Virus hepatitis B

Hepatitis B adalah penyakit berjangkit pada manusia yang dicirikan oleh kerosakan selektif pada hati oleh virus. Bentuk hepatitis ini adalah yang paling berbahaya akibatnya di kalangan semua bentuk hepatitis virus yang diketahui. Ejen penyebabnya ialah virus hepatitis B (HBV).

Antigen virus hepatitis B pertama kali ditemui oleh B. Blumberg pada tahun 1964 dalam serum darah orang asli Australia, dan patogen itu sendiri ditemui pada tahun 1970 oleh D. Dane (et al.) dan dipanggil zarah Dane, kerana tidak ada kepastian lengkap bahawa ia benar-benar virus dan bukan komponennya. Selepas itu, semua keraguan hilang, kerana DNA genomik dan polimerase DNA yang bergantung kepada DNA virus ditemui dalam komposisi zarah Denmark. Virion mengandungi tiga antigen utama, yang mana sebutan berikut diperkenalkan pada tahun 1974:

• HBsAg - dangkal, atau larut, atau antigen Australia.
• HBcAg - antigen teras (cor-antigen).
• HBeAg ialah antigen e yang disetempatkan dalam teras virion dan, tidak seperti HBcAg, bukan sahaja terdapat dalam virion tetapi juga beredar dalam darah dalam bentuk bebas atau sebagai kompleks dengan antibodi anti-HBeAg. Ia dilepaskan ke dalam darah daripada hepatosit semasa replikasi HBV aktif.

Antigen permukaan, HBsAg, wujud dalam tiga varian morfologi yang berbeza: 1) ialah superkapsid bagi keseluruhan virion; 2) didapati dalam kuantiti yang banyak dalam bentuk zarah sfera dengan diameter 20 nm; 3) dalam bentuk benang sepanjang 230 nm. Mereka adalah sama secara kimia. HBsAg mengandungi satu antigen biasa, a, dan dua pasang penentu khusus jenis yang saling eksklusif: d/y dan w/r, itulah sebabnya terdapat empat subtipe utama HBsAg (dan, sewajarnya, HBV): adw, adr, ayw dan ayr. Antigen a memastikan pembentukan imuniti silang umum kepada semua subtipe virus.

Virion itu sendiri, zarah Denmark, adalah sfera dan diameter 42 nm. Superkapsid virion terdiri daripada tiga protein: yang utama (asas), besar, dan sederhana. Genom itu disertakan dalam kapsid dan diwakili oleh DNA pekeliling beruntai dua dengan berat molekul 1.6 MD. DNA terdiri daripada kira-kira 3200 nukleotida, tetapi helai "tambah"nya adalah 20-50% lebih pendek daripada helai "tolak". Protein khusus virus dikaitkan secara kovalen pada hujung 5' untaian panjang. Hujung 5' kedua-dua helai adalah pelengkap dan membentuk jujukan "melekit" sepanjang 300 nukleotida, kerana itu helai rapat ke dalam gelang. Kandungan G + C dalam DNA virion ialah 48-49 mol %. Dalam teras virion, sebagai tambahan kepada DNA genomik, terdapat polimerase DNA yang bergantung kepada DNA virus. Untaian tolak DNA HBV mengandungi hanya empat gen (S, C, P, dan X), tetapi ia disusun dengan sangat padat. Gen S, C, P dan X bertindih dengan ketara dan mengawal sintesis produk berikut. Gen S mengekodkan sintesis protein sampul utama dan mengandungi semua maklumat tentang antigen permukaan HBsAg. Di samping itu, ia mengekodkan sintesis protein sampul tengah dan besar. Protein mengandungi hujung COOH biasa, tetapi terjemahannya bermula dengan tiga kodon pemula yang berbeza. Gen C menyandikan sintesis protein kapsid (HBcAg dan HBeAg); walaupun protein ini dikodkan oleh gen tunggal, laluan terjemahannya berbeza. Gen P adalah yang terbesar. Ia termasuk sebahagian daripada ketiga-tiga gen lain dan mengekod enzim yang diperlukan untuk replikasi virus. Khususnya, ia mengekodkan transkripase terbalik, domain enzim RNase H, dan protein terminal 5' bagi helai tolak. Gen X mengekod protein yang mengawal ekspresi semua gen virus, khususnya protein 17 kD yang merupakan transaktivator transkripsi gen.

Protein yang membentuk antigen permukaan wujud dalam bentuk glikosilasi (gp) dan tidak glikosilasi. Glikosilasi ialah gp27, gp33, gp36, dan gp42 (nombor menunjukkan mw dalam kDa). Superkapsid HBV terdiri daripada utama, atau teras, protein S (92%); bahagian tengah, protein M (4%), dan protein L yang besar, atau panjang (1%).

• Protein utama, p24/gp27, atau protein teras (protein S), ialah komponen utama sampul HBV. Dengan ketiadaan protein sampul lain, ia berpolimer untuk membentuk zarah sfera berdiameter 20-nm yang terdiri daripada 100 molekul polipeptida.
• Protein besar, p39/gp42, atau protein panjang (protein L), terdapat dalam ketiga-tiga bentuk HBsAg. Ia memainkan peranan penting dalam morfogenesis virion dan dalam keluarnya dari sel. Protein L mengandungi urutan protein M, yang ditambah pada terminal-N dengan urutan 108 (ayw) atau 119 (adw, adr, ayr) sisa asid amino yang dikodkan oleh rantau npe-Sl gen S.
• Protein tengah, gp33/gp36, atau protein M, juga terdapat dalam ketiga-tiga bentuk morfologi HBsAg. Protein M mengandungi pada terminal-Nnya kawasan 55 sisa asid amino yang dikodkan oleh rantau pra-52 gen S. Diandaikan bahawa rantau ini memainkan peranan penting dalam pengiktirafan sel hati bagi julat terhad perumah (manusia, monyet, dan cimpanzi) oleh virus hepatitis B. Urutan protein yang dikodkan oleh kawasan npe-S gen S adalah sangat imunogenik, dan penentunya terletak pada permukaan virion. Oleh itu, antibodi terhadap antigen ini memainkan peranan penting dalam pembentukan imuniti terhadap hepatitis B.

Sintesis protein virus dikawal ketat pada tahap transkripsi dan terjemahan. Semasa transkripsi genom virus, dua jenis mRNA disintesis:

• yang lebih kecil - 2100 nukleotida - mengekod protein utama dan tengah membran;
• besar - 3500 nukleotida, iaitu lebih panjang daripada DNA genom itu sendiri; ia mengandungi terminal ulangan 100 nukleotida panjang.

Kod mRNA jenis ini untuk protein kapsid dan produk gen P. Ia juga merupakan matriks untuk replikasi DNA virus. Genom mengandungi penambah (penguat transkripsi) - elemen pengawalseliaan yang mengaktifkan ekspresi semua gen virus dan bertindak terutamanya dalam sel hati. Khususnya, gen S dinyatakan pada tahap yang sangat tinggi hanya dalam sel hati dan di bawah pengaruh hormon steroid. Keadaan ini menjelaskan mengapa hepatitis B kronik dan kanser hati (hepatoma) diperhatikan pada lelaki lebih kerap berbanding wanita, yang tahap hormon steroidnya lebih rendah.

Unsur pengawalseliaan lain virus hepatitis B memodulasi (mengawal) tahap sintesis protein individu. Sebagai contoh, protein yang besar disintesis hanya dalam kuantiti yang kecil. Kebanyakannya berada di permukaan virion berjangkit. Tetapi protein utama dan, pada tahap yang lebih rendah, protein tengah disintesis dalam kuantiti yang banyak dan meninggalkan sel sebagai sebahagian daripada zarah antigen permukaan, yang berkali ganda lebih banyak dalam serum darah daripada virion matang. Bilangan zarah antigen permukaan boleh menjadi 1011 -1013 setiap 1 ml darah (beberapa ratus μg).

Virus hepatitis B telah diasingkan ke dalam keluarga virus baru - Hepadnaviridae, genus Orthohepadnavirus. Hepadnavirus yang serupa telah ditemui dalam pelbagai haiwan (tupai tanah, marmot, chipmunks, itik Peking).

Hepadnavirus membiak dengan cara yang agak luar biasa. Khususnya, replikasi DNA genomik berlaku melalui pautan perantaraan - RNA, iaitu dengan mekanisme transkripsi terbalik.

Kitaran hayat virus hepatitis B.

• Penjerapan pada sel.
• Penembusan ke dalam sel melalui mekanisme endositosis pengantara reseptor (lubang bersalut -> vesikel bersalut -> lisosom -> pembebasan nukleokapsid dan penembusan genom virus ke dalam nukleus hepatosit).
• Pembiakan intrasel.

Semasa penembusan ke dalam sel, rantai DNA pendek ("tambah") dipanjangkan (selesai). Dalam nukleus, polimerase RNA yang bergantung kepada DNA selular mensintesis RNA daripada 3500 nukleotida (pregenom) dan mRNA, yang bersaiz lebih kecil, untuk sintesis protein virus. Kemudian pregenom dan polimerase DNA virus dibungkus ke dalam kapsid yang baru disintesis, yang dipindahkan ke sitoplasma. Di sini, transkripsi terbalik pregenom berlaku. Satu helai DNA "tolak" baharu disintesis padanya. Selepas sintesis helai DNA "tolak" selesai, RNA pregenomik dimusnahkan. Polimerase DNA Virion mensintesis helai "tambah" pada helai "tolak". DNA virus, kini beruntai dua, boleh wujud dalam sel untuk jangka masa yang agak lama dan kembali ke nukleus untuk kitaran replikasi seterusnya. Jika zarah virus baru tidak menjalani replikasi selanjutnya, maka nukleokapsid yang terbentuk, melalui membran sel, diliputi oleh superkapsid, tunas keluar dari sel, dan pemanjangan rantai DNA "tambah" pendek serta-merta berhenti. Itulah sebabnya panjang benang ini berbeza-beza. Dalam bentuk hepatitis B akut biasa, penanda serologi berikut muncul dalam darah secara berurutan: HBsAg, HBeAg dan antibodi (IgM, IgG): anti-HBcAg. anti-HBeAg dan anti-HBsAg.

Virus hepatitis B tidak mengandungi onkogen, tetapi telah ditetapkan bahawa, apabila dimasukkan ke dalam kromosom sel (ke bahagian yang berlainan), DNA virus boleh mendorong pelbagai penyusunan semula genetik di dalamnya - penghapusan, translokasi, amplifikasi, yang boleh menyebabkan perkembangan kanser hati - salah satu akibat paling teruk hepatitis B virus.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ]

Rintangan virus Hepatitis B

Virus hepatitis B sangat tahan. Ia kekal berdaya maju selama 3 bulan pada suhu bilik dan selama beberapa tahun apabila beku. Virus ini tidak aktif sepenuhnya dengan autoklaf (120 °C), mendidih selama 30 minit, haba kering pada 180 °C selama 60 minit, dan pada 60 °C selama 10 jam. Ia tahan dalam persekitaran berasid, tetapi dimusnahkan dalam persekitaran alkali. Virus ini mati apabila dirawat dengan H2O2, chloramine, formalin, fenol, dan penyinaran UV.

Patogenesis dan gejala hepatitis B

Virus ini dibawa terus ke hati melalui laluan hematogen. Reaksi humoral dan selular autoimun memainkan peranan penting dalam patogenesis hepatitis. Diandaikan bahawa kerosakan pada hepatosit dikaitkan tidak begitu banyak dengan tindakan langsung virus itu sendiri, tetapi dengan tindak balas imunologi tuan rumah, yang timbul berkaitan dengan pengubahsuaian membran sel oleh protein virus, yang mendorong penampilan autoantibodi ke sel hati. Oleh itu, mengembangkan hepatitis kronik dan sirosis hati boleh dianggap sebagai penyakit autoimun.

Reaksi autoimun selular terhadap protein virus yang terkandung dalam membran hepatosit dimediasi oleh limfosit T-sitotoksik dan sel pembunuh hati yang lain. Oleh itu, distrofi hati akut boleh dianggap sebagai tindak balas penolakan sejenis heterotransplant.

Tempoh inkubasi berlangsung dari 45 hingga 180 hari, secara purata adalah 60-90 hari. Kursus klinikal hepatitis B dicirikan oleh kepelbagaian yang besar; penyakit ini boleh diteruskan: dalam bentuk terpendam, hanya dikesan oleh kaedah makmal, dalam bentuk ikterik biasa dan dalam bentuk malignan, berakhir dengan kematian. Tempoh peringkat pra-ikterik adalah dari satu hari hingga beberapa minggu. Tempoh icterik, sebagai peraturan, panjang dan dicirikan oleh gejala yang jelas (penyakit kuning, hiperbilirubinemia, kegelapan air kencing, kekuningan sklera). Bentuk berlarutan diperhatikan dalam 15-20% pesakit, dan 90% daripada mereka mengalami hepatitis B kronik. Pesakit dengan bentuk berlarutan sering mengalami proses autoimun, disertai dengan peningkatan kandungan antibodi antihepatik, yang dikesan menggunakan ujian imunosorben (IFM). Pada kanak-kanak, hepatitis B berlangsung dalam bentuk yang lebih ringan dan selalunya tanpa perkembangan jaundis, pada kanak-kanak yang lebih muda - kebanyakannya tanpa gejala.

Kekebalan selepas berjangkit (humoral dan selular) adalah tahan lama, sepanjang hayat, dan disebabkan oleh antibodi peneutral virus (anti-HBsAg) tanpa ketiadaan antigen permukaan dalam darah. Imunisasi terpendam sering diperhatikan kerana hubungan berulang dengan HBV, yang merupakan sebab untuk imuniti yang meluas terhadap virus di kalangan penduduk. Biasanya, pesakit dengan hepatitis B akut pulih sepenuhnya apabila antibodi terhadapnya terkumpul. Walau bagaimanapun, dalam beberapa kes, walaupun tahap antigen virus yang tinggi dalam darah (keadaan yang menjelaskan mengapa jangkitan parenteral berlaku paling kerap), antibodi terhadapnya tidak dihasilkan. Virus ini kekal di dalam hati, dan seseorang menjadi pembawa kronik untuk masa yang lama, kadang-kadang seumur hidup. Keadaan ini jelas dikaitkan dengan tindak balas imun yang lemah. Salah satu hasil paling biasa hepatitis B kronik ialah sirosis hati dan kanser hati, yang berkembang selepas tempoh terpendam sehingga 30-50 tahun.

Epidemiologi hepatitis B

Sumber jangkitan virus hepatitis B hanyalah manusia. Bertentangan dengan idea-idea sebelumnya bahawa jangkitan virus hepatitis B berlaku secara eksklusif secara parenteral, kini telah terbukti bahawa ia didapati dalam pelbagai rembesan dan perkumuhan: dalam air liur, rembesan nasofaring, najis, cecair pemedih mata, dalam sperma, darah haid, dan lain-lain. Oleh itu, jangkitan berlaku bukan sahaja secara parenteral, tetapi juga secara seksual dan menegak (dari ibu kepada jangkitan virus hepatitis B yang mungkin), dengan cara yang berbeza dari hepatitis B.

Hepatitis B telah membunuh seramai orang di seluruh dunia berbanding sepanjang tahun Perang Dunia II. Menurut WHO, bilangan pembawa HBV adalah antara 0.1 hingga 20% daripada populasi negara atau wilayah yang berbeza.

[ 9 ], [ 10 ], [ 11 ], [ 12 ], [ 13 ], [ 14 ], [ 15 ], [ 16 ]

Diagnosis hepatitis B

Pada masa ini, kaedah utama untuk mendiagnosis hepatitis B ialah penggunaan ujian hemagglutinasi pasif terbalik (RPHA) untuk mengesan virus atau antigen permukaannya, HBsAg. Seperti yang telah dinyatakan, darah mengandungi lebih banyak antigen permukaan daripada virus itu sendiri (100-1000 kali). Untuk tindak balas RPAHA, eritrosit yang dipekakan dengan antibodi terhadap virus hepatitis B digunakan. Sekiranya antigen terdapat dalam darah, tindak balas hemaglutinasi berlaku. RPAHA adalah ringkas, mudah dan sangat khusus. Pelbagai kaedah imunologi (RSK, RPHA, IFM, RIM, dll.) digunakan untuk mengesan antibodi kepada antigen virus HBsAg. Selain itu, varian PCR digunakan untuk mengesan HBV dan antigennya.

Untuk mengesan antibodi kepada antigen virus (HBsAg) dalam serum pesakit, pelbagai kaedah imunologi boleh digunakan (CSC, RPGA, tindak balas pemendakan, IFM, RIM, dll.).

[ 17 ], [ 18 ], [ 19 ], [ 20 ], [ 21 ], [ 22 ]

Profilaksis khusus hepatitis B

Dengan mengambil kira insiden hepatitis B yang tinggi, serta fakta bahawa terdapat banyak pembawa HBV di dunia, WHO mengesyorkan bahawa vaksinasi hepatitis B adalah wajib dan harus diberikan pada tahun pertama kehidupan. Dua jenis vaksin dicadangkan untuk vaksinasi. Untuk menyediakan salah satu daripadanya, plasma pembawa virus digunakan sebagai bahan mentah, kerana ia mengandungi antigen virus dalam kuantiti yang mencukupi untuk menyediakan vaksin. Syarat utama untuk menyediakan jenis vaksin ini adalah keselamatannya yang lengkap, iaitu penyahaktifan lengkap virus, yang disediakan oleh teknologi penyediaan vaksin. Untuk menyediakan satu lagi jenis vaksin, kaedah kejuruteraan genetik digunakan, khususnya, klon rekombinan yis yang menghasilkan antigen permukaan virus hepatitis B digunakan untuk mendapatkan bahan antigen.

Kedua-dua vaksin adalah sangat berkesan (melindungi 95% daripada mereka yang divaksinasi). Tempoh imuniti selepas vaksinasi adalah sekurang-kurangnya 5-6 tahun. Vaksin telah dicipta untuk orang dewasa, bayi baru lahir dan kanak-kanak kecil - komponen terpenting dalam memerangi hepatitis B di seluruh dunia. Kursus vaksinasi penuh terdiri daripada tiga suntikan:

Saya dos - sejurus selepas kelahiran; Dos II - selepas 1-2 bulan; III dos - sehingga akhir tahun pertama kehidupan.

Vaksinasi ini termasuk dalam program imunisasi yang diperluaskan WHO dan digabungkan dengan kalendar pelaksanaannya (mengikut cadangan WHO, vaksinasi terhadap batuk kering, poliomielitis, hepatitis B, campak, tetanus, difteria, dan batuk kokol diberikan pada tahun pertama kehidupan).

Gammaglobulin yang mengandungi antibodi terhadap HBV digunakan untuk imunoprofilaksis pasif kecemasan bagi individu yang pernah bersentuhan dengan pesakit dengan hepatitis B.

Interferon dan amixin (untuk mendorong sintesis endogennya) digunakan untuk merawat hepatitis B (bentuk akut dan kronik). Ubat baru lamivudine (nukleosida sintetik) berkesan dalam merawat hepatitis B kronik.