Virus hepatitis B

Hepatitis B adalah penyakit berjangkit seseorang yang dicirikan oleh kerosakan sel hati oleh selektif oleh virus. Bentuk hepatitis ini adalah yang paling berbahaya akibatnya di kalangan semua bentuk hepatitis virus yang diketahui. Ejen penyebabnya ialah virus hepatitis B (HBV).

Antigen pertama hepatitis B virus telah dikesan B. Blumberg pada tahun 1964 di orang asli Australia serum, dan patogen itu ditemui pada tahun 1970, D. Dane (et al.), Dan menerima nama zarah Dane, kerana tidak ada kepastian bahawa , bahawa ini benar-benar satu virus, bukan komponennya. Selanjutnya, semua keraguan hilang, kerana dalam zarah Dane, DNA genom dan DNA polimerase DNA yang bergantung kepada DNA telah dijumpai. Virion mengandungi tiga antigen utama, yang mana peranan berikut diperkenalkan pada tahun 1974:

• HBsAg adalah antigen yang cetek, atau larut, atau antigen Australia.
• HBcAg adalah antigen teras (co-antigen).
• HBeAg - e antigen, adalah setempat dalam teras virion dan, tidak seperti HBcAg, bukan sahaja di dalam virion, tetapi juga beredar dalam darah dalam bentuk bebas atau sebagai kompleks dengan anti-HBeAg. Ia disembur ke dalam darah dari hepatosit dengan replikasi aktif HBV.

Antigen permukaan - HBsAg - wujud dalam tiga pilihan morfologi yang berbeza: 1) adalah superkapsid seluruh virion; 2) dalam kuantiti yang besar berlaku dalam bentuk zarah dengan diameter 20 nm, mempunyai bentuk sfera; 3) dalam bentuk filamen dengan panjang 230 nm. Secara kimia mereka sama. Komposisi mempunyai sejumlah antigen HBsAg dan dua pasang penentu jenis khusus saling eksklusif: d / y dan w / r, jadi terdapat empat subjenis utama HBsAg (dan dengan itu HBV): adw, adr, ayw dan aur. Antigen a menyediakan pembentukan kekebalan silang umum kepada semua subtipe virus.

Sebenarnya, virion, Dain zarah, mempunyai bentuk sfera dan diameter 42 nm. Supercapsid virion terdiri daripada tiga protein: utama (utama), besar dan sederhana. Genom ini dilampirkan dalam kapsid dan diwakili oleh DNA anulus double-stranded dengan jisim 1.6 MD. DNA terdiri daripada kira-kira 3200 nukleotida, tetapi "tambah" -nana adalah 20-50% lebih pendek daripada tanda tolak. Dengan 5 'akhir filamen panjang, protein spesifik virus terikat secara kovalen. 5 'hujung kedua-dua helai adalah pelengkap dan membentuk "melekit" urutan 300 nukleotida panjang, supaya filamen ditutup di gelanggang. Kandungan G + C dalam DNA virion ialah 48-49 mol%. Di dalam inti virion terdapat DNA polimerase DNA bergantung DNA DNA-virus. The "minus" -define DNA of HBV mengandungi hanya empat gen (S, C, P dan X), tetapi ia dianjurkan dengan sangat ringkas. Gen S, C, P, X sangat bertindih dan mengawal sintesis produk berikut. Kod Gene S untuk sintesis protein kot utama dan mengandungi semua maklumat mengenai antigen permukaan HBsAg. Di samping itu, ia menyusun sintesis prototaip sampingan sederhana dan besar. Protein mengandungi terminal COOH biasa, tetapi terjemahannya bermula dengan tiga kodon pemula yang berbeza. Kod Gene untuk sintesis protein kapsid (HBcAg dan HBeAg); walaupun protein ini dikodkan oleh satu gen, cara terjemahannya berbeza. Gene P adalah yang terbesar. Ia termasuk sebahagian daripada ketiga-tiga gen lain dan mengkodekan enzim yang diperlukan untuk replikasi virus. Khususnya, ia menyusun transkripase terbalik, domain enzim RNA-ase H, protein terminal 5'-"minus" -chain. Kod Gene X untuk protein yang mengawal ungkapan (ungkapan) semua gen virus, khususnya protein dengan massa 17 kD, yang merupakan transactivator transkripsi gen.

Protein yang membentuk antigen permukaan wujud dalam bentuk glikosilat (gp) dan bukan glikosilasi. Glikosilasi adalah gp27, gp33, gp36 dan gp42 (angka-angka yang dilambangkan oleh m dalam kD). Supercapsid HBV terdiri daripada utama, atau asas, S-protein (92%); purata protein M (4%) dan besar, atau panjang, L-protein (1%).

• Protein utama, p24 / gp27, atau protein utama (protein S), adalah komponen utama sampul surat HBV. Dalam ketiadaan protein shell lain, polimerisasi dan membentuk zarah sfera dengan diameter 20 nm, yang terdiri daripada 100 molekul polipeptida.
• Protein besar, p39 / gp42, atau protein panjang (protein L), terdapat dalam ketiga-tiga bentuk HBsAg. Ia memainkan peranan penting dalam morfogenesis virion dan keluar dari sel. Protein L mengandungi urutan protein M yang dilengkapkan pada N-terminus dengan urutan 108 (ayw) atau 119 (adw, adr, ayr) daripada residu asid amino yang dikodkan oleh rantau npe-Sl daripada gen S.
• Protein tengah - gp33 / gp36, atau protein M, juga terdapat dalam ketiga-tiga bentuk morfologi HBsAg. Protein M mengandungi, di N-terminus, rantau 55 residu asid amino yang dikodkan oleh rantau pra-52 gen S. Dianggap bahawa laman web ini memainkan peranan penting dalam mengiktiraf virus hepatitis B oleh sel-sel hati dari pelbagai tuan rumah yang terhad (manusia, monyet simpanse). Urutan protein yang dikodkan oleh kawasan S-gen npe-S mempunyai imunogenisiti tinggi, dan penentu mereka terletak pada permukaan virion. Oleh itu, antibodi terhadap antigen ini memainkan peranan penting dalam pembentukan imuniti terhadap hepatitis B.

Sintesis protein virus dikawal ketat pada tahap transkripsi dan terjemahan. Dalam transkripsi genom virus, dua jenis mRNA disintesis:

• lebih kecil - 2100 nukleotida - menyusun protein utama dan tengah membran;
• besar - 3,500 nukleotida, iaitu lebih panjang daripada DNA genomik itu sendiri; ia mengandungi pengulangan terminal sebanyak 100 nukleotida panjang.

Ini jenis mRNA meniru protein kapsid dan produk gen P. Ia juga merupakan template untuk replikasi DNA virus. Sebagai sebahagian daripada genom, terdapat penambah (penekanan transkripsi) - unsur pengawalseliaan yang mengaktifkan ungkapan semua gen virus dan bertindak terutamanya dalam sel-sel hati. Khususnya, gen S dinyatakan pada tahap yang sangat tinggi hanya dalam sel-sel hati dan di bawah pengaruh hormon steroid. Keadaan ini menerangkan mengapa hepatitis B kronik dan kanser hati (hepatoma) diperhatikan pada lelaki lebih kerap berbanding pada wanita yang mempunyai tahap hormon steroid yang lebih rendah.

Unsur pengawalseliaan lain virus hepatitis B memodulasi (mengawal) tahap sintesis protein individu. Sebagai contoh, protein besar disintesis hanya dalam jumlah yang kecil. Kebanyakannya pada permukaan virion berjangkit. Dan protein utama dan, pada tahap yang lebih rendah, protein tengah disintesis dalam kuantiti yang banyak dan meninggalkan sel-sel di zarah antigen permukaan, yang dalam serum mengandungi banyak kali lebih banyak daripada virion dewasa. Bilangan zarah antigen permukaan boleh 1011 -1013 setiap 1 ml darah (beberapa ratus μg).

Virus Hepatitis B diasingkan dalam keluarga baru virus - Hepadnaviridae, genus Orthohepadnavirus. Hepadnaviruses yang sama didapati dalam pelbagai haiwan (protein bumi, marmot, chipmunks, itik Peking).

Pengeluaran semula hepadnavirus berlaku dengan cara yang luar biasa. Secara khususnya, replikasi DNA genomik berlaku melalui pautan perantaraan - RNA, iaitu, dengan mekanisme transkripsi terbalik.

Kitaran hidup virus hepatitis B.

• Penjerapan pada sel.
• Penembusan ke dalam sel melalui mekanisme reseptor-pengantara endocytosis (pit bersempadan -> vial bersempadan -> lysosome -> keluar nucleocapsid dan kemasukan genom virus ke dalam nukleus hepatocyte itu).
• Pembiakan intraselular.

Semasa penembusan ke dalam sel, rantai DNA pendek ("tambah") memanjang (selesai). Sel teras DNA yang bergantung kepada RNA polymerase mensintesis saiz RNA 3500 nukleotida (pregenom) mRNA dan lebih kecil, untuk sintesis protein virus. Kemudian pregenom dan polymerase DNA virus dibungkus ke dalam capsid yang baru disintesis, yang dijalankan dalam sitoplasma. Di sini, transkripsi belakang pregenoma berlaku. Ia mensintesis DNA yang "tolak" baru. Setelah sintesis DNA minus selesai, RNA pregenomic akan musnah. Polimerase DNA virion pada rantaian "tolak" mensintesiskan "tambah" - rantai. DNA virus kini dua terkandas, boleh wujud dalam sel untuk masa yang lama dan untuk kembali kepada teras untuk kitaran replikasi seterusnya. Jika zarah virus baru tidak tertakluk kepada replikasi lanjut, nucleocapsid yang terbentuk dengan melalui membran sel, ditutup superkapsidom, bud dari sel, dan ia akan segera berhenti sambungan jauh daripada "plus" -chain DNA. Itulah sebabnya panjang benang ini berbeza-beza. Dalam bentuk akut tipikal hepatitis B serologi penanda berikut berurutan muncul dalam darah: HBsAg, HBeAg dan antibodi (IgM, IgG): anti-HBcAg. Anti-HBeAg dan anti-HBsAg.

Komposisi hepatitis B virus mempunyai onkogen, tetapi mendapati bahawa, menembusi ke dalam kromosom selular (dalam seksyen yang berbeza), DNA virus boleh disebabkan di dalamnya pelarasan berbeza genetik - penghapusan, translokasi, penguatan, yang boleh menyebabkan perkembangan kanser hati - satu akibat yang paling serius terhadap hepatitis B. Virus

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8],

Rintangan virus hepatitis B

Virus hepatitis B sangat tahan. Pada suhu bilik ia tetap berdaya maju selama 3 bulan, dalam keadaan beku - selama beberapa tahun. Virus ini benar-benar tidak aktif oleh autoklaf (120 ° C) di refluks selama 30 min, dengan haba kering pada suhu 180 "C selama 60 minit, pada 60 ° C -. Untuk 10 jam tahan dalam medium asid, tetapi musnah dalam alkali. Virus ini mati apabila dirawat dengan H202, chloramine, formalin, phenol dan dengan penyinaran UV.

Patogenesis dan gejala hepatitis B

Virus ini disuntik secara langsung ke hati. Dalam patogenesis hepatitis, tindak balas humoral dan selular autoimun memainkan peranan penting. Ia adalah dianggap bahawa kerugian hepatocyte kerana tidak begitu banyak untuk tindakan langsung virus itu sendiri, tetapi dengan tuan rumah tindak balas imunologi yang berlaku yang berkaitan dengan pengubahsuaian membran sel protein virus yang mendorong kemunculan autoantibodies untuk sel-sel hati. Oleh itu, mengembangkan hepatitis kronik dan sirosis hati boleh dianggap sebagai penyakit autoimun.

Reaksi autoimun selular terhadap protein virus yang terkandung dalam membran hepatosit ditengahi oleh limfosit T-sitotoksik dan sel-sel pembunuh hepatik lain. Oleh itu, distrofi akut hati boleh dianggap sebagai tindak balas penolakan heterograft yang pelik.

Tempoh inkubasi berlangsung dari 45 hingga 180 hari, purata 60 hingga 90 hari. Kursus klinikal hepatitis B dicirikan oleh kepelbagaian yang besar; Penyakit ini boleh berlaku: dalam bentuk laten, dikesan hanya oleh kaedah makmal, dalam bentuk yang biasa dan dalam bentuk malignan yang berakhir dengan maut. Tempoh peringkat awal jerawat adalah dari satu hari hingga beberapa minggu. Tempoh Icteric biasanya panjang dan dicirikan oleh gejala-gejala yang jelas (penyakit kuning, hiperbilirubinemia, air kencing gelap, penyakit kuning sclera). Bentuk berlarutan diperhatikan dalam 15-20% daripada pesakit dan 90% daripada mereka membangunkan hepatitis kronik B. Pesakit dengan bentuk kronik sering diperhatikan proses autoimun disertai dengan kandungan yang tinggi antibodi protivopechenochnyh yang dikesan oleh enzim berkaitan imunoserapan asai (IPM). Pada kanak-kanak, hepatitis B adalah ringan dan selalunya tanpa jaundis, pada anak-anak kecil - kebanyakannya asimtomatik.

Imuniti postinfectious (humoral dan selular) panjang, sepanjang hayat, disebabkan virus meneutralkan antibodi (anti-HBsAg) tanpa ketahanan antigen permukaan dalam darah. Selalunya imunisasi terpendam akibat kontak berulang dengan HBV, yang merupakan punca imuniti yang meluas kepada virus di kalangan penduduk. Biasanya pesakit dengan hepatitis B akut pulih sepenuhnya apabila antibodi terkumpul. Walau bagaimanapun, dalam beberapa kes, walaupun tahap antigen virus yang tinggi dalam darah (keadaan menjelaskan mengapa jangkitan parenteral paling kerap berlaku), antibodi yang tidak dihasilkan. Virus itu tetap di dalam hati, dan seseorang untuk masa yang lama, kadang-kadang untuk hidup, menjadi pembawa kronik. Keadaan ini jelas berkaitan dengan tindak balas imun yang lemah. Salah satu hasil yang paling biasa hepatitis B kronik adalah sirosis dan kanser hati, yang berkembang selepas tempoh terpendam sehingga 30-50 tahun.

Epidemiologi hepatitis B

Sumber jangkitan dengan virus hepatitis B hanyalah seseorang. Bertentangan dengan perwakilan sebelumnya yang dijangkiti hepatitis B virus berlaku secara eksklusif melalui laluan parenteral, kini terbukti bahawa ia dijumpai dalam pelbagai rembesan dan kumuhan :. Air liur, rembesan nasofarinks, najis, cecair lacrimal, air mani, darah haid, dan lain-lain Oleh itu, jangkitan berlaku bukan sahaja melalui laluan parenteral, tetapi juga seksual dan menegak (daripada ibu kepada janin), t. E. Hampir jangkitan hepatitis B virus boleh menyeronokkan dan menarik.

Hepatitis B di dunia membunuh ramai orang sepanjang tahun Perang Dunia II. Bilangan pembawa HBV, mengikut WHO, adalah dari 0.1 hingga 20% daripada populasi negara atau rantau yang berlainan.

[9], [10], [11], [12], [13], [14], [15], [16],

Diagnosis hepatitis B

Pada masa ini, kaedah utama untuk mendiagnosis hepatitis B ialah penggunaan tindak balas hemagglutination pasif (ROSGA) yang pas untuk mengesan virus atau antigen permukaannya, HBsAg. Seperti yang telah dinyatakan, darah antigen permukaan mengandungi banyak kali lebih banyak daripada virus itu sendiri (100-1000 kali). Untuk reaksi ROPGA, erythrocyte sensitif dengan antibodi terhadap virus hepatitis B. Sekiranya terdapat antigen dalam darah, tindak balas hemagglutinasi berlaku. ROPGA adalah mudah, mudah, sangat spesifik. Untuk mengesan antibodi kepada antigen virus HBsAg, pelbagai kaedah imunologi (DSC, RPGA, IFM, RIM, dll) digunakan. Di samping itu, varian PCR digunakan untuk mengesan HBV dan antigennya.

Kaedah imunologi pelbagai boleh digunakan untuk mengesan antibodi antigen virus (HBsAg) dalam serum pesakit (DSC, RPGA, reaksi hujan, IFM, RIM, dll).

[17], [18], [19], [20], [21], [22],

Pencegahan spesifik hepatitis B

Memandangkan kejadian hepatitis B yang tinggi, dan juga terdapat banyak pembawa HBV di dunia, vaksin WHO terhadap hepatitis B adalah wajib dan mesti dilakukan dalam tahun pertama kehidupan. Dua jenis vaksin yang dicadangkan untuk vaksinasi. Untuk menyediakan salah satu daripada mereka, plasma pembawa virus digunakan sebagai bahan mentah, kerana antigen virus di dalamnya terkandung dalam kuantitas yang mencukupi untuk menyediakan vaksin. Keadaan utama penyediaan vaksin jenis ini adalah keselamatan lengkapnya, iaitu penyisihan virus yang lengkap, yang disediakan oleh teknologi penyediaan vaksin. Untuk menghasilkan vaksin jenis yang berbeza, kaedah kejuruteraan genetik digunakan, khususnya, klon recombinant yis yang menghasilkan antigen permukaan virus hepatitis B digunakan untuk menyediakan bahan antigen.

Kedua-dua vaksin ini sangat berkesan (melindungi 95% daripada vaksin). Tempoh imuniti postvaccinal tidak kurang daripada 5-6 tahun. Vaksin telah dicipta untuk orang dewasa dan bayi dan kanak-kanak - komponen terpenting dalam perjuangan global terhadap hepatitis B. Kursus penuh suntikan terdiri daripada tiga suntikan:

Saya dos - sebaik selepas lahir; Dos II - selepas 1-2 bulan; Dos III - sehingga hujung tahun pertama kehidupan.

Vaksin-vaksin ini dimasukkan dalam program ini diperluaskan imunisasi, WHO dan sejajar dengan kalendar pelaksanaannya (mengikut saranan WHO pada tahun 1 kehidupan dijalankan vaksinasi terhadap batuk kering, polio, hepatitis B, campak, tetanus, difteria, pertussis).

Gammaglobulin, yang mengandungi antibodi terhadap HBV, digunakan untuk imunoprofaksis pasif kecemasan kepada orang yang mempunyai hubungan dengan pesakit hepatitis B.

Untuk merawat hepatitis B (bentuk akut dan kronik) menggunakan interferon dan amixin (untuk induksi sintesis endogennya). Dalam rawatan hepatitis B kronik, ubat baru lamivudine (sintetik nukleosida) adalah berkesan.