Mononukleosis berjangkit: antibodi kepada virus Epstein-Barr dalam darah

Mononukleosis berjangkit adalah gangguan limfoproliferatif sistemik biasa yang paling kerap disebabkan oleh virus Epstein-Barr. Toxoplasma gondii dan virus lain (CMV, virus immunodeficiency manusia, dan virus herpes manusia jenis 6, yang diiktiraf sebagai punca exanthema mengejut) boleh menyebabkan penyakit klinikal yang serupa. Ejen etiologi yang sama ini mungkin menyebabkan perkembangan sindrom keletihan kronik.

Virus Epstein-Barr ialah virus herpes yang mempunyai tropisme untuk B-limfosit dan berterusan dalam sel perumah untuk masa yang lama sebagai jangkitan terpendam. Ia tersebar luas di seluruh dunia. Dalam struktur dan saiz, virus Epstein-Barr tidak dapat dibezakan daripada virus herpes lain, tetapi berbeza dengan ketara daripada mereka dalam sifat antigen. Virus ini mempunyai antigen membran (MA - antigen membran), antigen nuklear (EBNA - antigen nukleik Epstein-Barris) dan antigen kapsid virus (VCA - antigen kapsid virus).

Jangkitan berlaku apabila virus disebarkan dengan air liur. Apabila virus Epstein-Barr memasuki badan, ia menjangkiti epitelium pharyngeal, menyebabkan keradangan dan demam - tanda klinikal tipikal permulaan mononukleosis berjangkit. Virus ini adalah limfotropik yang ketat, melekat pada reseptor C3α membran sel B-limfosit, ia menyebabkan percambahan limfosit B poliklonal dengan peningkatan yang sepadan dalam tonsil, limfadenopati sistemik dan splenomegali. Limfosit B berubah (memperoleh keupayaan untuk membahagi tanpa henti), dan jika tiada tindak balas imun selular yang mencukupi, proses ini boleh berkembang menjadi yang jelas malignan (contohnya, dalam sindrom limfoproliferatif berkaitan X). Jika faktor imuniti selular mengawal replikasi virus Epstein-Barr dalam badan, gejala klinikal mononukleosis berjangkit akan hilang secara beransur-ansur.

Seperti herpesvirus lain, EBV boleh berterusan sebagai jangkitan terpendam (DNAnya terkandung dalam nukleus sebilangan kecil limfosit B). Pengaktifan semula jangkitan sekali-sekala tanpa gejala adalah perkara biasa, dengan kira-kira 20% orang dewasa muda yang sihat mengeluarkan EBV dalam air liur mereka. Individu yang mempunyai imuniti selular terjejas (cth, AIDS, ataxia-telangiectasia, penerima pemindahan) mungkin mengalami jangkitan reaktif terang-terangan dengan leukoplakia berbulu, pneumonitis interstisial atau limfoma sel B monoklonal. EBV telah terlibat dalam etiologi karsinoma nasofaring dan limfoma Burkitt.

Salah satu manifestasi mononukleosis berjangkit ialah penampilan limfosit atipikal dalam darah periferi (sehingga 10% daripada jumlah limfosit). Limfosit atipikal dikesan dalam darah dari awal tempoh manifestasi klinikal jangkitan. Kandungan mereka dalam darah mencapai puncak pada akhir ke-2 atau awal minggu ke-3 dan boleh kekal pada tahap ini sehingga 1.5-2 bulan, kehilangan lengkap biasanya berlaku pada awal bulan ke-4 dari permulaan penyakit. Kehadiran limfosit atipikal adalah tanda jangkitan yang agak tidak sensitif yang disebabkan oleh virus Epstein-Barr, tetapi mempunyai kekhususan umum kira-kira 95%.

Pembiakan limfosit B poliklonal dalam jangkitan yang disebabkan oleh virus Epstein-Barr menjana sejumlah besar pelbagai autoantibodi dalam badan pesakit, seperti IgM anti-i (aglutinin sejuk), faktor rheumatoid, antibodi antinuklear. Kebanyakan Ig luar biasa yang muncul dalam mononukleosis berjangkit dipanggil antibodi heterofil Paul-Bunnell. Antibodi ini tergolong dalam kelas IgM, ia mempunyai pertalian dengan eritrosit biri-biri dan kuda, dan tidak ditujukan kepada mana-mana antigen virus Epstein-Barr. Antibodi heterophile adalah produk rawak percambahan B-limfoid (disebabkan oleh virus Epstein-Barr), ia muncul pada minggu pertama mononukleosis berjangkit dan beransur-ansur hilang semasa pemulihan, mereka biasanya tidak dikesan selepas 3-6 bulan.

Apabila peringkat awal jangkitan akut menjadi terpendam, genom virus Epstein-Barr (antigen unik) muncul dalam kuantiti yang banyak dalam semua sel, dan antigen nuklear dilepaskan ke persekitaran. Sebagai tindak balas kepada antigen, antibodi khusus disintesis - penanda berharga peringkat penyakit. Tidak lama selepas jangkitan, B-limfosit mengesan antigen awal (EA), protein yang diperlukan untuk replikasi virus Epstein-Barr (dan bukan komponen virus struktur). Antibodi kelas IgM dan IgG disintesis dalam badan pesakit kepada antigen awal. Bersama-sama dengan virion virus Epstein-Barr yang lengkap, antigen kapsid virus (VCA) dan antigen membran (MA) muncul. Apabila proses berjangkit berkurangan, peratusan kecil B-limfosit yang dijangkiti virus Epstein-Barr mengelakkan kemusnahan imun dan mengekalkan genom virus dalam bentuk terpendam. Antigen nuklear virus Epstein-Barr (EBNA) bertanggungjawab untuk pertindihan dan kemandiriannya.

Ujian makmal boleh mengesan antibodi kepada pelbagai antigen.

Daripada kaedah serologi untuk mendiagnosis mononukleosis berjangkit, yang paling biasa ialah tindak balas Paul-Bunnell (aglutinasi), bertujuan untuk mengenal pasti antibodi heterofilik dalam serum. Titer antibodi heterofilik 1:224 atau lebih tinggi dalam serum darah pesakit diiktiraf sebagai penting secara diagnostik, mengesahkan diagnosis mononukleosis berjangkit. Aglutinasi heterofilik adalah positif dalam 60% orang muda selepas 2 minggu dan dalam 90% selepas 4 minggu dari permulaan manifestasi klinikal penyakit. Oleh itu, untuk mendiagnosis mononukleosis berjangkit, perlu menjalankan beberapa kajian: pada minggu pertama penyakit (tindak balas mungkin negatif) dan selepas 1-2 minggu (tindak balas mungkin menjadi positif). Kandungan antibodi heterofilik berkurangan pada akhir tempoh akut proses berjangkit, tetapi titer mereka boleh ditentukan dalam masa 9 bulan selepas permulaan gejala klinikal. Reaksi Paul-Bunnell boleh bertukar dari positif kepada negatif, walaupun terhadap latar belakang sisa hematologi dan gejala klinikal pada pesakit. Kepekaan kaedah pada orang dewasa adalah 98%, kekhususan - 99%. Pada kanak-kanak dengan mononukleosis berjangkit di bawah umur 2 tahun, antibodi heterophile dikesan hanya dalam 30% pesakit, pada usia 2-4 tahun - dalam 75%, lebih 4 tahun - lebih daripada 90%. Kepekaan kaedah pada kanak-kanak adalah kurang daripada 70%, kekhususan - 20%. Penurunan dan kemudian peningkatan berulang dalam titer antibodi heterophile boleh berlaku sebagai tindak balas kepada jangkitan lain (paling kerap dengan jangkitan virus pada saluran pernafasan atas). Reaksi Paul-Bunnell tidak spesifik untuk virus Epstein-Barr. Titer antibodi heterophile tidak bertindak balas silang dan tidak berkorelasi dengan antibodi khusus kepada virus Epstein-Barr, juga tidak ada kaitan dengan keterukan penyakit. Ujian ini tidak berguna untuk mendiagnosis mononukleosis berjangkit kronik (ia positif secara purata hanya dalam 10% pesakit).

Titer 1:56 dan kurang boleh didapati pada orang yang sihat dan pada pesakit dengan penyakit lain (rheumatoid arthritis, rubella). Keputusan ujian positif palsu sangat jarang berlaku.

Pada masa ini, kaedah "titik tunggal" (aglutinasi slaid) digunakan untuk menentukan antibodi kepada sel darah merah biri-biri; ia digunakan pada mulanya sebagai ujian saringan. Dari segi sensitiviti, ia adalah setanding dengan tindak balas Paul-Bunnell. Ujian slaid boleh menjadi positif palsu dalam kira-kira 2% kajian (dalam leukemia, limfoma malignan, malaria, rubella, hepatitis virus, karsinoma pankreas), dan negatif palsu pada orang dewasa - dalam 5-7% kes.

Perlu diingatkan bahawa julat sistem ujian diagnostik yang dihasilkan oleh syarikat berdasarkan penentuan titer antibodi adalah sangat luas, oleh itu adalah perlu untuk memberi tumpuan kepada titer antibodi diagnostik yang ditunjukkan dalam arahan untuk sistem ujian.

Sekiranya antibodi heterofilik tidak dikesan dan gambaran klinikal penyakit itu sepadan dengan mononukleosis berjangkit, adalah perlu untuk memeriksa serum darah untuk antibodi spesifik kelas IgM dan IgG. Untuk mengesan antibodi khusus kepada virus Epstein-Barr, kaedah imunofluoresensi tidak langsung digunakan (membenarkan pengesanan antibodi kepada antigen EA dan VCA), imunofluoresensi antipelengkap (mengesan antibodi kepada antigen EA, VCA dan EBNA) dan ELISA.

Antibodi kepada komponen EA antigen D (anti-EA-D) muncul walaupun dalam tempoh terpendam jangkitan primer dan cepat hilang dengan pemulihan.

Antibodi kepada komponen EA antigen R (anti-EA-R) boleh dikesan 3-4 minggu selepas manifestasi klinikal penyakit. Mereka berterusan dalam serum darah selama kira-kira setahun, dan sering dikesan dalam mononukleosis berjangkit atipikal atau berlarutan. Antibodi ini biasanya terdapat dalam limfoma Burkitt.

Antibodi kepada IgM kelas VCA (anti-VCA IgM) muncul sangat awal, biasanya sebelum gejala klinikal, ia dikesan pada permulaan penyakit dalam 100% kes. Titer tinggi berlaku pada 1-6 minggu dari permulaan jangkitan, mereka mula berkurangan dari minggu ke-3 dan biasanya hilang selepas 1-6 bulan. IgM anti-VCA hampir selalu ada dalam serum semasa jangkitan aktif, jadi kaedah pengesanan mereka adalah sangat sensitif dan khusus untuk episod akut mononukleosis berjangkit.

Antibodi kepada IgG kelas VCA (anti-VCA IgG) mungkin muncul lebih awal (pada 1-4 minggu), bilangannya mencapai puncak pada bulan ke-2 penyakit ini. Pada permulaan penyakit, mereka dikesan dalam 100% kes. Hanya 20% pesakit menunjukkan peningkatan 4 kali ganda dalam titer apabila memeriksa sera berpasangan. Titer berkurangan semasa pemulihan, tetapi dapat dikesan selama beberapa tahun selepas jangkitan, jadi ia tidak berguna untuk mendiagnosis mononukleosis berjangkit. Kehadiran anti-VCA IgG menunjukkan keadaan selepas jangkitan dan imuniti.

Antibodi kepada EBNA (anti-EBNA) muncul terakhir sekali, jarang hadir dalam fasa akut penyakit ini. Kandungan mereka meningkat semasa tempoh pemulihan (dalam tempoh 3-12 bulan), mereka boleh kekal dalam darah selama bertahun-tahun selepas penyakit itu. Ketiadaan anti-EBNA dengan kehadiran IgM anti-VCA dan anti-EA IgM menunjukkan jangkitan semasa. Pengesanan anti-EBNA selepas tindak balas negatif sebelum ini menunjukkan jangkitan sedia ada. Menggunakan kaedah ELISA, adalah mungkin untuk menentukan kehadiran kelas anti-EBNA IgM dan IgG secara serentak. Jika jumlah IgM anti-EBNA lebih besar daripada IgG anti-EBNA, jangkitan akut perlu dibincangkan, dengan nisbah yang bertentangan - yang pernah dialami sebelum ini.

Kehadiran satu atau lebih tanda berikut menunjukkan jangkitan primer akut:

• anti-VCA IgG (dikesan awal, dan kemudian kandungan berkurangan);
• titer yang tinggi (lebih daripada 1:320) atau peningkatan 4 kali ganda dalam titer IgG anti-VCA semasa penyakit ini;
• peningkatan sementara dalam titer anti-EA-D (1:10 atau lebih);
• IgG anti-VCA awal tanpa anti-EBNA, dan kemudian kemunculan anti-EBNA.

Jangkitan akut atau primer yang disebabkan oleh virus Epstein-Barr dikecualikan jika titer anti-VCA IgG dan anti-EBNA dalam serum darah tidak berubah apabila dikaji secara dinamik (semasa tempoh akut dan semasa pemulihan).

Kehadiran berterusan antigen awal dan anti-VCA IgG dalam titer tinggi menunjukkan fasa jangkitan kronik.

Pengesanan antibodi kepada virus Epstein-Barr digunakan untuk mendiagnosis mononukleosis berjangkit dan jangkitan kronik yang disebabkan oleh virus Epstein-Barr.

Antibodi kepada virus Epstein-Barr boleh dikesan dalam penyakit berikut: keadaan kekurangan imun sekunder, termasuk jangkitan HIV, karsinoma nasofaring, limfoma Burkitt, jangkitan CMV, sifilis, penyakit Lyme, brucellosis, dsb.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ]