasi boleh digunakan, tetapi lebih baik untuk menentukan titer antibodi vibriocidal atau antitoksin (antibodi kepada kolera ditentukan oleh kaedah immunoassay enzim atau immunofluorescence).

Diagnostik makmal vibrio patogen bukan kolera

Kaedah utama untuk mendiagnosis penyakit yang disebabkan oleh vibrios patogen bukan kolera adalah bakteriologi menggunakan media terpilih seperti TCBS, MacConkey, dll. Kepunyaan budaya terpencil ke genus Vibrio ditentukan berdasarkan ciri utama bakteria genus ini.

Rawatan kolera

Rawatan pesakit taun haruslah terdiri daripada penghidratan semula dan pemulihan metabolisme garam air yang normal. Untuk tujuan ini, disyorkan untuk menggunakan larutan garam, sebagai contoh, komposisi berikut: NaCl - 3.5; NaHC03 - 2.5; KCl - 1.5 dan glukosa - 20.0 g setiap 1 liter air. Rawatan yang dibuktikan secara patogenetik sedemikian digabungkan dengan terapi antibiotik yang rasional membolehkan mengurangkan kadar kematian dalam kolera kepada 1% atau kurang.

Pencegahan khusus kolera

Untuk mencipta imuniti tiruan, vaksin taun telah dicadangkan, termasuk yang dibuat daripada strain Inaba dan Ogawa yang terbunuh; toksoid kolera untuk kegunaan subkutan dan vaksin bivalen kimia enteral yang terdiri daripada anatoksin dan antigen somatik serotaip Inaba dan Ogawa, kerana imuniti silang tidak terbentuk. Walau bagaimanapun, tempoh imuniti selepas vaksinasi adalah tidak lebih daripada 6-8 bulan, jadi vaksinasi dijalankan hanya mengikut petunjuk epidemiologi. Profilaksis antibiotik telah terbukti dengan baik dalam fokus kolera, khususnya tetrasiklin, yang mana kolera vibrio sangat sensitif. Antibiotik lain yang berkesan terhadap V. cholerae boleh digunakan untuk tujuan yang sama.